Para começar, coloque um saco lacrado contendo grânulos fixos de lectina secos congelados em uma bancada em temperatura ambiente. Coloque um pano antiestático sobre a mesa e, em seguida, posicione o eliminador estático portátil de frente para o espaço de trabalho. Usando uma pinça antiestática, insira as contas em uma ponta vazia de modo que duas contas espaçadoras sejam colocadas entre as contas fixas de lectina.
Use pinças para apertar suavemente a parte superior da ponta e fechar a abertura. Endireite manualmente a ponta se ela estiver dobrada. Em seguida, armazene-o em um saco lacrado com um dessecante a quatro graus Celsius até que seja necessário.
Adicione cerca de 10 microlitros da solução de proteína do analito a um tubo contendo 10 microgramas de reagente de biotinilação seco. Vortex a mistura para misturar bem. Em seguida, centrifugue a 1000 G por cinco segundos à temperatura ambiente.
Incube os tubos por uma hora em temperatura ambiente, longe da luz. Agora adicione 90 microlitros de tampão de sondagem às amostras para diluí-lo dez vezes antes de incubar. Abra a porta frontal do dispositivo de medição de reação automatizado.
Transfira os reservatórios de líquido, as pontas preparadas e os analitos para as posições designadas no dispositivo. Ligue o interruptor de alimentação da unidade principal de um dispositivo automatizado de medição de reação. Toque no botão Iniciar diagnóstico exibido na tela.
Pressione Ensaio na tela inicial para selecionar o protocolo. Agora selecione a opção BAssaySTD do método de ensaio e pressione Avançar. Insira os nomes de amostra e pressione Avançar.
Em seguida, insira os nomes das pontas e pressione Avançar novamente. Confirme as notas à direita e pressione Iniciar para iniciar a medição. Confirme se a tela muda para o modo de execução e aguarde até que a seta Finalize seja destacada.
A tela mudará para o modo de resultado quando a medição for concluída. Insira um cartão de memória USB na porta na lateral da unidade principal. Pressione Exportar no modo de resultado para salvar os dados como um arquivo CSV para análise de dados adicional e gráficos individuais no Excel.
Foi observada uma diferença distinta no padrão de ligação das lectinas contra os 12 açúcares poliacrilamida. Os produtos proteicos purificados que foram submetidos à medição da ponta mostraram aumento da reatividade de certas lectinas aos sacarídeos.
