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Method Article
Protocolos para a utilização de biofilmes fluxo de abrir o sistema com reatores de fluxo de gotejamento e girando reatores disco são apresentadas em detalhe.
A maioria dos micróbios na natureza são pensados para existir como superfície associados comunidades em biofilmes. Um biofilme bacteriano são encerradas dentro de uma matriz e anexado a uma superfície de formação de biofilmes. 2 e desenvolvimento são comumente estudados em laboratório, utilizando sistemas de lote, tais como placas de microtitulação ou fluxo sistemas, tais como o fluxo de células. Estas metodologias são úteis para triagem bibliotecas mutante e química (placas de microtitulação) 3 ou crescente biofilmes para visualização (células de fluxo) 4. Aqui apresentamos protocolos detalhados para Staphylococcus aureus crescendo em dois tipos adicionais de biofilmes sistema de fluxo: o gotejamento reator biofilme fluxo e reator de biofilme rotação do disco.
Reatores de gotejamento biofilme de fluxo são projetados para o estudo de biofilmes cultivados sob condições de cisalhamento baixa. 5 O reator de fluxo de gotejamento consiste em quatro canais de teste em paralelo, cada um capaz de manter um padrão de vidro cupom lâmina de microscópio de tamanho, ou um comprimento de cateter ou stint. O reator de fluxo de gotejamento é ideal para monitoramento microsensor, estudos gerais biofilme, as amostras de biofilme cryosectioning, alta produção de biomassa, as avaliações material médico e teste de dispositivo de habitação médica. 6,7,8,9
O reator de disco giratório consiste em um disco de teflon contêm recessos para cupons removível. 10 Os cupons podem removível pelo feito de qualquer material usinável. A parte inferior do disco rotativo contém um ímã de barra para permitir a rotação de disco de corte para criar superfície do líquido sobre a superfície de descarga cupons. Todo o disco contendo 18 cupons é colocado em um copo mL mil vaso do reator lado-braço. Um meio de crescimento líquido é circulado através do navio enquanto o disco é girado por um agitador magnético. Os cupons são removidos do reator e, em seguida, raspado para coletar a amostra de biofilme para estudos adicionais ou imagens de microscopia. Reatores disco rotativo são projetados para avaliações laboratoriais de eficácia biocida, a remoção do biofilme eo desempenho do anti-incrustantes materiais. 9,11,12,13
1. O gotejamento Reactor Biofilm Fluxo
2. O Reactor Biofilm Rotating Disk
3. Resultados representante
Um exemplo de um conjunto de reator de fluxo de gotejamento é mostrado se a Figura 1. Após três dias de fluxo de grandes quantidades de biofilme se acumulam na superfície do cupom, Figura 2A. A biomassa total irá variar de acordo com cepas bacterianas e condições de crescimento precisa. A micrografia eletrônica de varredura de um S. biofilme aureus cresceu no reator de fluxo de gotejamento é mostrado na Figura 2B.
Um reator de disco rotativo é mostrado na figura 3A. O protocolo descrito podem ser adaptados às necessidades específicas de qualquer microorganismo geralmente capaz de formar um biofilme. Figura 3B mostra o disco giratório com 18 discos de plástico aposta. Estes biofilmes disco-grown são particularmente bem adaptado para testes antimicrobianos e produzir resultados altamente reprodutíveis 11.
Figura 1. Gotejamento configuração do reator de fluxo. Componentes importantes são rotulados.
Figura 2. Exemplo de um fluxo de gotejamento S. biofilme aureus. A) O biofilme foi cultivado por três dias após o protocolo descrito. Tampas das duas primeiras câmaras do reator são removidos para mostrar a S. amarela biomassa biofilme aureus. B) Sacnning micrografia eletrônica de um S. biofilme aureus cresceu no reator de fluxo de gotejamento.
Figura 3. O reator disco rotativo. A) Exemplo de um reator de disco executando spinning. Componente-chave são rotulados. B) Feche acima da vista de um disco giratório.
Biofilmes cultivados em reatores diferentes, muitas vezes, têm características diferentes e cada reator tem aplicações diferentes. Neste trabalho, descrevemos a utilização de dois reatores de biofilme: um reator de biofilme por gotejamento e um reator de fluxo de disco rotativo. Reatores de fluxo de gotejamento são úteis para o crescimento de biofilmes baixo cisalhamento de uma interface ar-líquido e são adaptáveis a uma variedade de condições. Encontramo-las extremamente conveniente para estudos, ond...
NIAID conceder K22AI081748.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Drip Flow Reactors | BioSurface Technologies Corporation | DFR 110 | |
Rotating Disk Reactors | BioSurface Technologies Corporation |
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