1. Presenza di Colilert – Test di assenza (P – A)

1. Aprire la bottiglia di plastica Colilert da 100 ml. La bottiglia include una piccola quantità di reagente in polvere che è necessario per le reazioni corrette, non scartare questa polvere.
2. Aggiungere 100 ml di campione d'acqua nella bottiglia Colilert.
3. Aprire il tubo del cuscino contenente il substrato nutritivo e versare il contenuto nel campione d'acqua all'interno della bottiglia Colilert.
4. Tappare e sigillare la bottiglia Colilert. Agitare vigorosamente la bottiglia, invertendo ripetutamente la bottiglia fino a quando il substrato non è completamente sciolto.
5. Incubare la miscela di reagente/campione d'acqua all'interno del flacone a 35 ± 0,5 °C per 24 ore.
6. Osservare il cambiamento di colore giallo nella miscela di reagente/campione d'acqua. Il colore giallo indica la presente coliforme. Acqua limpida o nessun cambiamento di colore indica che i coliformi sono assenti.
7. Esporre il campione di reagente/acqua alla luce ultravioletta e osservare la fluorescenza blu. La fluorescenza blu indica che E. coli è presente. Nessuna fluorescenza indica che E. coli è assente (Figura 3).

Figura 3. Test P-A negativo (a sinistra), coliforme positivo (al centro) ed E. coli positivo (a destra).

2. Colilert MPN: Quanti-vassoio 2000

1. Aprire la bottiglia Colilert e 100 ml di campione d'acqua nella bottiglia Colilert.
2. Aprire il tubo del cuscino contenente substrato nutritivo e versare il contenuto nel campione d'acqua all'interno della bottiglia Colilert.
3. Tappare e sigillare la bottiglia Colilert. Agitare vigorosamente la bottiglia, invertendo ripetutamente la bottiglia fino a quando il substrato non è completamente sciolto.
4. Aprire con attenzione Quanti-tray 2000 spremendo i bordi nella parte superiore del vassoio e tirando indietro la linguetta della carta. Continuare a spremere in modo che il vassoio sia aperto.
5. Versare la miscela di reagente/campione d'acqua nel vassoio, quindi incubare il campione all'interno del vassoio a 35 ± 0,5 °C per 24 ore.
6. Osservare il cambiamento di colore giallo nella miscela di reagente/campione d'acqua. Contare il numero di pozzi grandi e piccoli che segnalano la presenza positiva per i coliformi. Il colore giallo indica la presente coliforme. Acqua limpida o nessun cambiamento di colore indica che i coliformi sono assenti.
7. Esporre il campione di reagente/acqua alla luce ultravioletta e osservare la fluorescenza blu. Contare il numero di pozzi grandi e piccoli che segnalano la presenza positiva per E. coli. La fluorescenza blu indica che E. coli è presente. Nessuna fluorescenza indica che E. coli è assente.
8. Utilizzare il foglio Quanti-tray 2000 MPN (Figura 4) per quantificare la concentrazione per ciascun organismo indicatore presente in 100 ml di acqua. Usa il foglio di calcolo per confrontare il rapporto tra pozzi positivi grandi e piccoli per enumerare la presenza di entrambi gli organismi indicatori.

Figura 4. Quanti-vassoio negativo (a sinistra), coliforme positivo (al centro) ed E. coli positivo (a destra).