Drosófila Dissecção cerebral para analisar a poda sináptica dependente da experiência de butirato de etila (EB) do receptor Or42a

Para começar, pegue moscas drosófilas expostas a óleo mineral e EB por 24 horas. Rotule os frascos como um controle de veículo ou EB exposto e mantenha essas designações durante a dissecação e processamento do cérebro. Usando uma pinça, transfira uma única mosca anestesiada para um pequeno prato de PBS feito na hora.

Mergulhe totalmente a mosca em PBS para dissecção completa do cérebro. Em seguida, posicione uma mosca com o lado ventral para cima. Pegue duas pinças finas e afiadas para agarrar a parte superior do tórax com uma pinça e a cabeça, sob a tromba, com a outra.

Puxe a cabeça e o resto do corpo em direções opostas para remover a cabeça. Certifique-se de que a cabeça se desprenda facilmente do tórax e deixe a cabeça isolada para dissecção. Deslize a pinça, anteriormente usada para agarrar o tórax, sob o lado oposto da tromba.

Puxe suavemente a cutícula do exoesqueleto em direções opostas para rasgar entre os olhos e revelar o cérebro. Continue a remover a cutícula do exoesqueleto da cabeça, garantindo que todas as partes sejam removidas. Agora, enxágue uma ponta de pipeta P20 com PBS e 0,2% Triton X-100.

Transfira os cérebros para a solução de fixação no tubo da tampa imediatamente após a dissecção.