1. Protocolo Geral para Uso seguro de Centrífuga
2. Precauções adicionais ao manusear produtos químicos perigosos ou materiais infecciosos
3. Situações de emergência e suas medidas de segurança
Uma situação de emergência pode surgir se o rotor falhar ou se houver um derramamento na centrífuga devido à quebra do tubo ou má manipulação. Nessas situações, devem ser tomadas as seguintes medidas.
4. Manutenção da Centrífuga
NOTA: O corpo da centrífuga é geralmente feito de metais que podem corroer na presença de umidade, produtos químicos ou agentes de limpeza fortes. Para a manutenção adequada da centrífuga, recomenda-se seguir cuidadosamente as instruções do fabricante para limpeza e manutenção. Fora isso, algumas medidas gerais para manutenção a serem mantidas em mente são as seguintes.
A centrifugação é uma das ferramentas mais poderosas utilizadas em laboratórios para a separação de misturas heterogêneas, mas pode ser perigosa e, portanto, precauções de segurança devem ser aplicadas.
Uma centrífuga rapidamente gira amostras para separar materiais heterogêneos, o que induz forças centrífugas extremas nas amostras e no instrumento. Devido à alta velocidade em que uma centrífuga opera, pode causar ferimentos graves ao usuário se mal manuseado. Portanto, deve-se tomar cuidado especial ao utilizar uma centrífuga para evitar derramamentos e danos ao equipamento.
Este vídeo ilustrará o mecanismo de uma centrífuga e como operar e manter uma com segurança.
Antes de entrar em detalhes das medidas de segurança, vamos revisar rapidamente o básico da centrifugação. Centrífugas contêm um rotor alojado em um fuso. Rotores de tamanho diferente geralmente podem ser instalados em um único fuso para acomodar diferentes garrafas de amostra, tubos ou sacos. Um motor gira o rotor em um RPM especificado ou revoluções por minuto. Isso, por sua vez, dá a força centrífuga na mistura heterogênea dirigida para longe do eixo de rotação, que separa partículas com diferentes densidades.
Diferentes tipos de centrífugas operam em diferentes RPMs. Centrífugas de baixa velocidade funcionam a menos de 10.000 RPMs, alta velocidade até 21.000 e ultracentrífugas para 30.000 ou mais. Cada tipo tem rotores diferentes que são compatíveis com ele. Após a corrida, um sistema de frenagem geralmente diminui a velocidade do rotor. Em qualquer centrífuga, alta velocidade deforma o rotor.
Em uso normal, ele voltará ao seu tamanho anterior. No entanto, se a força devido à fiação exceder a força máxima que o rotor pode suportar, então ele pode ficar permanentemente deformado. Isso pode levar a rachaduras, que podem, por sua vez, levar a falhas graves. Falhas centrífugas, por outro lado, podem levar a vazamento de amostras, que podem ser perigosas se materiais perigosos estiverem envolvidos e devem ser tratados com cuidado. Agora, vamos mostrar como preparar amostras e usá-las com segurança na centrífuga.
Primeiro, selecione tubos de centrífugas apropriados compatíveis com as velocidades rotativas que deseja usar. Verifique a documentação para descobrir os limites do tubo. Os tubos devem estar intactos e livres de rachaduras. Encha cada um a não mais do que 3/4 cheio para evitar derramamentos. Em seguida, certifique-se de que os tubos estão equilibrados e tampá-los firmemente.
Ao centrifugar amostras químicas ou biológicas perigosas, tome precauções especiais. Use equipamentos de proteção apropriados e prepare amostras em um ambiente de trabalho adequado, como um capô de fumaça ou um armário de fluxo laminar. Para obter mais informações sobre esses recursos de segurança, consulte os vídeos do JoVE em Fume Hoods.
Se necessário, use uma contenção secundária para materiais perigosos, como uma pastilha de vidro ou plástico. Também podem ser utilizados tubos de segurança selados que fornecem um ambiente contido. Todos devem ser treinados antes de usar qualquer centrífuga ou rotor.
Selecione um rotor apropriado para a centrífuga. Verifique se o rotor e sua tampa estão limpos e secos e não possuem rachaduras ou deformidades. Certifique-se de que os anéis O no rotor ou na tampa não estejam gastos. Além disso, verifique o fuso centrífuga para ver se ele está dobrado ou tem outras deformidades. Em seguida, coloque o rotor no eixo certificando-se de que está corretamente sentado. Insira amostras no rotor, tendo certeza de que os tubos se encaixam feio no rotor.
Sempre coloque tubos equilibrados em frente um ao outro. Cubra o rotor, garantindo que o selo esteja apertado. Feche a tampa da centrífuga e inicie seu programa. Novamente, consulte o vídeo de centrífuga anterior da JoVE, para obter mais informações sobre a execução de um programa de centrífugas.
Fique na centrífuga até atingir sua velocidade máxima. Familiarize-se com a localização do botão de alimentação. Desligue o botão de alimentação se houver sons ou vibrações incomuns para parar a centrífuga imediatamente. Então evacue a área imediata até que o rotor pare. Uma vez parado, inspecione as amostras para derramamento e o rotor para quaisquer anormalidades ou desequilíbrios. Se não houve problemas, espere até que a centrífuga tenha concluído seu programa e pare completamente.
Espere mais meia hora se os produtos químicos formadores de aerossol estiverem presentes. Caso contrário, você pode abrir
a centrífuga imediatamente. Remova as amostras e leve-as de volta para uma área especializada para abertura, se necessário. Em caso de derramamento, limpe a centrífuga imediatamente. Use EPI apropriado para qualquer perigo presente e descarte materiais contaminados de acordo com as diretrizes. Não use fios abrasivos para limpar, pois podem danificar o rotor. Alerte o pessoal de emergência e não tente limpar a centrífuga se os perigos fatais tiverem derramado.
Descontamine o rotor com alvejante de 10% para quaisquer amostras biológicas utilizadas na centrífuga, independentemente do derramamento ou não. Deixe o alvejante ficar por 30 minutos e depois enxágue 70% de etanol e ar seco. Por último, remova e inspecione o rotor para obter qualquer dano e observe seu uso no diário de bordo.
Você acabou de assistir "Introdução em Centrífuga Uso" da JoVE. Agora você deve entender como preparar suas amostras, bem como como operar e manter o instrumento.
Obrigado por assistir.