Para começar, pegue os extratos aquoso e etanólico obtidos da Gracilaria gracilis seca. Em uma microplaca de 96 poços, dispensar dois microlitros de cada amostra e 198 microlitros de DPPH dissolvidos em etanol absoluto. Em seguida, usando um espectrofotômetro de microplacas, meça a absorbância em 517 nanômetros.
Pegue os queratinócitos humanos cultivados em 96 placas de poço durante a noite. Adicionar dois microlitros dos extratos dissolvidos DMSO a 198 microlitros do meio em poços de microplacas. Remova o meio de cultura.
Adicione 100 microlitros de MTT às células e incube no escuro por 30 minutos. Para solubilizar os cristais de formazana intracelular, adicione 100 microlitros de DMSO. Usando um leitor de microplacas, meça a absorbância em 570 nanômetros.
O teste DPPH demonstrou que a temperatura de 40 graus Celsius apresentou maiores valores de inibição da atividade oxidante em comparação com os extratos obtidos à temperatura ambiente ou 70 graus Celsius. Não foram observados efeitos citotóxicos sobre os queratinócitos humanos, sugerindo que, na concentração máxima do ensaio, tanto o extrato aquoso quanto o etanólico são seguros para uso cutâneo.
