Aplicação do Grafeno Monocamada em Grades de Microscopia Crio-Eletrônica para Determinação de Estruturas de Alta Resolução

Um desafio comum na preparação de amostras por microscopia crio-eletrônica é a localização de partículas na interface ar-água, fazendo com que as partículas adotem orientações preferenciais e desnaturem. Em vez disso, é melhor ter as partículas apoiadas na superfície da grade, que o filme fino suporta, como o grafeno, promove. Outro desafio é a exigência de concentrações de amostra relativamente altas, o que também poderia ser resolvido pelo grafeno.

As grades revestidas com grafeno fornecem inúmeras vantagens para a determinação da estrutura crioEM, mas historicamente têm sido difíceis de fabricar internamente de forma reprodutível, bem como o custo proibitivo para comprar comercialmente. Este protocolo permite a deposição robusta de grafeno monocamada, diminuindo assim a barreira para os usuários que empregam essas grades em suas pesquisas. O grafeno é único por causa de suas propriedades materiais.

É uma monocamada de carbono e, portanto, exibe um ruído de fundo mínimo. Outros suportes de grade crioEM, como uma fina camada de carbono amorfo ou flocos de óxido de grafeno, não podem ser aplicados como uma única monocamada e contribuem com mais sinal de fundo. Agora que estabelecemos um protocolo robusto para a aplicação de grafeno a grades crioEM, gostaríamos de buscar a funcionalização de grades revestidas de grafeno com alças de afinidade para captura on-grid diretamente de lisados celulares.

Isso poderia aliviar outro gargalo na preparação de amostras de crioEM.