O modelo de perfuração endovascular combinado com a ressonância magnética pós-operatória permite a verificação do sangramento e exclusão de outras patologias intercranianas. Uma das vantagens dessa abordagem é a opção de quantificar o volume sanguíneo para análises adicionais de subgrupos. Comece raspando o cabelo do pescoço do rato.
Aplique pomada oftálmica durante o procedimento. Higienize a pele com 70% de etanol seguido de Betadina ou clorexidina e aplique 1% de lidocaína. Coloque o mouse em uma posição supina com a cabeça e o tronco voltados para uma direção ascendente.
Estabilize o rato dorsalmente usando fita adesiva nas quatro extremidades. Estique a pele do pescoço e eleve-a. Desdobre a pele do pescoço do queixo até a borda superior do osso da mama e separe as glândulas salivares do tecido conjuntivo adjacente.
Exponha a baácula da artéria carótida comum separando os músculos ao longo de um lado da traqueia. Exponha o campo cirúrgico com um retrátil ou gaze estéril e despreze a artéria carótida e deixe um 8-0 livre sutura de seda sem ligante, garantindo não danificar o nervo vagal. Dissecar a extremidade distal do ECA e ligar os navios duas vezes em posição distal.
No ponto médio do segmento de filamento duas vezes ligado desemprego ao TCE e criar um toco de navio. Deixe uma sutura de seda ao redor do ICA sem fechá-la. Pré-desarranjar uma ligadura para o filamento em torno do toco ECA.
Não feche até a inserção bem sucedida do filamento. Feche o ICA e o CCA temporariamente usando uma sutura ou micro clipe. Usando tesoura microvascular, faça uma incisão no ECA e insira um filamento 5-0 alternativamente 4-O Prolene, e avance-o para o CCA.
Feche a ligadura no ECA enquanto desprende o micro clipe no ICA e CCA. Puxe o filamento suavemente e ajuste o toco ECA na direção craniana enquanto invagina o filamento através da bifurcação para dentro do ICA. Coloque a ponta de filamento mediadamente em um ângulo de aproximadamente 30 graus para a linha média traqueal no plano horizontal e empurre-a para dentro do ICA.
Na bifurcação ACA-MCA, observa-se resistência. Mova o filamento para a frente até três milímetros e perfure a ACA direita. Retire rapidamente o filamento para o toco do ECA permitindo o fluxo sanguíneo no espaço subaracnóide.
Coloque o filamento nesta posição por 10 segundos. Retire o filamento. O CCA pode ser temporariamente fechado antecipadamente para evitar perda excessiva de sangue e, em seguida, retirar o filamento.
Liga o ECA usando suturas pré-arranjadas e reabra a CCA se você já o fechou antes. A presença de tremores musculares, mísia ipsilateral, ofegante para respirar, ritmo cardíaco alterado e incontinência urinária podem estar apoiando evidências de cirurgia bem sucedida. Certifique-se de que não há vazamento de sangramento e desinfete a pele.
Sutura a ferida. Coloque o rato em uma caixa térmica e espere até que o animal tenha consciência suficiente para ter recumedência severa. Para aliviar a dor, administre 1,2 miligrama por mililitro de paracetamol.
Usando um scanner de roedores em um ressonador de cabeça do rato realizar ressonância magnética após 24 horas de cirurgia, coloque o rato em uma manta de água corrente aquecida a 37 graus Celsius. Primeiro, realize uma varredura rápida de referência adquirindo três pacotes de fatias ortogonais. Em seguida, use uma sequência de eco de giro turbo 2D ponderada T2D de alta resolução para imagens.
Transfira os dados para o formato de imagem DICOM e use o software Imagej para classificação SAH e volumetria de coágulos sanguíneos. Para garantir o local correto do sangramento e excluir outras patologias intracranianas, foram realizados exames de ressonância magnética 24 horas após o dia. O grau de sangramento sah foi quantificado com base em ressonâncias magnéticas ponderadas t2.
Entre os camundongos examinados, 14% dos animais foram classificados como grau zero sem evidência radiológica para HAS ou hemorragia. A maioria dos animais apresentou grau de sangramento entre um a três, e 10% apresentaram sangramento grau quarto, que foi definido SAH ao longo do curso e/ou ICH. O volume sanguíneo total de cada grau SAH, baseado na espessura sah, foi quantificado, o que ajuda a determinar a área de sangramento.
O volume de sangramento calculado com base na espessura axial sah mostrou diferenças significativas em seus subgrupos correspondentes grau um a três. Durante toda a cirurgia, uma dissecção minuciosa do tecido de conexão circundante é crucial para o posicionamento correto das suturas. Certifique-se de que o comprimento do toco ECA é suficiente para que você tenha espaço de trabalho confortável para a ligadura, incisão e inserção do filamento.
Nunca empurre o filamento para a frente quando sentir resistência antes da bifurcação MCA-ACA para evitar perfuração prematura do vaso.
