Para começar, coloque as seringas de insulina de calibre 30 de um mililitro em uma geladeira de quatro graus Celsius para refrigeração. Mantenha a mistura de gel de matriz recém-preparada contendo células vasculares no gelo até que o rato esteja pronto para a injeção. Em seguida, coloque o mouse devidamente anestesiado na placa cirúrgica em decúbito ventral e fixe seus membros na placa com fita adesiva.
Carregar uma seringa de insulina pré-resfriada com 300 microlitros da mistura de gel de matriz, evitando a formação de bolhas. Desinfete a pele na parte de trás do rato com compressas de álcool a 75% e, por via subcutânea, injete por via subcutânea 300 microlitros da mistura de gel de matriz na seringa num dos lados das costas do animal. Retire suavemente a agulha do local de injeção para evitar qualquer fuga da mistura de gel.
Assegure-se da formação de uma pequena corcova no local da injeção. Posicione o mouse em uma almofada de aquecimento por dois minutos para permitir que a mistura de gel de matriz coagule e forme um plugue. Repita as etapas demonstradas para criar um plugue no outro lado das costas do mouse.
Marque as bordas da corcova usando uma caneta marcadora. Alojar o animal em um laboratório de animais experimentais livre de patógenos específicos a 20 a 24 graus com ciclos de luz de 12 horas e escuro de 12 horas por sete dias.
