1. Use equipamentos de proteção individual adequados (EPI)

As condições de operação de alta pressão e temperatura encontradas durante o autoclaving representam potenciais riscos de queimadura de calor ou explosão. O EPI apropriado inclui um casaco de laboratório, óculos de segurança, luvas resistentes ao calor e sapatos de dedo fechado; estes devem ser usados ao carregar e descarregar materiais da autoclave. Ao lidar com amostras líquidas, use um avental e escudo facial como EPI adicional.

2. Preparação de Materiais a serem Carregados

1. Identificar material compatível com autoclave e material incompatível autoclave
   Embora a autoclavagem represente um método comumente utilizado e econômico para descontaminação, nem todos os materiais são adequados para autoclavagem devido às condições de trabalho de alta pressão e temperatura. Em geral, todos os materiais que evaporarão ou derreterão sob o vapor pressurizado não são compatíveis com autoclavagem. Isso inclui materiais como solventes orgânicos, plástico pouco resistente ao calor, como poliestireno, polietileno e metais, excluindo aço inoxidável. Nunca autoclave substâncias químicas inflamáveis, corrosivas, tóxicas, reativas ou radioativas. Os materiais compatíveis para autoclavagem incluem pyrex ou vidro borossilicato tipo I, polipropileno, policarbonato, luvas, aço inoxidável, pontas de pipeta, papel (colocado dentro de sacos de autoclave) e soluções de mídia.
2. Material de embalagem
   Após a identificação de materiais compatíveis com autoclave, a embalagem adequada também é importante, pois garante segurança e autoclavagem eficiente. Aqui estão os princípios básicos quando materiais de embalagem:
   1. Use sempre um recipiente secundário feito de polipropileno ou aço inoxidável.
   2. Para amostras líquidas, encha o frasco em torno de 1/2 cheio e solte as tampas ou use fechos ventilados. Nunca encha os recipientes com mais de 2/3 cheios com a tampa totalmente apertada.
   3. Inspecione a nave de vidro para ter certeza de que não há rachaduras. Se forem identificadas rachaduras, descarte os vidros em um recipiente adequado. Nunca autoclave um navio de vidro quebrado conhecido.
   4. Use sempre sacos compatíveis com autoclave para embalar resíduos. Os sacos devem ter fitas de indicação e devem ser abertos nas extremidades antes de carregar para permitir vapor dentro do saco.
   5. Nunca sobrecarregue os sacos ou recipientes para permitir fluxo de vapor suficiente para esterilização completa. Deixe espaço entre os itens.
   6. Não misture materiais incompatíveis.
   7. Nunca coloque itens afiados no saco de lixo.

3. Material de carga

1. Verifique o interior da autoclave para ter certeza de que não há perigo potencial do usuário anterior.
2. Limpe o dreno antes de carregar os materiais para permitir uma boa circulação.
3. Certifique-se de que os sacos não toquem nas paredes internas da autoclave para evitar o derretimento.
4. Líquidos e materiais secos requerem ciclos diferentes e precisam ser autoclavados separadamente.
5. Feche a porta com firmeza.

4. Operação da Autoclave

1. Apenas pessoas treinadas devem ser autorizadas a operar autoclaves. Consulte o manual do equipamento, se necessário, uma vez que os protocolos de operação variam entre diferentes autoclaves.
2. Depois de certificar-se de que a porta autoclave está firmemente fechada, coloque a temperatura de autoclavagem para 121 °C e mantenha uma pressão de pelo menos 15 psi.
3. Para definir o tempo e o ciclo da autoclave, os seguintes fatores precisam ser considerados:
   1. Recomendações do equipamento do manual do fabricante.
   2. O tipo de materiais carregados dentro: seco ou líquido.
   3. As quantidades de material(s) carregados.
   4. Forma e tamanho do recipiente usado.
   5. Condutividade térmica de recipientes e materiais.
   6. Propósito de descontaminação.

5. Descarregamento de Materiais Autoclavados(s)

1. Use EPI adequado como descrito acima.
2. Certifique-se de que a temperatura e a pressão da autoclave voltaram a um intervalo seguro.
3. Fique atrás da porta e abra cuidadosamente a porta para liberar qualquer vapor que sobrou dentro da autoclave para dentro da sala.
4. Deixe que os materiais dentro da autoclave suportem por 10 minutos para liberar qualquer vapor ou ar quente preso dentro do material.
5. Não agite nenhum material líquido enquanto o remove da autoclave. Se necessário, rotule o material como quente para evitar queimaduras de calor a um indivíduo que pode estar potencialmente inconsciente do fato de que o material foi recentemente autoclavado.
6. Aguarde que o material esfrie até a temperatura ambiente antes de ser transportado dentro do laboratório ou fora do laboratório. Em ambos os casos, certifique-se de utilizar a contenção adequada para o transporte.
7. Registre os detalhes dos materiais e condições de autoclavagem no registro do usuário.