Imuno-histoquímica em parafina da epiderme do rato utilizando anticorpos fluorescentes

Resumo

Nós descrevemos um método confiável para imunolocalização dentro da epiderme modificados, tanto para cortes congelados e parafina que usamos muito rotineiramente em nosso laboratório.

Resumo

Na epiderme, imuno-histoquímica é um meio eficiente de localização de proteínas específicas para seu compartimento expressão relativa, ou seja as camadas basal, suprabasais, e estrato córneo. A exata localização dentro da epiderme de uma determinada proteína dá pistas em direção ao seu papel funcional dentro da epiderme. Neste capítulo, descrevemos um método confiável para imunolocalização dentro da epiderme modificados, tanto para cortes congelados e parafina que usamos muito rotineiramente em nosso laboratório. Parafina geralmente fornecem morfologia muito melhor, portanto, resultados superiores e fotografias, no entanto, nem todos os anticorpos irá trabalhar com a fixação dura e tratamento envolvidas em seu processamento. Portanto, o protocolo para o seccionamento congelados também está incluído. Dentro de corte de parafina, dois protocolos de fixação são descritos (Bouin e paraformaldeído); a escolha de fixador estará diretamente relacionada com as especificações de anticorpos e pode requerer um outro método de fixação.

Protocolo

O protocolo de texto completo para essa abordagem experimental está disponível em Protocolos Springer .