Para começar, coloque um coração espelhado embutido e uma solução de 20% de metanol por uma hora. Transfira sequencialmente o coração para concentrações crescentes de metanol para desidratá-lo. Coloque as soluções com o coração em um misturador a 60 hertz durante a desidratação, transfira o coração desidratado para uma solução fresca de 100% de metanol.
Depois de substituir a solução por metanol 100% fresco, coloque o coração a quatro graus Celsius por 10 minutos. Agora aspire a solução. Em seguida, adicione 200 mililitros de peróxido de hidrogênio a 5% em metanol para branquear o coração.
Incube o coração na solução durante a noite a quatro graus Celsius. No dia seguinte, transfira a amostra para 100% de metanol após a incubação, transfira-a para uma solução contendo 66% de diclorometano e 33% de metanol. O coração deve afundar no fundo do frasco.
Coloque a amostra em um misturador por três horas para garantir a dilapidação completa do coração. Finalmente, incubar a amostra em éter dibenzílico para correspondência do índice de refração. O tecido do coração do camundongo P1 foi tornado transparente em quatro dias, enquanto um camundongo de oito semanas foi tornado transparente em sete dias.
