1. Presença de Colilert – Teste de ausência (P – A)

1. Abra a garrafa colilert de plástico de 100 mL. A garrafa inclui uma pequena quantidade de reagente em pó que é necessário para as reações adequadas, não descarte este pó.
2. Adicione 100 mL de amostra de água na garrafa colilert.
3. Abra o tubo de travesseiro contendo o substrato de nutrientes e despeje o conteúdo na amostra de água dentro da garrafa colilert.
4. Cap e sele a garrafa colilert. Agite a garrafa vigorosamente, invertendo repetidamente a garrafa até que o substrato esteja completamente dissolvido.
5. Incubar a mistura reagente/amostra de água dentro da garrafa a 35 ± 0,5 °C por 24 h.
6. Observe a mudança de cor amarela na mistura reagente/amostra de água. A cor amarela indica que o coliforme está presente. Água clara ou nenhuma mudança de cor indica que coliformes estão ausentes.
7. Exponha a amostra de reagente/água à luz ultravioleta e observe a fluorescência azul. Fluorescência azul indica que E. coli está presente. Nenhuma fluorescência indica que E. coli está ausente(Figura 3).

Figura 3. Teste P-A negativo (esquerda), coliform positivo (médio) e E. coli positivo (direita).

2. Colilert MPN: Quanti-tray 2000

1. Abra a garrafa colilert, e a amostra de água de 100 mL na garrafa colilert.
2. Abra o tubo do travesseiro contendo substrato de nutrientes e despeje o conteúdo na amostra de água dentro da garrafa colilert.
3. Cap e sele a garrafa colilert. Agite a garrafa vigorosamente, invertendo repetidamente a garrafa até que o substrato esteja completamente dissolvido.
4. Abra cuidadosamente a bandeja Quanti 2000 apertando as bordas na parte superior da bandeja e puxando para trás a guia de papel. Continue apertando para que a bandeja esteja aberta.
5. Despeje a mistura de amostra de reagente/água na bandeja e, em seguida, incubar a amostra dentro da bandeja a 35 ± 0,5 °C por 24h.
6. Observe a mudança de cor amarela na mistura reagente/amostra de água. Conte o número de poços grandes e pequenos que sinalizam presença positiva para coliformes. A cor amarela indica que o coliforme está presente. Água clara ou nenhuma mudança de cor indica que coliformes estão ausentes.
7. Exponha a amostra de reagente/água à luz ultravioleta e observe a fluorescência azul. Conte o número de poços grandes e pequenos que sinalizam presença positiva para E. coli. A fluorescência azul indica que E. coli está presente. Nenhuma fluorescência indica que E. coli está ausente.
8. Use a folha quanti-tray de 2000 MPN (Figura 4) para quantificar a concentração para cada organismo indicador presente em 100 mL de água. Use a planilha para comparar grande: pequena relação de poço positivo para presença enumerada para ambos os organismos indicadores.

Figura 4. Quanti-tray negativo (esquerda), coliform positivo (médio) e E. coli positivo (direita).