O estudo recebe financiamento do Ministério da Educação (BMBF), através do CSB concessão (01 OE 0801). O Centro de Pesquisa do curso de Berlim (CSB) é uma integrada de investigação e centro de tratamento. Agradecemos ao Felgenhauer Stiftung de apoio financeiro. Agradecemos Richard A. Dargie para correções no texto em Inglês.

1. Preparação da posição Estudo <ol><li> Deixar que o paciente sente-se, com uma distância de 2 metros em frente do ecrã, (203 x 152 cm cobrindo 58,15 graus do ângulo visual no eixo horizontal e 43,61 graus do ângulo visual no eixo vertical, resolução: 1400 x 1050), em um assento de carro fixa base de simulação imitando um assento de carro real. Ajudar o paciente a ajustar a distância do assento ao pedal com os debaixo do punho. Ajuda para ajustar o encosto. </li><li> Instrua o paciente como usar os aparelhos de simulação de carro (freios, vire sinal volante). </li><li> Instrua o paciente na tarefa: Drive como você faria em uma situação de condução real não-simulado. A estrada é de mão única estrada de pista única, com curvas (menor raio de 500 m, o maior raio de 1.200 m) e sem tráfego. Estar atentos para sinais de trânsito e quebra carros emergentes em ambos os lados da estrada. Reagir à noção de eventos potencialmente perigosos, como javali ou bolas que se aproximam daestrada, logo que possível, quer pressionando o freio ou utilizando a curva de sinal ou ambos, o que parece ser apropriada na situação de condução respectiva. Enquanto pressiona o pedal, o veículo acelera a uma velocidade constante de 70 kmh a menos que o travão é utilizada uma. A viagem leva cerca de 10 min. </li><li> Informar o paciente sobre a doença de simulação. No caso de náuseas, mal-estar ou sudorese ocorre, interromper sessão de testes. </li><li> Um test drive com densidade inferior tarefa é realizada para se acostumar com a situação de simulação e para prevenir a doença de simulação, permitindo tempo suficiente para ajustar 2. </li></ol> 2. Calibração do Eye Rastreador <ol><li> Na segunda sessão de testes, após o paciente está adequadamente encaixado e recebeu o tempo suficiente para a prática, colocar o olho-Tracker sobre a cabeça do paciente e adaptar-o puxando as correias flexíveis. O laser câmera cabeça deve estar apontando para o meio da tela. Ajustar a câmera cabeça está focando o aluno. </li><li> Instrua o paciente a olhar para os cinco pontos de acordo com a liderança da seta do mouse para a calibração. </li><li> Inicie a simulação. </li><li> Calibração completa com a adição de calibração horizontal: Paciente imagem sobreposta fixates (de um olho) na tela, à esquerda, em seguida, segue os olhos se movendo pela tela e se fixa-lo novamente no lado direito. </li><li> Testar a calibração perguntando ao paciente se fixar em objetos específicos na tela, e combinando-a com a imagem do olho de sobreposição, o que indica a posição de olhar calculado pelo software. A calibração é bem sucedido, se a imagem olhar e sobreposição de encontrar no mesmo local na tela. Uma variação vertical da acuidade rastreador ocular pode ocorrer durante a viagem. Avaliar a quantidade de desvio através de inspecção visual, no início e no final da unidade, a verificação da necessidade de um novo ensaio. </li><li> Se a calibração foi bem sucedida, desative as imagens de sobreposição. Se não repita o processo de calibração até que seja bem sucedido. </li&gt; <li> Para rápida avaliação do comportamento compensatório de olhar-movimentos por sua vez em imagens do olho de sobreposição. </li></ol> 3. Simulação <ol><li> Proceder com a simulação pedindo ao paciente para começar a dirigir. </li><li> Deixe as rotas de movimentação de pacientes diversos (m cada um 6.500 em áreas rurais e duração de aproximadamente 10 min) com dificuldade tarefa diferente devido ao nível de distração pelo ambiente circundante. Cada paciente leva três rotas. </li><li> Avaliação imediata do comportamento oculomotor: Ligue as imagens do olho de sobreposição e visualizar o comportamento olhar de um paciente durante os testes sessão: O olho-tracker envia continuamente coordenadas da posição olhar real para o software de simulação Silab. Em troca Silab projeta a imagem do olho de sobreposição, que é uma imagem de um olho, na tela exatamente no local onde o paciente olha. Isso pode não só ser usada para provar a qualidade de calibração, mas também para tornar o comportamento olhar imediatamente visível, não só para você, mas umalso ao paciente. </li></ol> 4. Análise <ol><li> Para os dados de uso do software de gravação Silab em uma taxa de amostragem de 100 Hz. Use Software Silab também para registrar a velocidade, tempo de reação (uso de freio por sua vez, sinal). </li><li> Realizar a análise estatística dos parâmetros de cabeça e olho-movimento com Matlab (MathWorks Companhia, Natick, EUA). Use os seguintes critérios: <ol><li> Definir sacadas como seções da trajetória olhar onde a velocidade olhar ultrapassar os 30 ° s / olhar e amplitude é maior do que 1 ° (como movimentos oculares abaixo de 1 ° pertencem a microssacádicos). Sacadas Cluster ocorrendo dentro de 80 ms. Definir seções entre sacadas como fixações. Definir movimentos de cabeça como movimentos superiores a 6 ° / s de 11 e uma amplitude de mais de 3 graus. Excluir cabeça e simultânea movimentos oculares com o diretório na direção oposta, pois representam nenhum ganho na amplitude olhar. </li><li> Definir fixações de objeto como a fixação em um objeto com a posição de olhar máxima 1, 24 &amp; dpor exemplo, para além do objecto sobre o eixo x e 1, 66 ° sobre o eixo y. Os objetos não são acionados de acordo com os pacientes contemplam posição, mas considero excentricidade de objeto para olhar posição calculando-lo quando o objeto aparece 3. </li><li> Calcular a duração média das fixações dos participantes (média de duração de fixação) e da propagação de pesquisa nos meridianos horizontais e verticais (a variação dos locais de fixação). </li></ol></li><li> Tempos de reacção de medida de duas formas: Em primeiro modo (a primeira detecção) tempo de reacção, como medida por uma primeira detecção de fixação ou de detecção manual: Se o paciente se fixa o primeiro objecto e responde manualmente depois (na maioria dos casos), e depois escolher a tempo de fixação, como o tempo de reacção, como a primeira detecção. Se o paciente usa o sinal de volta ou o pedal de freio primeiro como um indicador sem primeiro fixar o objeto, em seguida, escolheu o tempo de reação manual como a primeira detecção. Como um segundo modo (reação manual), medir reagirtempo de íons pela reação manual (sinal de freio ou volta) apenas. </li></ol> 5. Resultados representativos Foram recrutados seis pacientes de diferentes idades (35-71 anos de idade) com hemianopsia incompleto após infarto isquêmico PCA (4 na direita e duas no hemisfério esquerdo) e 85 controles saudáveis ​​de várias idades (20-75 anos de idade, igualmente distribuído) determinar as alterações relacionadas com a idade no olho e no desempenho de cabeça, bem como os movimentos de condução, como um grupo de referência. Eles não relataram déficits cognitivos, déficits neurológicos ou psiquiátricos ou doenças e acuidade visual foi maior que 0,5. A história médica foi tomada e experiências com mídia virtual explorado. O estudo foi realizado em conformidade com a Declaração de Helsinki e foi aprovado pelo comitê de ética local. O consentimento informado foi obtido de todos os participantes. Todos os indivíduos não tinham conhecimento da finalidade dos experimentos. Aqui, nós demonstramos reos resultados dos testes presentative de dois pacientes testados 7-9 meses após acidente vascular cerebral incidente com hemianopsia incompleta (Figura 1), no lado direito, com e sem comportamento compensatório, bem como um indivíduo saudável, como controle. O controle saudável foi escolhido devido à idade semelhante, de condução e experiência de jogo de computador. A paciente exibiu movimento sacádico compensatório para o lado onde o defeito visual está localizado resultando em desempenho de condução normal em comparação com a simulação de um controlo saudável de detecção com sucesso de reacção e aos riscos possíveis numa situação de condução rural. No entanto, o paciente B não mostraram movimento sacádico compensatória e revelou o mau desempenho na condução simulação com perdendo objetos periféricos no campo cego causando tempos de reação prolongados ou colisões. No entanto, ao longo das unidades, B paciente adotado comportamento compensatório causando menos colisões, sem ser instruído a fazê-lo. O testefoi realizada cabeça sem restrições, permitindo-condições reais e para detectar a possível influência de movimentos da cabeça de comportamento compensatório. Os pacientes foram convidados a dirigir o curso como fariam em uma situação real de direção não-simulado. Comparado com o sujeito paciente saudável Uma. Realizada sacadas 1,7 vezes mais, o que predominantemente cobertas ao lado da tela onde o defeito visual foi localizado (63%) As amplitudes das sacadas em paciente A e do controlo foram semelhantes (amplitude média: 5,5 graus no indivíduo saudável versus 5,3 grau em que o paciente). A duração de fixação de paciente A foi mais curto em comparação com o controlo saudável (duração média de fixação de 381 ms no paciente A versus 483 ms no controlo). Em contraste paciente B e o controlo explorado igualmente frequentes ambos os lados da tela. Figura 2 ilustra a distribuição das fixações no ecrã durante a primeira unidade de patient A, o indivíduo saudável e doente B. Paciente B 3,4 realizada movimentos sacádicos menos em relação ao paciente uma cobrindo metade da dimensão da amplitude do paciente A (amplitude média: 5.5 Um paciente versus 2,9 grau em paciente B). Paciente B mostrou mais fixação durações comparação com o controlo saudável e um paciente. (Duração média de fixação 1049 ms) A paciente B e paciente realizou quase nenhuma cabeça-movimentos (1 a 2), enquanto o controle saudável executado alguns (5 a 10) cabeça-movimentos por condução sessão contribuindo para olhar amplitude. A Figura 3 demonstra a influência da excentricidade da posição do objecto em relação ao contemplar posição sobre o tempo de reacção, demonstradas separadamente para o lado esquerdo e direito do campo visual. A figura ilustra o aumento do tempo de reacção, devido à excentricidade nas duas matérias ilustradas separadamente para ambos os lados do campo visual. Algumas vezes a reacção ecc muito pequeno<html> entricities são menos do que 50 ms. Estes não são tempos de reação realistas, mas sim devido à verificação de possíveis locais de risco ao longo da estrada, ou objetos que aparecem no ponto de fixação do paciente. Nós não filtrar esses eventos, porque isso também representa um comportamento de condução certo interesse: reconhecer e ceder a potenciais locais perigosos. (O gráfico também mostra que houve momentos menos reação conhecidos por paciente B, devido a objectos perdidos em seu campo cego.) Em Um paciente eo controle saudável todos os objetos foram detectados e sem colisões ocorreu. Em paciente B, porém, os tempos de reação diferiu claramente entre o bem (cego) e de campo (visão) para a esquerda: objetos paciente B detectados ocorrem no campo cego 1,6 vezes mais lento em comparação com o campo de visão e colidiu 4 vezes com objetos que ocorrem no campo cego ( mediana tempos de reação: campo (cego) direita: 4411,66 ms versus esquerda campo (vidente): 2,810 ms). &quot;&gt; Assim, o paciente A Evidência compensado sua perda de visão excêntrica direito bem por um aumento do número de movimentos sacádicos atingindo o lado do defeito no campo visual. Ainda não está claro que se esta estratégia compensatória torna-se insuficiente com maior carga de trabalho. Para isso é sugerido no gráfico para o campo visual esquerdo: Enquanto o paciente conseguiu reagir igualmente rápido no lado direito devido a lateralização dos movimentos sacádicos, ele mostrou maior tempo de reação em excentricidades maiores no lado esquerdo, sugerindo um possível custo da estratégia em relação para o desempenho. No entanto, o controlo saudável também mostra ligeiras diferenças de tempo de reacção comparando ambos os lados, o que pode também ser devido ao facto de que o controlo saudável realizada uma unidade de menos do que os pacientes. Para testar se este é um efeito estável, de mais testes seria necessário. Em contraste com o paciente A e paciente B apresentou um resultado representativo de um paciente carente COMPENSAtory comportamento e seu efeito no desempenho da condução: a falta de movimentos sacádicos compensatórias no campo cego resultou na colisão com objetos que aparecem no campo cego e tempos de reação prolongados. No entanto, ao longo das unidades, o paciente espontaneamente começou a realizar sacadas mais no campo visual direito com maior amplitude, resultando em menor incidência de colisões. <img alt="Figura 1A" src="/files/ftp_upload/4427/4427fig1A.jpg" /> Figura 1A do Paciente. A automatizada, 30 ° perimetria limiar. <img alt="A Figura 1B" src="/files/ftp_upload/4427/4427fig1B.jpg" /> Figura 1B. Paciente B, 30 ° perimetria automatizada limiar. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/4427/4427fig2.jpg" /> Figura 2. </Distribuição strong&gt; de fixações na tela para o paciente A, B controle do paciente e saudável. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/4427/4427fig3.jpg" /> Figura 3. Tempos de resposta para os objetos que aparecem em várias excentricidades no campo visual, para o paciente A, B controle do paciente e saudável. 1 tempomat Isso foi implementado para assegurar a comparabilidade dos tempos de reação entre os grupos etários, como é conhecido que os motoristas mais velhos reduzir a velocidade como um possível mecanismo compensatório 7. 2 doença Simulação é descrito como sudorese, náuseas ou vertigens, persistindo durante uma sessão de condução. Existem dados diferentes sobre a frequência de ocorrência que variam entre 9% e 37%, dependendo da idade, uma vez que ocorre mais provavelmente no idoso 8, 9, 10. Preparação completa com a prática leva tempo suficiente para que cada indivíduo para adjus adequadastamento reduzir a chance de enfermidades simulação. 3 por unidade há 4 javali e 4 bolas programados para se aproximar de cada lado da estrada, duas excentricidades diferentes, em partes rectas do curso e em diferentes intervalos de curso para evitar que o hábito de teste. Aparência dos objetos é acionado pelos pontos de passagem sujeitas fluxo na estrada.

<ol>
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W., van Wolffelaar, P., Kooijman, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effect+of+Visual+Field+Defects+on+Driving+Performance.">The Effect of Visual Field Defects on Driving Performance.</a> Archives of Ophthalmology. 120, 1509-1516 (2002).</li></ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

O novo método permite que estabelecido o exame do comportamento exploratório visual de pacientes com defeitos do campo visual causadas por um acidente vascular cerebral. O projeto de teste também oferece uma abordagem imediata para avaliar o comportamento de olhar compensatória: Ao ligar as imagens do olho de sobreposição o examinador pode visualizar o comportamento olhar de um paciente durante sessão de testes. Assim, ela permite uma avaliação muito rápida e imediata sobre se o paciente tenha adoptado um comportamento compensatório olhar. Ele também permite que os pacientes a tomar consciência de que, visualizando os movimentos olhar por uma imagem do olho de sobreposição se movendo pela tela como um olhar indicando ferramenta de feedback. O papel de cabeça-movimentos de comportamento compensatório olhar ainda é incerto. No nosso grupo de controle de cabeça-movimentos foram mais comuns entre os idosos. O controle realizado mais saudável cabeça-movimentos do que os pacientes. Cabeça-movimentos podem desempenhar um papel maior quando o campo de visão é maior do que testado em nosso set-up. Daí que não poderia Identify cabeça-movimentos como parte do comportamento compensatório olhar em nosso paciente. No entanto mais pacientes precisam ser examinados para esclarecer o papel de cabeça-movimentos no comportamento compensatório. As limitações do estudo são os seguintes: novo teste torna-se necessário, em alguns indivíduos, devido à deriva vertical do rastreador olho em todo o disco. Os objetos aparecem naturalmente ao longo da estrada e não em uma excentricidade fixa desencadeada pela posição olhar. Posição, no entanto, olhar atual em relação ao objeto é considerada ao interpretar os tempos de reação. Pacientes com defeitos de campo visual foram testados antes em reais e simulados configurações de condução:.. Bowers et al 12 e Cockelbergh et al 13 realizaram estudos em um simulador de condução e demonstraram pior desempenho de condução em pacientes em comparação com controles saudáveis. No entanto, eles não registraram olhos e cabeça-movimentos e diferenças individuais poderiam not estar relacionado com o comportamento exploratório visual. Wood et al. 6 testado em uma situação da vida real e estabeleceu uma avaliação do desempenho da condução de pacientes com defeitos de campo visual. Cabeça e movimentos oculares foram analisados ​​através de vídeo e pós-teste de pontuação por dois pesquisadores independentes, assim, lidar com a confiabilidade entre avaliadores. No entanto, eles não fornecem uma análise quantitativa de durações de fixação, sacadas, e movimentos de cabeça e de avaliação dependiam um especialista certificado de condução de reabilitação. A vantagem do nosso set-up com a condução simulada é a avaliação fácil e rápido dentro de um contexto clínico, a gravação de bem definido parâmetro de olhos e cabeça-movimentos, bem como tempos de reação. É possível controlar o nível de distracção e expor cada condutor a uma situação semelhante com a condução rotas normalizadas e condições que permitem a comparabilidade. Roth 2 mostrou que SCT melhora o comportamento de pesquisa sobre a visão cega em searc naturaistarefas h. Ajustando o nível de distracção nos cursos de condução, será possível provar se, e em que grau, o comportamento compensatório falha com maior carga de trabalho. Comparando simulado para estudos de condução real, parece apropriado para ensinar comportamento compensatório em um ambiente simulado e expor o paciente a uma situação de condução real como uma segunda etapa. Especialmente desde que o último permite avaliar a segurança da condução. No futuro, a intenção de incluir a caracterização de diferentes níveis de comportamento compensatório analisando sacadas, amplitudes e distribuição. Isso pode ajudar a oferecer reabilitação mais planos individuais ajustados para o nível atual do paciente de comportamento compensatório. Em segundo lugar, como paciente B revela a adoção espontânea de uma estratégia compensatória, nós gostamos de testar o design como uma ferramenta possível para fins de reabilitação: Condução de simulação e não apenas como um projeto de teste de diagnóstico, mas também para formação específica, instruindo ªpaciente e para executar o comportamento saccade compensatório. Combinado com visualização imediata do comportamento olhar pelo olhar imagens de sobreposição indicando olho isso pode fornecer um mecanismo de feedback para surgir a atenção para uma estratégia compensatória.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome </td><td> Companhia </td><td> Catalogo </td><td> Comentário </td></tr><tr><td> Simulador de condução Software Silab </td><td> Wuerzburg Instituto de Ciências Tráfego GmbH (WIVW) </td><td></td><td> <a href="http://www.wivw.de/index.php.en" target="_blank">http://www.wivw.de/index.php.en</a> </td></tr><tr><td> EyeSeeCam </td><td> Universidade de Munique Hospital Neurociências Clínicas </td><td></td><td> <a href="http://eyeseecam.com" target="_blank">http://eyeseecam.com</a> </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Estimativa dos custos e de tempo para a criação 20.000 euros, três meses. </td></tr></tbody></table>

driving simulation in the clinic: testing visual exploratory behavior in daily life activities in patients with visual field defects

Pacientes que sofrem de hemianopsia homônima após o infarto da artéria cerebral posterior (ACP) relatam diferentes graus de restrição na vida diária, apesar de semelhantes déficits visuais. Assumimos isto pode ser devido ao desenvolvimento de estratégias de compensação variável, tais como comportamento de verificação alteradas visual. Digitalização compensatória terapia (SCT) é estudada como parte do treinamento visual após infarto do lado de visão a terapia de restauração. SCT consiste em aprender a fazer movimentos maiores olho no campo cego ampliar o campo visual da pesquisa, que foi provado ser a estratégia mais útil 1, não só nas tarefas de busca naturais, mas também nas atividades de vida diária de masterização 2. No entanto, na rotina clínica, é difícil identificar os níveis individuais e efeitos de treinamento de comportamento compensatório, uma vez que requer a medição dos movimentos dos olhos em uma condição irrestrita cabeça. Estudos demonstraram que a desenfreada cabeça alt movimentoser o comportamento visual exploratória em relação a uma condição de laboratório cabeça com restrição 3. Martin et al. 4 e Hayhoe et al. 5 mostraram que o comportamento demonstrado em um ambiente de laboratório não podem ser facilmente atribuídas a uma condição natural. Assim, nosso objetivo foi desenvolver um estudo de set-up que revela diferentes estratégias compensatórias oculomotores rapidamente em uma situação de teste realista: os pacientes são testados no ambiente clínico em um simulador de condução. Silab software (Wuerzburg Instituto de Ciências Tráfego GmbH (WIVW)) foi usado para programar a condução cenários de complexidade variável e registrar a performance do motorista. O software foi combinada com uma cabeça montado rastreador aluno infravermelho de vídeo, gravação de cabeça e movimentos oculares (EyeSeeCam, Universidade de Munique Hospital, Neurociências Clínicas). O posicionamento do paciente no simulador de condução e o posicionamento, ajuste e calibração da câmara é demtrada. Performances típicas de um paciente com e sem compensação e uma estratégia de controlo saudável estão ilustrados neste estudo piloto. Comportamentos diferentes oculomotores (frequência e amplitude de olho e cabeça-movimentos) são avaliados muito rapidamente durante a própria unidade de imagens dinâmicas de sobreposição indicando onde o olhar assuntos está localizado na tela, e analisando os dados. Comportamento compensatório olhar em um paciente leva a um desempenho de condução comparável a um controlo saudável, enquanto que o desempenho de um paciente sem comportamento compensatório é consideravelmente pior. Os dados de olhos e cabeça-movimento, comportamento, bem como a condução de desempenho são discutidos com relação às estratégias de oculomotores diferentes e em um contexto mais amplo em relação a possíveis efeitos do treinamento durante toda a sessão de testes e as implicações sobre o potencial de reabilitação.

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Driving Simulation in the Clinic: Testing Visual Exploratory Behavior in Daily Life Activities in Patients with Visual Field Defects

Pacientes com déficits visuais após relatório curso sobre diferentes restrições na vida diária mais prováveis ​​devido a variáveis ​​estratégias compensatórias, que são difíceis de se diferenciar em rotina clínica. Nós apresentamos uma clínica de set-up que permite a medição da cabeça e compensatória diferente de movimento dos olhos-estratégias e avaliar seus efeitos sobre a condução.

Condução Simulação na Clínica: Teste o comportamento exploratório Visual em Atividades da Vida Diária em pacientes com defeitos Campo Visual

Patients suffering from homonymous hemianopia after infarction of the posterior cerebral artery (PCA) report different degrees of constraint in daily ...

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Research

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17.2K visualizações.  Universitätsmedizin Charité. Pacientes com déficits visuais após relatório curso sobre diferentes restrições na vida diária mais prováveis ​​devido a variáveis ​​estratégias compensatórias, que são difíceis de se diferenciar em rotina clínica. Nós apresentamos uma clínica de set-up que permite a medição da cabeça e compensatória diferente de movimento dos olhos-estratégias e avaliar seus efeitos sobre a condução.

Vídeo: Driving Simulation in the Clinic: Testing Visual Exploratory Behavior in Daily Life Activities in Patients with Visual Field Defects

Sequencing of Bacterial Microflora in Peripheral Blood: our Experience with HIV-infected Patients

The healthy gastrointestinal tract is physiologically colonized by a large variety of commensal microbes that influence the development 
	of the humoral and cellular mucosal immune system1,2. 
 Microbiota is shielded from the immune system via a strong mucosal barrier. Infections and antibiotics are known to alter both the normal 
	gastrointestinal tract barrier and the composition of resident bacteria, which may result in possible immune abnormalities3.
HIV causes a breach in the gastrointestinal barrier with progressive failure of mucosal immunity and leakage into the systemic circulation of bacterial bioproducts, such as lipopolysaccharide and 
	bacterial DNA fragments, which contribute to systemic immune activation4-7. Microbial translocation is implicated in HIV/AIDS immunopathogenesis and response to therapy 4,8.
We aimed to characterise the composition of bacteria translocating in peripheral blood of HIV-infected patients. To pursue our aim we set up a PCR reaction for the panbacteric 16S ribosomial gene 
	followed by a sequencing analysis.
Briefly, whole blood from both HIV-infected and healthy subjects is used. Given that healthy individuals present normal intestinal homeostasis no translocation of microflora is expected in 
	these patients. Following whole blood collection by venipuncture and plasma separation, DNA is extracted from plasma and used to perform a broad range PCR reaction for the panbacteric 
	16S ribosomial gene9. Following PCR product purification, cloning and sequencing analyses are performed.

Our experiment will show how to perform a sequencing analysis of bacterial species translocating in peripheral blood of HIV positive patients.

Seqüenciamento da microflora bacteriana no sangue periférico: a nossa experiência com pacientes infectados pelo HIV

The healthy gastrointestinal tract is physiologically colonized by a large variety of commensal microbes that influence the development 
	of the humoral ...

Medicina

Development of an Audio-based Virtual Gaming Environment to Assist with Navigation Skills in the Blind

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind. Using only audio based cues and set within the context of a video game metaphor, users gather relevant spatial information regarding a building's layout. This allows the user to develop an accurate spatial cognitive map of a large-scale three-dimensional space that can be manipulated for the purposes of a real indoor navigation task. After game play, participants are then assessed on their ability to navigate within the target physical building represented in the game. Preliminary results suggest that early blind users were able to acquire relevant information regarding the spatial layout of a previously unfamiliar building as indexed by their performance on a series of navigation tasks. These tasks included path finding through the virtual and physical building, as well as a series of drop off tasks. We find that the immersive and highly interactive nature of the AbES software appears to greatly engage the blind user to actively explore the virtual environment. Applications of this approach may extend to larger populations of visually impaired individuals.

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind.

Desenvolvimento de um ambiente de jogo de áudio baseada Virtual para ajudar com habilidades de navegação em Cegos

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind. Using only audio ...

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model of ocular hypertension to mimic human high-tension glaucoma. Here laser illumination is applied to the corneal limbus to photocoagulate the aqueous outflow, inducing angle closure. The changes of IOP are monitored using a rebound tonometer before and after the laser treatment. An optomotor behavioral test is used to measure corresponding changes in visual capacity. The representative result from one mouse which developed sustained IOP elevation after laser illumination is shown. A decreased visual acuity and contrast sensitivity is observed in this ocular hypertensive mouse. Together, our study introduces a valuable model system to investigate neuronal degeneration and the underlying molecular mechanisms in glaucomatous mice.

Chronic ocular hypertension is induced using laser photocoagulation of the trabecular meshwork in mouse eyes. The intraocular pressure (IOP) is elevated for several months after laser treatment. The decrease of visual acuity and contrast sensitivity of experimental animals are monitored using the optomotor test.

Um modelo de rato induzida por laser de crônica Ocular Hypertension para Caracterizar defeitos visuais

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography

Indocyanine Green&#160;Angiography (or ICGA) is a technique performed by ophthalmologists to diagnose abnormalities of the choroidal and retinal vasculature of various eye diseases such as age-related macular degeneration (AMD). ICGA is especially useful to image the posterior choroidal vasculature of the eye due to its capability of penetrating through the pigmented layer with its infrared spectrum. ICGA time course can be divided into early, middle, and late phases. The three phases provide valuable information on the pathology of eye problems. Although time-course ICGA by intravenous (IV) injection is widely used in the clinic for the diagnosis and management of choroid problems, ICGA by intraperitoneal injection (IP) is commonly used in animal research. Here we demonstrated the technique to obtain high-resolution ICGA time-course images in mice by tail-vein injection and confocal scanning laser ophthalmoscopy. We used this technique to image the choroidal lesions in a mouse model of age-related macular degeneration. Although it is much easier to introduce ICG to the mouse vasculature by IP, our data indicate that it is difficult to obtain reproducible ICGA time course images by IP-ICGA. In contrast, ICGA via tail vein injection provides high quality ICGA time-course images comparable to human studies. In addition, we showed that ICGA performed on albino mice gives clearer pictures of choroidal vessels than that performed on pigmented mice. We suggest that time-course IV-ICGA should become a standard practice in AMD research based on animal models.

Indocyanine Green Angiography (or ICGA) performed by tail vein injection provides high quality ICGA time course images to characterize abnormalities in mouse choroid.

Detectar alterações no coróide Vasculature em um modelo do rato de Degeneração Macular relacionada com a Idade de-curso Tempo Indocianina Verde Angiografia

Indocyanine Green&#160;Angiography (or ICGA) is a technique performed by ophthalmologists to diagnose abnormalities of the choroidal and retinal ...

Dynamic Visual Tests to Identify and Quantify Visual Damage and Repair Following Demyelination in Optic Neuritis Patients

In order to follow optic neuritis patients and evaluate the effectiveness of their treatment, a handy, accurate and quantifiable tool is required to assess changes in myelination at the central nervous system (CNS). However, standard measurements, including routine visual tests and MRI scans, are not sensitive enough for this purpose. We present two visual tests addressing dynamic monocular and binocular functions which may closely associate with the extent of myelination along visual pathways. These include Object From Motion (OFM) extraction and Time-constrained stereo protocols. In the OFM test, an array of dots compose an object, by moving the dots within the image rightward while moving the dots outside the image leftward or vice versa. The dot pattern generates a camouflaged object that cannot be detected when the dots are stationary or moving as a whole. Importantly, object recognition is critically dependent on motion perception. In the Time-constrained Stereo protocol, spatially disparate images are presented for a limited length of time, challenging binocular 3-dimensional integration in time. Both tests are appropriate for clinical usage and provide a simple, yet powerful, way to identify and quantify processes of demyelination and remyelination along visual pathways. These protocols may be efficient to diagnose and follow optic neuritis and multiple sclerosis patients.
In the diagnostic process, these protocols may reveal visual deficits that cannot be identified via current standard visual measurements. Moreover, these protocols sensitively identify the basis of the currently unexplained continued visual complaints of patients following recovery of visual acuity. In the longitudinal follow up course, the protocols can be used as a sensitive marker of demyelinating and remyelinating processes along time. These protocols may therefore be used to evaluate the efficacy of current and evolving therapeutic strategies, targeting myelination of the CNS.

Object From Motion (OFM) and Time-constrained stereo protocols are sensitive tools to identify monocular and binocular dynamic visual function deficits, which are uniquely affected in optic neuritis patients. Furthermore, these tests may be used as quantitative noninvasive tools to assess the extent of myelination along visual pathways.

Testes dinâmicos visuais para identificar e quantificar danos Visual e Reparação Após desmielinização na neurite óptica Pacientes

In order to follow optic neuritis patients and evaluate the effectiveness of their treatment, a handy, accurate and quantifiable tool is required to ...

In Vivo Dynamics of Retinal Microglial Activation During Neurodegeneration: Confocal Ophthalmoscopic Imaging and Cell Morphometry in Mouse Glaucoma

Microglia, which are CNS-resident neuroimmune cells, transform their morphology and size in response to CNS damage, switching to an activated state with distinct functions and gene expression profiles. The roles of microglial activation in health, injury and disease remain incompletely understood due to their dynamic and complex regulation in response to changes in their microenvironment. Thus, it is critical to non-invasively monitor and analyze changes in microglial activation over time in the intact organism. In vivo studies of microglial activation have been delayed by technical limitations to tracking microglial behavior without altering the CNS environment. This has been particularly challenging during chronic neurodegeneration, where long-term changes must be tracked. The retina, a CNS organ amenable to non-invasive live imaging, offers a powerful system to visualize and characterize the dynamics of microglia activation during chronic disorders.
This protocol outlines methods for long-term, in vivo imaging of retinal microglia, using confocal ophthalmoscopy (cSLO) and CX3CR1GFP/+ reporter mice, to visualize microglia with cellular resolution. Also, we describe methods to quantify monthly changes in cell activation and density in large cell subsets (200-300 cells per retina). We confirm the use of somal area as a useful metric for live tracking of microglial activation in the retina by applying automated threshold-based morphometric analysis of in vivo images. We use these live image acquisition and analyses strategies to monitor the dynamic changes in microglial activation and microgliosis during early stages of retinal neurodegeneration in a mouse model of chronic glaucoma. This approach should be useful to investigate the contributions of microglia to neuronal and axonal decline in chronic CNS disorders that affect the retina and optic nerve.

In Vivo Dynamics of Retinal Microglial Activation During Neurodegeneration: Confocal Ophthalmoscopic Imaging and Cell Morphometry in Mouse Glaucoma

Microglia activation and microgliosis are key responses to chronic neurodegeneration. Here, we present methods for in vivo, long-term visualization of retinal CX3CR1-GFP+ microglial cells by confocal ophthalmoscopy, and for threshold and morphometric analyses to identify and quantify their activation. We monitor microglial changes during early stages of age-related glaucoma.

In Vivo Dinâmica da Retinal microglia Ativação Durante Neurodegeneration: confocal oftalmoscópico Imagem e morfometria celular no mouse Glaucoma

Microglia, which are CNS-resident neuroimmune cells, transform their morphology and size in response to CNS damage, switching to an activated state with ...

A Simple Mechanical Procedure to Create Limbal Stem Cell Deficiency in Mouse

Limbal stem cell deficiency (LSCD) is a state of malfunction or loss of limbal epithelial stem cells, after which the corneal epithelium is replaced with conjunctiva. Patients suffer from recurrent corneal defects, pain, inflammation, and loss of vision.
Previously, a murine model of LSCD was described and compared to two other models. The goal was to produce a consistent mouse model of LSCD that both mimics the phenotype in humans and lasts long enough to make it possible to study the disease pathophysiology and to evaluate new treatments. Here, the technique is described in more detail.
A motorized tool with a rotating burr has been designed to remove the rust rings from the corneal surface or to smooth the pterygium bed in patients. It is a suitable device to create the desired LSCD model. It is a readily available, easy-to-use tool with a fine tip that makes it appropriate for working on small eyes, as in mice. Its application prevents unnecessary trauma to the eye and it does not result in unwanted injuries, as often is the case with chemical injury models. As opposed to a blunt scraper, it removes the epithelium with the basement membrane. In this protocol, the limbal area was abraded two times, and then the whole corneal epithelium was shaved from limbus to limbus. To avoid stroma injury, care was taken not to brush the corneal surface once the epithelium was already removed.

The following article provides an easy, reproducible technique to effectively create a sustainable mouse model of limbal stem cell deficiency (LSCD). This animal model is useful in testing and comparing the efficacy of treatments for limbal stem cell diseases.

Um procedimento mecânico simples de criar Limbal Deficiência Stem Cell no mouse

Limbal stem cell deficiency (LSCD) is a state of malfunction or loss of limbal epithelial stem cells, after which the corneal epithelium is replaced with ...

A Method for Quantifying Upper Limb Performance in Daily Life Using Accelerometers

A key reason for referral to rehabilitation services after stroke and other neurological conditions is to improve one's ability to function in daily life. It has become important to measure a person's activities in daily life, and not just measure their capacity for activity in the structured environment of a clinic or laboratory. A wearable sensor that is now enabling measurement of daily movement is the accelerometer. Accelerometers are commercially-available devices resembling large wrist watches that can be worn throughout the day. Data from accelerometers can quantify how the limbs are engaged to perform activities in peoples' homes and communities. This report describes a methodology to collect accelerometry data and turn it into clinically-relevant information. First, data are collected by having the participant wear two accelerometers (one on each wrist) for 24 h or longer. The accelerometry data are then downloaded and processed to produce four different variables that describe key aspects of upper limb activity in daily life: hours of use, use ratio, magnitude ratio, and the bilateral magnitude. Density plots can be constructed that visually represent the data from the 24 h wearing period. The variables and their resultant density plots are highly consistent in neurologically-intact, community-dwelling adults. This striking consistency makes them a useful tool for determining if upper limb daily performance is different from normal. This methodology is appropriate for research studies investigating upper limb dysfunction and interventions designed to improve upper limb performance in daily life in people with stroke and other patient populations. Because of its relative simplicity, it may not be long before it is also incorporated in clinical neurorehabilitation practice.

This protocol describes a method to quantify upper limb performance in daily life using wrist-worn accelerometers.

Um método para quantificar Desempenho Membro Superior na Vida Diária utilizem acelerómetros

A key reason for referral to rehabilitation services after stroke and other neurological conditions is to improve one's ability to function in daily life. ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to injury. In fact, the most common type of eye injury found in clinic is a corneal abrasion. Here, we utilize an ocular burr to induce an abrasion resulting in removal of the corneal epithelium in vivo on anesthetized mice. This method allows for targeted and reproducible epithelial disruption, leaving other areas intact. In addition, we describe the visualization of the abraded epithelium with fluorescein staining and provide concrete advice on how to visualize the abraded cornea. Then, we follow the timeline of wound healing 0, 18, and 72 h after abrasion, until the wound is re-epithelialized. The epithelial abrasion model of corneal injury is ideal for studies on epithelial cell proliferation, migration and re-epithelialization of the corneal layers. However, this method is not optimal to study stromal activation during wound healing, because the ocular burr does not penetrate to the stromal cell layers. This method is also suitable for clinical applications, for example, pre-clinical test of drug effectiveness.

This protocol describes a method to inflict an abrasion to the ocular surface of the mouse, and to follow the wound healing process thereafter. The protocol takes advantage of an ocular burr to partially remove the surface epithelium of the eye in anaesthetized mice.

Cicatrização de feridas abrasão epitelial da córnea com Burr Ocular como um modelo para córnea

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

Integration of Brain Tissue Saturation Monitoring in Cardiopulmonary Exercise Testing in Patients with Heart Failure

Cerebral hypo-oxygenation during rest or exercise negatively impacts the exercise capacity of patients with heart failure with reduced ejection fraction (HF). However, in clinical cardiopulmonary exercise testing (CPET), cerebral hemodynamics is not assessed. NIRS is used to measure cerebral tissue oxygen saturation (SctO2) in the frontal lobe. This method is reliable and valid and has been utilized in several studies. SctO2 is lower during both rest and peak exercise in patients with HF than in healthy controls (66.3 &#177; 13.3% and 63.4 &#177; 13.8% vs. 73.1 &#177; 2.8% and 72 &#177; 3.2%). SctO2 at rest is significantly linearly correlated with peak VO2 (r = 0.602), oxygen uptake efficiency slope (r = 0.501), and brain natriuretic peptide (r = -0.492), all of which are recognized prognostic and disease severity markers, indicating its potential prognostic value. SctO2 is determined mainly by end-tidal CO2 pressure, mean arterial pressure, and hemoglobin in the HF population. This article demonstrates a protocol that integrates SctO2 using NIRS into incremental CPET on a calibrated bicycle ergometer.

This protocol integrated near-infrared spectroscopy into conventional cardiopulmonary exercise testing to identify the involvement of the cerebral hemodynamic response in exercise intolerance in patients with heart failure.

Integração do monitoramento da saturação do tecido cerebral no teste de exercício cardiopulmonar em pacientes com insuficiência cardíaca

Cerebral hypo-oxygenation during rest or exercise negatively impacts the exercise capacity of patients with heart failure with reduced ejection fraction ...