Geração de uma plataforma de xenoenxerto de melanoma uveal humano ortotópico do fígado em camundongos imunodeficientes

A maioria dos modelos animais tumorais derivados do paciente são subcutâneamente implantados, impedindo a avaliação de características importantes dos tumores e da eficácia da droga. Abrigar os tumores implantados dentro do fígado facilitou essa análise sem o risco de desvios demais ocorrendo dentro do fígado. Antes de iniciar o procedimento, pulverize todos os materiais e instrumentos com 70% de álcool etílico.

Confirme a falta de resposta ao beliscão do dedo do dedo do bicho anestesiado. Coloque o mouse na posição supina em uma almofada de aquecimento, e molhe a pele com álcool adicional de 70%. Espalhe a pele para visualizar a pele abaixo da área subcostal esquerda.

Remova o cabelo e aplique iodo para ser absorvido na pele. Coloque uma cortina cirúrgica estéril com um buraco de dois centímetros sobre o mouse, e use fórceps ultra finos curvos para levantar a pele abdominal. Faça uma incisão subcostal esquerda transversal de um centímetro na pele e insira pontas de tesoura curvas na incisão para separar o peritônio da pele.

Retraia a tesoura sem abrir as lâminas, e localize o fígado sob o peritônio por sua cor avermelhada escura. Use a tesoura curva para fazer uma incisão transversal de um centímetro no peritônio. Usando a outra mão, insira a borda de um cotonete sob o lobo do fígado esquerdo, e role o cotonete para baixo para empurrar o fígado.

Levante o cotonete para transferir o fígado para uma folha de tecido absorvente não assada. Segurando uma lâmina de bisturi estéril 11 paralela à superfície, pressione a lâmina horizontalmente no fígado para fazer uma incisão de cinco milímetros de largura no parenchyma enquanto pressiona suavemente o local da incisão com um cotonete de algodão. Enrole o cotonete para cima para abrir o local da incisão.

Use fórceps ultra finos curvos para implantar um cubo de um milímetro de tecido tumoral no bolso. Retire os fórceps enquanto rola o cotonete na direção inversa enquanto pressiona para baixo e remova o cotonete. Coloque imediatamente um hemostat absorvível no local da incisão e confirme a hemostasia.

Em seguida, use fórceps sem cortes para descascar o fígado da folha de tecido, e devolver o fígado para a cavidade abdominal. Em seguida, feche o peritônio com uma sutura absorvível de 5-0 e uma ligadura dupla, e feche a pele com uma sutura absorvível de 5-0 e uma ligadura tripla. O tumor de xenoenxerto engrafa-se no fígado como um tumor solitário sem nódulos da filha.

A injeção ortotópica cirúrgica no fígado usando microaíedas pode resultar em um enxerto bem sucedido de um aglomerado de células de melanoma uveal metastáticos do fígado humano cultivados dentro do fígado. Usando este modelo de tumor derivado do paciente ortotópico hepático, a eficácia das drogas injetadas diretamente no fígado pode ser testada com desfechos esperados semelhantes aos observados em pacientes clínicos.