Validando a proliferação celular e migração de células RSC96 estimuladas por campo elétrico pulsado de nanossegundos (nsPEF)

Para começar, pegue as células RSC96 eletricamente estimuladas e adicione 100 microlitros das células a cada poço de uma placa de cultura de células de 96 poços. Pegue 10 microlitros de solução CCK8 do kit e adicione-os à placa de cultura de células de 96 poços. Incube a placa em uma incubadora de dióxido de carbono a 37 graus Celsius por mais 30 minutos a 4 horas.

Semeie 3 vezes 10 elevado às 5ª células em cada poço de uma placa de seis poços com um volume total de 2 mililitros por poço. Use uma ponta de pipeta para desenhar uma linha horizontal na parte inferior da cultura enquanto segura a ponta verticalmente. Depois de remover o meio de cultura, lave as células com PBS duas a três vezes.

Adicione 2 mililitros de meio sem soro a cada poço e, em seguida, coloque a placa na incubadora de 37 graus Celsius. Tire fotos sob uma ampliação de quatro vezes do microscópio invertido em 0 horas e 24 horas para observar mudanças na migração celular. O ensaio CCK8 revelou que as células RSC96 proliferaram significativamente mais rápido no grupo de 5 quilovolts por centímetro em comparação com o controle.

Em contraste, parâmetros mais altos levaram a taxas de proliferação instáveis do que os grupos controle e 5 quilovolts por centímetro. O ensaio de arranhão revelou que a taxa de migração das células RSC96 no grupo de 5 quilovolts por centímetro foi significativamente mais rápida do que a dos grupos controle e 10 quilovolts por centímetro.