Преобразование плазмидной ДНК в E.coli, с использованием метода теплового шока

Резюме

Аннотация

Преобразование плазмиды ДНК в E.coli, методом теплового шока основную технику молекулярной биологии. Она состоит из вставки иностранных плазмиды или перевязки продукта на бактерии. Это видео протокол описывает традиционный метод преобразования с использованием коммерчески доступных химически компетентных бактерий из Genlantis. После короткой инкубации в лед, смеси химически компетентных бактерии и ДНК находится на 42 ° С в течение 45 секунд (тепловой шок), а затем помещен обратно в лед. SOC СМИ добавляется и трансформированные клетки инкубируют при 37 ° С в течение 30 мин при перемешивании. Чтобы быть уверенным в изоляции колоний, независимо от эффективности трансформации, две величины трансформированных бактерий покрытием. Этот традиционный протокол может быть успешно использован для преобразования самых коммерчески доступных компетентных бактерий. Turbocells от Genlantis также может быть использован в романе 3-х минутах преобразование протоколов, описанных в инструкции по эксплуатации.