Esse método é muito importante para responder a perguntas-chave nas áreas de Oncologia, Neuro-Biologia, Cardiologia e Desenvolvimento Fetal, e, claro, também é importante na área de pesquisa reprodutiva. As principais vantagens dessa técnica são que ela é não invasiva, indolor, fácil, rápida e permite o acompanhamento de fetos em pontos de tempo gestacionais relevantes ao longo da gravidez. Pelo menos meia hora antes do procedimento de imagem, ligue o sistema de ultrassom, a plataforma aquecida e o aquecedor de gel.
Abra um novo estudo ou nova série em um estudo existente no navegador. Digite todas as informações necessárias na janela de informações do estudo. Clique em OK e confirme se a janela de imagem do modo B é exibida.
Quando o ultrassom estiver pronto, confirme a falta de resposta ao aperto do dedo do dedo em um rato anestesiado e aplique pomada nos olhos do animal. Coloque uma gota de eletro gel em cada uma das 4 seções de cobre da plataforma aquecida, e fixe as patas nas seções revestidas de eletro gel da plataforma. Retire o cabelo do abdômen do animal com creme depilatório e um cotonete, lavando o creme da pele depilada após um minuto com uma compressa encharcada de água.
Em seguida, aplique gel de ultrassom pré-aquecido na área exposta. Uma das razões para a baixa intensidade do sinal pode ser a baixa quantidade de gel colocada entre o mouse e o feixe de ultrassom. Em nossa experiência, uma quantidade bastante grande de gel é necessária para uma boa qualidade de sinal.
Quando o animal estiver pronto, coloque o transdutor sobre a bexiga para uso como ponto de referência, e mova a mesa da plataforma de aquecimento para os lados esquerdo e direito do abdômen para traçar as implantações fetais no modo B 2D, ajustando o transdutor ou plataforma conforme necessário até que a primeira implantação seja visível na tela, em seu maior tamanho. Selecione Rótulo de imagem e digite um nome para o arquivo de imagem. Ajuste a posição da imagem, até que o fluxo sanguíneo dentro da arteria umbilicalis da placenta esteja à vista, e armazene um único quadro ou cineloop para medições placentárias.
Para colorir a imagem do Doppler para determinar a direção do fluxo sanguíneo, pressione o botão Color e use a trackball para mover a caixa de cores para a posição apropriada, clique em Atualizar para ajustar o tamanho da caixa conforme necessário. Quando a caixa estiver do tamanho correto, clique em Selecionar e armazenar a imagem como experimentalmente apropriada. Para quantificação doppler de onda pulsada do fluxo sanguíneo através dos vasos, localize a região de interesse no modo de aquisição do Doppler colorido e clique em Pulse Wave.
Uma linha tracejada aparecerá. Mova a linha para o vaso sanguíneo de interesse e use o botão de ângulo Doppler para ajustar o ângulo da linha para se alinhar com o fluxo sanguíneo. Para medições de doppler de onda pulsada, é importante observar o ângulo entre a direção do fluxo sanguíneo e o feixe de ultrassom.
Ângulos muito altos, ou ângulos diferentes entre animais no mesmo experimento podem levar a medições de velocidade imprecisas. Em seguida, clique em Atualizar e armazenar cineloop das linhas Doppler que aparecem na janela de aquisição do Doppler de onda pulsada. Para revisar os dados, clique em Gerenciamento de Estudos, role até a imagem de interesse da miniatura e clique duas vezes em Atualizar, em seguida, clique em Gerenciamento de Estudo novamente e clique em Fechar a janela do navegador, para concluir a aquisição de dados e salvar uma série gravada.
Para exportar os dados, conecte um disco rígido, clique em Exportar para marcar uma ou mais séries de dados e selecione o espaço de armazenamento para copiar os dados no disco rígido. Aqui, são mostradas imagens representativas de ultrassom adquiridas no modo B nos dias gestacionais 5, 8, 10 e 12, e seus resultados correspondentes de medição da área de implantação, revelando uma redução significativa na área de implantação em camundongos deficientes de mastro tratados anti-CD122 a partir do dia 10 gestacional. A imagem no modo B facilita a imagem e a medição de partes individuais de uma implantação.
Por exemplo, animais deficientes de mastro tratados anti-CD122 demonstram uma redução significativa na área placentária, espessura e diâmetro em comparação com camundongos não tratados nos dias gestacionais 10 e 12. Em contraste, a área placentária e o diâmetro são semelhantes entre os grupos no dia gestacional 14, e a espessura placentária, um aumento significativo nos animais transgênicos tratados anti-CD122 em comparação com camundongos não tratados no dia 14 gestacional. Onda pulsada Doppler imagem da arteria uterina para medição do pico de velocidade sistólica e velocidade diastólica, e índice de resistência calculado, revelam valores semelhantes entre os animais tratados e não tratados.
O índice de resistência da arteria umbilicalis em animais deficientes de células de mastro tratados anti-CD122, no entanto, é significativamente aumentado em comparação com camundongos não tratados. Ao tentar esse procedimento, é importante ter em mente que você deve fazer isso a cada dois dias, em vez de todos os dias, para evitar o estresse, e o risco de narcotização repetitiva dos animais. Após esse procedimento, outras medidas, como medição 3D, visualização e quantificação do movimento tecidual ao longo do tempo, medidas de pressão arterial e também injeções guiadas por ultrassom podem ser realizadas.
Após seu desenvolvimento, esse método abriu caminho para médicos e pesquisadores da área de cuidados obstétricos e pré-natal, pois é possível acompanhar o desenvolvimento fetal e reconhecer possíveis anormalidades durante a gravidez.
