O Morris Water Maze, ou experimento MWM, tornou-se o experimento comportamental mais utilizado e clássico para avaliar a aprendizagem espacial e a capacidade de memória dos animais. Embora existam muitos artigos sobre MWM, na prática, os pesquisadores ainda se sentem confusos. Portanto, este vídeo intuitivo e rigoroso do processo de operação é particularmente importante.
Anteriormente, realizamos um estudo baseado em MWM, sugerindo que a acupuntura pode aliviar os sintomas de camundongos modelo de DA. Aqui, introduzimos o protocolo de operação da MWM utilizado em nossos estudos recentes para fornecer um método simples e visível para os pesquisadores avaliarem a aprendizagem espacial e a memória dos animais modelo de DA. MWM é uma técnica poderosa para avaliar a função cognitiva e é amplamente utilizada em estudos.
No entanto, não há parâmetros definidos ou padrão para realizar a tarefa, como o tamanho da piscina e da plataforma. Então, a demonstração real do método é crítica. Comece por configurar para o morris water maze ou teste MWM de acordo com as instruções do manuscrito.
O dispositivo MWM e o sistema de aquisição e processamento de sinais devem estar localizados em uma sala de experimentos projetada para manter o isolamento acústico. Um tanque branco circular cercado por um pano opaco deve ser posicionado no meio do dispositivo MWM. Uma câmera de vídeo deve ser fixada no teto do dispositivo e conectada a um gravador de vídeo com um sistema de rastreamento automatizado.
Divida o tanque do labirinto de água em quatro regiões iguais usando linhas rotuladas norte, sul, leste e oeste, que conceitualmente dividirão a área da piscina em quatro quadrantes. Em seguida, coloque uma sugestão visual única na parede de cada quadrante dentro da visão do mouse. Encha o reservatório circular com água por uma profundidade de 30 centímetros, e adicione 150 gramas de leite em pó à água para torná-lo opaco.
Para realizar o teste da Plataforma Visível, coloque uma plataforma circular de plástico um centímetro acima da superfície da água em qualquer quadrante aleatoriamente, e coloque uma bandeira preta sobre ele. Solte cada rato suavemente na água de um dos quatro locais de partida voltados para a parede do tanque. Ative o programa de rastreamento do computador assim que o mouse for lançado na água e dê a cada mouse 60 segundos para chegar à plataforma.
No final de cada teste, coloque o mouse na plataforma, e deixe-o ficar lá por 10 a 30 segundos. Observe as trajetórias de natação dos ratos no computador. Regissue o tempo que o mouse levou para encontrar a plataforma como latência de fuga, e analise a velocidade de natação do rato.
Em seguida, seque o mouse com toalhas e aqueça-o com um aquecedor elétrico. Mova a plataforma e realize quatro testes por mouse, iniciando um mouse em quadrante diferente. Deixe o mouse se recuperar por 15 a 20 minutos entre cada ensaio.
Para realizar o teste da Plataforma Oculta, coloque a mesma plataforma sem uma bandeira no quadrante sudeste. Em seguida, coloque o mouse aleatoriamente em um dos quatro quadrantes, e dê-lhe 60 segundos para encontrar a plataforma oculta. Se o mouse não conseguir encontrar a plataforma em 60 segundos, guie-a até a plataforma e deixe-a ficar lá por 10 a 30 segundos.
Regisso recorde a latência de fuga de cada julgamento. Seque o mouse com toalhas e mantenha aquecido com um aquecedor elétrico. Realize quatro ensaios por mouse com 15 a 20 minutos entre cada ensaio, iniciando o mouse em um quadrante diferente cada vez.
Repita os ensaios por cinco dias consecutivos com a plataforma e pistas visuais em posições constantes. Para realizar o teste da sonda, remova a plataforma e coloque o mouse na água de frente para a parede do tanque no quadrante noroeste. Regisso número de cruzamento de natação, velocidade e plataforma.
Quando terminar, seque o mouse e mantenha aquecido. Para realizar o teste Reverso, posicione a plataforma no quadrante noroeste e repita o teste da Plataforma Oculta. Este protocolo foi utilizado para investigar os efeitos da Acupuntura Manual ou MA no aprendizado e memória de camundongos com Alzheimer.
Para o grupo MA, o tratamento começou 15 dias antes dos testes de MWM e continuou durante os 11 dias de testes. Durante o teste da Plataforma Visível no primeiro dia de MWM, não foram observadas diferenças estatísticas na latência de fuga ou velocidade de natação entre os grupos. Durante a Plataforma Oculta e o teste de Reversão, a latência de fuga da doença de Alzheimer ou grupo da AD permaneceu alta, enquanto a latência dos outros três grupos diminuiu gradualmente.
É importante ressaltar que a latência de fuga do grupo MA foi menor que a do grupo AD. Durante o teste da Sonda, o número de crossover de plataforma de ratos no grupo MA foi menor do que o do grupo controle, mas significativamente maior do que o do grupo AD. Além disso, a porcentagem de tempo que os camundongos ma passaram no quadrante onde a plataforma estava previamente localizada foi semelhante ao grupo de drogas, que era menor do que o controle, mas maior que a DA. É importante lembrar que se o mouse não conseguir encontrar a plataforma em 60 segundos, o pesquisador deve guiá-la até a plataforma e permitir que ela fique lá por 10 a 30 segundos.
Não há padrões específicos para as dimensões do pool e do tamanho da plataforma. Esses parâmetros devem ser otimizados em experimentos preliminares de acordo com os requisitos experimentais e a condição dos animais experimentais. A maioria dos estudos precisa ser conduzida em experimentos básicos como o MWM.
Atualmente, a flexibilidade do MWM como ferramenta experimental reside apenas na capacidade de escolher os protocolos básicos de acordo com o estudo proposto, e portanto este teste pode ser aplicado para avaliar a função cognitiva em maior profundidade.
