BKM é apoiada por um Instituto Nacional de Saúde (NIH) / National Heart Lung and Blood Institute (NHLBI) subvenção (R01-HL085487). MH é apoiado pela American Heart Association Nacional (AHA) Scientist Desenvolvimento Grant (SDG) e da Sociedade de Cardiologia Geriátrica.

1. Preparação da Área Operacional <ol><li> A superfície de operação é o primeiro preparado por desinfecção da área com álcool 70%. </li><li> Todos os instrumentos cirúrgicos devem ser esterilizados com um esterilizador quente talão antes da cirurgia (e entre cirurgias rato individual). Estes instrumentos incluem: tesoura cirúrgica (2), fórceps (1), fórceps curvos (1), porta-agulha (2), e um rectractor peito. </li><li> Gaze de algodão e aplicadores devem estar disponíveis, a fim de gerenciar a hemorragia. </li><li> Ajustar a temperatura de um sistema de cobertor homeotérmicos (almofada de aquecimento), a ser usado para manter a temperatura corporal do animal a 37 ± 1 ° C, a fim de evitar uma queda drástica da temperatura corporal; o tamanho de um infarto depende a duração da oclusão como a temperatura do corpo também (Tarnavski et al.). </li><li> Antes da anestesia, cada animal receberá uma dose de buprenorfina (0,1-2,5 mg / kg SQ) e comprimidos orais carprofeno (Rimadyl, Bioserv comprimido; 1 comprimido) no dia anterior à cirurgia. No momento imediatamente anterior à cirurgia, cada animal vai novamente receber uma dose de buprenorfina (0,1-2,5 mg / kg SQ). </li><li> Nota: Para os estudos envolvendo a avaliação da função cardíaca e remodelamento cardíaco durante um período de tempo (7 - 28 dias e além), uma dose de buprenorfina (0,1-2,5 mg / kg SQ) será administrada, a cada 6 horas após a cirurgia por 24-48 horas após a cirurgia e carprofeno comprimidos orais serão fornecidas uma vez ao dia (ver &quot;recuperação pós-operatória&quot;). </li></ol> 2. Preparação e intubação de Ratos <ol><li> Antes da indução da anestesia, os animais serão examinados para identificar quaisquer condições pré-existentes que podem complicar o resultado cirúrgico; exame físico irá incluir a inspecção visual e medição da freqüência cardíaca, freqüência respiratória e temperatura corporal e peso corporal. </li><li> Se os animais estão determinados a ser saudável, 250-300 gramas ratos machos (eg Sprague Dawley) serão pesados ​​e características de identificação serão gravados. </li><li> Ratos são, então, anestesiados com 80 mg / kg de pentobarbital, o nível correto de anestesia é verificada através da resposta a retirada do membro, aplicando pressão do leito ungueal rato (tep pinch-reflex) e periodicamente durante todo o procedimento. </li><li> Buprenorfina (0,1-2,5 mg / kg; SQ) será administrado no momento da cirurgia. </li><li> Um barbeador elétrico é então usada para raspar o pêlo forma as áreas do pescoço e no peito. Nota: Para os estudos envolvendo a avaliação da função cardíaca e remodelamento cardíaco durante um período de tempo (7 - 28 dias e além), a pele deve estar completamente raspada longe da área cirúrgica para manter a esterilidade. </li><li> As áreas devem ser raspadas limpo e desinfetado com solução de betadine seguido por limpar a área com álcool 70%; este betadine e esfregar álcool e procedimento de desinfecção deve ser repetido três vezes. </li><li> O animal anestesiado é então colocado em posição supina em um sistema de cobertor homeotérmicos (almofada de aquecimento), a fim de manter a temperatura corporal. </li><li> Entubação endotraqueal é então realizada pela primeira cuidadosamente expondo a traquéia, para melhorar a visualização de intubação, fazendo uma incisão 5 milímetros mid-pescoço e retração do tecido muscular, logo acima da traquéia. </li><li> Isto permite melhor visualização para inserção do tubo endotraqueal (tamanho de polietileno 90; PE 90), onde a tubulação é chanfrado na borda para facilitar a entrada através da laringe. </li><li> O tubo endotraqueal é inserido na traquéia, com visualização ajudado usando um microscópio estéreo cirúrgico, com cuidado manipular a língua durante a visualização da traquéia e na entrada do tubo endotraqueal. </li><li> Ventilação mecânica é então obtida, ligando o tubo endotraqueal a Kent Científico ventilador (TOPO Dual Mode) de ciclismo a 80 respirações por minuto e um volume corrente de 1,2 ml por 100 gramas de peso corporal. </li><li> A cortina estéril é então colocada sobre o rato, deixando apenas a área cirúrgica expostos, minimizando assim possível contaminação durante a operação. </li><li> O cirurgião animal e assistentes estão a usar máscara, avental e luvas; com luvas sejam alteradas entre as cirurgias de ratos individual. </li></ol> 3. Transitória Esquerda ligadura da artéria descendente anterior (LAD) <ol><li> Uma vez que a respiração estável é estabelecida, o tórax é aberto no quarto espaço intercostal esquerdo, usando hemostats ou tesoura rodada final para abrir o espaço, mas sem cortar o tecido para que o risco de hemorragia pode ser reduzido. </li><li> Um retrator peito é então posicionado dentro do quarto espaço intercostal, a fim de difundir as costelas para que o ventrículo esquerdo (LV) é exposto, tendo o cuidado máximo para não danificar o pulmão. </li><li> O pericárdio é então aberta, mas deixou no local, se possível. </li><li> O proximal da artéria anterior esquerda (LAD) descendente serão identificados (Figura-1), com o uso de comomicroscópio estéreo urgical, eo LAD é, então, transitoriamente, ligada (ou pode ser amarrado com um nó corrediço) usando uma sutura prolene 6-0 por um período de 30 minutos de isquemia (Figura-1), mas sem exteriorização do coração. </li><li> Para permitir reperfusão cardíaca, tesoura microcirúrgica são usados ​​para cortar o nó na ligadura (ou liberando o slipknot), feita pelo prolene 6-0 sutura, 30 minutos após a ligadura da LAD. </li><li> Em ratos sham controle, o procedimento é idêntico, exceto o LAD não é transitoriamente ligada. </li><li> A saída é, então, brevemente (1-2 segundos) off beliscou no respirador para permitir a re-inflação dos pulmões. </li><li> O retrator peito é então removido e as costelas são desenhados em conjunto, utilizando uma sutura prolene 2-0 com um padrão de sutura interrompido. </li><li> Uma vez que as costelas estão fechadas, a saída do ventilador é novo brevemente (1-2 segundos) comprimiu fora para garantir a respiração adequada. </li><li> A pele é fechada com sutura prolene 6-0 com um padrão de sutura contínua. </li></ol> 4. Confirmação de ligadura de sucesso da Artéria LAD <ol><li> Ligadura adequado do LAD será confirmada pela observação de branqueamento de tecido do miocárdio distal à sutura, bem como a disfunção da parede anterior, como observado durante a ligadura LAD transitória. </li><li> Reperfusão será verificada pelo retorno de cor vermelha para o tecido do miocárdio e da demonstração de alguma recuperação de movimento da parede anterior; como observado imediatamente após a ligadura LAD transitória. </li><li> Nota: Para os estudos envolvendo a avaliação da função cardíaca e remodelamento cardíaco durante um período de tempo (7 - 28 dias e além), o ecocardiograma serão realizados 24 horas ligadura LAD post, a fim de determinar a extensão do induzido infarto do miocárdio. Todos os animais com um encurtamento do ventrículo esquerdo fracionária (LV FS) &lt;20%, determinado a partir de um ecocardiograma, assim como disfunção de movimento da parede anterior de acordo com o infarto, serão identificados e usados ​​para acompanhamento da função cardíaca e estudos de remodelação. Ratos Sham controle deverão ter um normal LV FS entre 40-45% (del Monte et al). </li></ol> 5. Recuperação pós-operatório <ol><li> Uma vez que a cirurgia está completa, a cortina estéril sobre o animal será removido. A temperatura do corpo (por um termômetro retal), freqüência respiratória (por inspecção visual), freqüência cardíaca (por palpitações), e sinais de dor anormal devem ser monitorados até que o animal se torna ambulatorial. </li><li> O rato vai ser retirado do ventilador e, em seguida, ser colocado em uma gaiola animal e permitiu a recuperação da anestesia. Nesta gaiola, uma extremidade da gaiola vai ser aquecido por uma almofada de aquecimento para permitir que o rato para procurar calor. Além disso, a água estará disponível para o rato durante este período de observação. </li><li> Se sinais de desidratação são observados após a cirurgia, 0,5 ml de solução salina estéril será injetada por via intraperitoneal (IP). </li><li> Buprenorfina (0,1-2,5 mg / kg; SQ), então, ser administrado imediatamente após a cirurgia, e durante a recuperação pós-operatória. </li><li> Nota: Para os estudos envolvendo a avaliação da função cardíaca e remodelamento cardíaco durante um período de tempo (7 - 28 dias e além), uma dose de buprenorfina (0,1-2,5 mg / kg SQ) será administrada, a cada 6 horas após a cirurgia por 24-48 horas após a cirurgia. Carprofeno comprimidos oral (Rimadyl, Bioserv comprimido) também será fornecido (1-comprimido por dia) durante pelo menos 48 horas após a cirurgia. </li></ol> 6. Avaliação histológica da Reperfusão Isquemia <ol><li> Após a conclusão do período de reperfusão de 4 horas, os ratos serão anestesiados novamente com 80 mg / kg de pentobarbital e da LAD é ligada, mais uma vez (ou o slipknot pode ser retied) (Huang et al e Kaiser et al). </li><li> 1 ml de 5% de Evan Blue (em tampão fosfato) é injetado na câmara ventricular direita e permitiu a perfundir por 2 minutos. </li><li> Depois de 2 minutos, 1 ml de solução de cloreto de potássio saturado é então injetado na câmara ventricular direita, a fim de parar o coração de bater. </li><li> O coração é então rapidamente extirpado, embutidos em 2% agarose tampão fosfato, e em seguida seccionados em fatias de 1-2 mm. </li><li> O miocárdio viável é, então, corados com o cloreto de tetrazólio 2% trifenil (TTC) por 20 minutos e imagens de cada fatia é capturado. As imagens são então quantificados de modo a identificar a quantidade de área do miocárdio: (1) que não em risco é (seções azul), (2)-área de risco (AAR, vermelho e branco seções), e (3 ) área que está infartada (branco &quot;imaculada&quot; seções) (Figura-2). </li></ol> 7. Resultados representante Para estudos envolvendo a avaliação do tamanho do infarto e da área em risco (AAR), pelo corante azul de Evan e cloreto de trifenil tetrazólio (TTC), após 4 horas de reperfusão, ligadura adequado do LAD pode ser confirmadoobservando branqueamento de tecido do miocárdio distal à sutura, bem como a disfunção da parede anterior, como observado durante a ligadura LAD transitória. Reperfusão pode ser verificado pelo retorno de cor vermelha para o tecido do miocárdio e da demonstração de alguma recuperação de movimento da parede anterior; observado imediatamente após a ligadura LAD transitória. Para estudos envolvendo a avaliação da função cardíaca e remodelamento cardíaco durante um período de tempo (7 - 28 - dias e além), ligadura apropriada da isquemia seguida de reperfusão também pode ser confirmada pelo branqueamento dos tecidos, disfunção da parede anterior eo retorno da cor vermelha, com alguma recuperação do movimento da parede após a reperfusão. Além disso, a função cardíaca prejudicada pode ser determinada por um ecocardiograma sendo realizada 24 horas pós ligadura LAD, a fim de determinar a extensão do infarto do miocárdio induzido. Todos os animais com um encurtamento do ventrículo esquerdo fracionária (LV FS) &lt;20%, determinado a partir de um ecocardiograma, assim como disfunção de movimento da parede anterior de acordo com o infarto, serão identificados e usados ​​para acompanhamento da função cardíaca e estudos de remodelação. Ratos Sham controle deverão ter um normal LV FS entre 40-45% (del Monte). <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. Diagrama esquemático de um infarto do miocárdio e Ligadura LAD. Diagrama esquemático de (1) enfarte do miocárdio e (2) ligadura da anterior ventricular esquerda descendente anterior (ADA) da artéria utilizando uma sutura, utilizado para simular o infarto do miocárdio causadas pela formação de praga. <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura 2. Imagem Representante de um coração de rato após IAM. Imagem representativa do coração de rato mostrando a área em azul (área de não-perfusão coronária obstruída), área em vermelho área de perfusão (oclusão coronária indicando a área em risco (AAR) de infarto, e área em branco / amarelo zona (infarto dentro da AAR).

<ol>
	<li>Hunt, S. A., Baker, D. W., Chin, M. H., Cinquegrani, M. P., Feldmanmd, A. M., Francis, G. S., Ganiats, T. G., Goldstein, S., Gregoratos, G., Jessup, M. L., Noble, R. J., Packer, M., Silver, M. A., Stevenson, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SC.ACC/AHA+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Chronic+Heart+Failure+in+the+Adult:+Executive+Summary+A+Report+of+the+American+College+of+Cardiology/American+Heart+Association+Task+Force+on+Practice+Guidelines+(Committee+to+Revise+the+1995+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Heart+Failure).">SC.ACC/AHA Guidelines for the Evaluation and Management of Chronic Heart Failure in the Adult: Executive Summary A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines (Committee to Revise the 1995 Guidelines for the Evaluation and Management of Heart Failure).</a> Circulation. 104, 2996-3007 (2001).</li><li>Goldman, S., Raya, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+infarct+model+of+myocardial+infarction+and+heart+failure.">Rat infarct model of myocardial infarction and heart failure.</a> J Card Fail. 1, 169-177 (1995).</li><li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., &amp;amp, I. z. u. m. o., S, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+cardiac+surgery:+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies.">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).</li><li>Thygesen, K., Alpert, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Universal+Definition+of+Myocardial+Infarction.">Universal Definition of Myocardial Infarction.</a> Circulation. 116, 2634-2653 (2007).</li><li>Vasilyev, N., Williams, T., Brennan, M. L., Unzek, S., Zhou, X., Heinecke, J. W., Spitz, D. R., Topol, E. J., Hazen, S. L., Penn, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloperoxidase-generated+oxidants+modulate+left+ventricular+remodeling+but+not+infarct+size+after+myocardial+infarction.">Myeloperoxidase-generated oxidants modulate left ventricular remodeling but not infarct size after myocardial infarction.</a> Circulation. 112, 2812-2820 (2005).</li><li>McConnell, B. K., Popovic, Z., Mal, N., Lee, K., Bautista, J., Forudi, F., Schwartzman, R., Jin, J. P., Penn, M., Bond, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+protein+kinase+A+interaction+with+A-kinase-anchoring+proteins+in+the+heart+in+vivo:+effects+on+cardiac+contractility,+protein+kinase+A+phosphorylation,+and+troponin+I+proteolysis.">Disruption of protein kinase A interaction with A-kinase-anchoring proteins in the heart in vivo: effects on cardiac contractility, protein kinase A phosphorylation, and troponin I proteolysis.</a> J Biol Chem. 284, 1583-1592 (2009).</li><li>Monte, D. e. l., Butler, F., Boecker, K., Gwathmey, W., K, J., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+of+aortic+banding+followed+by+gene+transfer+during+hypertrophy+and+heart+failure.">Novel technique of aortic banding followed by gene transfer during hypertrophy and heart failure.</a> Physiol. Genomics. 9, 49-56 (2002).</li><li>Huang, M. H., Nguyen, V., Wu, Y., Rastogi, S., McConnell, B. K., Wijaya, C., Uretsky, B. F., Poh, K. K., Tan, H. C., Cheng, J., Perin, E., Fujise, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+Infarct+Size+Reduction+by+Combination+Therapy+with+Milrinone+and+Esmolol+at+Early+Reperfusion+during+Acute+Myocardial+Infarction.">Synergistic Infarct Size Reduction by Combination Therapy with Milrinone and Esmolol at Early Reperfusion during Acute Myocardial Infarction.</a> American Journal of Physiology. , .</li><li>Kaiser, R. A., Bueno, O. F., Lips, D. J., Doevendans, P. A., Jones, F., Kimball, T. F., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+inhibition+of+p38+mitogen-activated+protein+kinase+antagonizes+cardiac+injury+and+cell+death+following+ischemia-reperfusion+in+vivo.">Targeted inhibition of p38 mitogen-activated protein kinase antagonizes cardiac injury and cell death following ischemia-reperfusion in vivo.</a> J Biol Chem. 279, 15524-15530 (2004).</li></ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

Infarto agudo do miocárdio (IAM) em ratos, também conhecido como isquemia-reperfusão (IR), é comumente usado para imitar o remodelamento ventricular humana que levam à insuficiência cardíaca. A progressão da disfunção ventricular esquerda e insuficiência cardíaca em modelos animais (ratos e camundongos) é semelhante à observada em humanos que sustentam um MI, sobreviver e posteriormente desenvolve insuficiência cardíaca (Goldman). Este procedimento descrito uma versão desta técnica e também continha n...

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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Ventilator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kent Scientific</td>
<td>TOPO</td>
<td>TOPO Dual Mode</td>
</tr>
<tr>
<td>Thermostatic Circulator E103</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>732802</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Homeothermic Blanket System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>55-7222F</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereo Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nikon Instruments</td>
<td>MMA36300</td>
<td>SMZ-645 Zoom Stereo Microscope</td>
</tr>
<tr>
<td>Hot Bead Sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>610183</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Electric Shaver</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>General Electric</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Blades and Handles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>WelchAllyn</td>
<td>690047-1</td>
<td>Standard (Lamp) Laryngoscope Blades</td>
</tr>
<tr>
<td>Surgical Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14014-17</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Surgical Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14072-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11028-15</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Curved Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11001-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>12004-18</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>91201-13</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Chest Retractor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>17008-07</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Masks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR </td>
<td>47730-640</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gauze Sponges</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dermacea</td>
<td>441205</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile Gloves</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cardinal Health</td>
<td>2D7203I</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PE 90 tubing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>427420</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>20 ml Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>301625</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>6-0 Prolene Suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ETHICON</td>
<td>8706H</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2-0 Silk Suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ETHICON</td>
<td>K873H</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pentobarbital Sodium Injection</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>OVATION</td>
<td>NDC 67386-501-55</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Povidone-Iodine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>NOVAPLUS</td>
<td>V10-8204</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Buprenorphine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pharmaceuticals Inc.</td>
<td>NDC 12496-0757-1</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

acute myocardial infarction in rats

Com insuficiência cardíaca levando a causa de morte nos EUA (Hunt), a pesquisa biomédica é fundamental para avançar os tratamentos médicos para doenças cardiovasculares. Modelos animais que imitam doença cardíaca humana, tais como infarto do miocárdio (IAM) e isquemia e reperfusão (IR) que induz a insuficiência cardíaca, bem como a pressão de sobrecarga (constrição da aorta transversa) que induz a hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca (Goldman e Tarnavski), são modelos úteis para estudar doenças cardiovasculares. Em particular, isquemia do miocárdio (MI) é uma das principais causas de morbidade e mortalidade cardiovascular apesar de controlar certos fatores de risco, como a arteriosclerose e tratamentos através de intervenção cirúrgica (Thygesen). Além disso, uma perda aguda do miocárdio após isquemia do miocárdio (MI) resulta em aumento da carga condições que induz a remodelamento ventricular da zona de fronteira infartado e controle remoto sem infarto do miocárdio. Apoptose do miócito, necrose e conseqüente aumento da carga hemodinâmica ativar múltiplos sinais bioquímicos intracelulares que inicia LV dilatação, hipertrofia ventricular distorção da forma, e formação de cicatriz de colágeno. Esta remodelação patológica e incapacidade de normalizar a parede aumentou tensões resulta em dilatação progressiva, recrutamento zona da fronteira do miocárdio na cicatriz, e, eventualmente, deterioração da função contrátil do miocárdio (ou seja, insuficiência cardíaca). A progressão da disfunção ventricular esquerda e insuficiência cardíaca em ratos é semelhante ao observado em pacientes que sustentar um infarto do miocárdio grandes, sobreviver e, posteriormente, desenvolve insuficiência cardíaca (Goldman). O modelo de infarto agudo do miocárdio (IAM) em ratos tem sido usado para imitar a doença cardiovascular humano, especificamente usada para estudar mecanismos de sinalização cardíaca associada com insuficiência cardíaca, bem como para avaliar a contribuição de estratégias terapêuticas para o tratamento da insuficiência cardíaca. O método descrito neste relatório é o modelo do rato de infarto agudo do miocárdio (IAM). Este modelo também é referido como uma cardiomiopatia isquêmica aguda ou isquemia seguida de reperfusão (IR), que é induzida por um período de 30 minutos de isquemia aguda por ligadura da artéria descendente anterior esquerda (LAD), seguido de reperfusão do tecido por liberação da ligadura LAD (Vasilyev e McConnell). Este protocolo irá focar na avaliação do tamanho do infarto e da área em risco (AAR) pelo corante azul de Evan e cloreto de trifenil tetrazólio (TTC), após 4 horas de reperfusão; comentários adicionais para a avaliação da função cardíaca ea remodelação, modificando a duração de reperfusão, também é apresentada. Globalmente, este AMI modelo animal rato é útil para estudar a conseqüência de um infarto do miocárdio sobre a função fisiológica e fisiopatológica cardíaca.

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Acute Myocardial Infarction in Rats

O modelo do rato de infarto agudo do miocárdio (IAM) é útil para estudar as consequências do enfarte do miocárdio sobre a função fisiológica e fisiopatológica cardíaca.

Infarto Agudo do Miocárdio em Ratos

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

52.6K visualizações.  University of Texas Medical Branch. O modelo do rato de infarto agudo do miocárdio (IAM) é útil para estudar as consequências do enfarte do miocárdio sobre a função fisiológica e fisiopatológica cardíaca.

Vídeo: Acute Myocardial Infarction in Rats

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and teleost fish retain a remarkable capacity for cardiac regeneration with little or no scarring throughout life2,3. It is not known why only some non-mammalian vertebrates can recreate a complete organ from remnant tissues4,5. To understand the molecular and cellular differences between regenerative responses in different species, we need to use similar approaches for inducing acute injuries.
In mammals, the most frequently used model to study cardiac repair has been acute ischemia after a ligation of the coronary artery or tissue destruction after cryoinjury6,7. The cardiac regeneration in newts and zebrafish has been predominantly studied after a partial resection of the ventricular apex2,3. Recently, several groups have established the cryoinjury technique in adult zebrafish8-10. This method has a great potential because it allows a comparative discussion of the results obtained from the mammalian and non-mammalian species.
Here, we present a method to induce a reproducible disc-shaped infarct of the zebrafish ventricle by cryoinjury. This injury model is based on rapid freezing-thawing tissue, which results in massive cell death of about 20% of cardiomyocytes of the ventricular wall. First, a small incision was made through the chest with iridectomy scissors to access the heart. The ventricular wall was directly frozen by applying for 23-25 seconds a stainless steel cryoprobe precooled in liquid nitrogen. To stop the freezing of the heart, fish water at room temperature was dropped on the tip of the cryoprobe. The procedure is well tolerated by animals, with a survival rate of 95%.
To characterize the regenerative process, the hearts were collected and fixed at different days after cryoinjury. Subsequently, the specimen were embedded for cryosectioning. The slides with sections were processed for histological analysis, in situ hybridization and immunofluorescence. This undertaking enhances our understanding of the factors that are required for the regenerative plasticity in the zebrafish, and provide new insights into the machinery of cardiac regeneration. A conceptual and molecular understanding of heart regeneration in zebrafish will impact both developmental biology and regenerative medicine.

Zebrafish represents a valuable model to study the mechanisms of heart regeneration in vertebrates. Here, we present a protocol for induction of a heart infarct in adult zebrafish using cryoinjury. This method results in massive cell death within 20% of the ventricular wall, similar to that observed in mammalian infarcts.

Indução de Infarto do Miocárdio em Zebrafish adultos usando Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

Medicina

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Ressonância magnética e PET no rato modelos de Infarto do Miocárdio

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

Infarto do Miocárdio e Avaliação de Resultados Funcional em porcos

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Minimal procedimento cirúrgico invasivo de induzir Infarto do Miocárdio em Ratos

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

Avaliação do resultado principal em um modelo suíno de Infarto Agudo do Miocárdio

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

Infarto do miocárdio em ratos neonatais, um modelo de regeneração cardíaca

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

Análise em tempo real de pressão-volume de infarto agudo do miocárdio em ratos

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Digital PCR for Quantifying Circulating MicroRNAs in Acute Myocardial Infarction and Cardiovascular Disease

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released from the cardiovascular cells into the circulation. Circulating miRNAs are highly stable and can be quantified. The quantitative expression of specific miRNAs can be linked to the pathology, and some miRNAs show high tissue and disease specificity. Finding novel biomarkers for cardiovascular diseases is of importance for medical research. Quite recently, digital polymerase chain reaction (dPCR) has been invented. dPCR, combined with fluorescent hydrolysis probes, enables specific direct absolute quantification. dPCR exhibits superior technical qualities, including a low variability, high linearity, and high sensitivity compared to the quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Thus, dPCR is a more accurate and reproducible method for directly quantifying miRNAs, particularly for the use in large multi-center cardiovascular clinical trials. In this publication, we describe how to effectively perform digital PCR in order to assess the absolute copy number in serum samples.

Circulating microRNAs have shown promise as biomarkers for cardiovascular diseases and acute myocardial infarctions. In this study, we describe a protocol for miRNA extraction, reverse transcription, and digital PCR for the absolute quantification of miRNAs in the serum of patients with cardiovascular disease.

PCR digital para quantificar circulando MicroRNAs no infarto agudo do miocárdio e doença Cardiovascular

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

Um modelo Crioferimento para estudar infarto do miocárdio no mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

Método invasivo semi-mínimo para induzir infarto do miocárdio em ratos e a avaliação da função cardíaca por um sistema cardíaco de trabalho isolado

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...