Method Article
Рабочая безопасно и гуманно с научно-исследовательскими грызунов требует ключевых компетенций в области обработки и сдержанность методами. В этой статье будут изложены основные принципы, необходимые для безопасной обработки и эффективно управлять соединениями для мышей и крыс.
Будучи в состоянии безопасно и эффективно сдерживать мышей и крыс является важной частью проведения исследований. Рабочая уверенно и гуманно с мышами и крысами требует основных компетенций в области обработки и сдержанность методами. В этой статье будут изложены основные принципы, необходимые для безопасного обращения с животными. Одной рукой, двумя руками, и сдержанность со специально разработанными объектов сдержанность будет проиллюстрировано. Часто, другая часть исследований или испытаний использования животных является эффективное управление соединениями для мышей и крыс. Хотя существует большое количество возможных путей введения (ограничено только размером и органов животных), большинство из них не регулярно используются в исследованиях. Это видео иллюстрирует некоторые из наиболее распространенных маршрутов, включая внутривенно, внутримышечно, подкожно, и желудочный зонд. Целью данной статьи является раскрытие зрителю знакомы с этими методами, чтобы основные сдержанность и маршруты вещества администрации. Это видеоне заменяет необходимую практическую подготовку на вашем предприятии, но предназначен для улучшения и дополнения, что подготовку.
1. Безопасный Сдержанность и бережное обращение с животными является ключевой частью экспериментальной процедуры
2. Руководство Restraint
3. Методы соединения администрации
4. Представитель Результаты
Когда животные обрабатываются корректно, есть как минимум стресса для животных и обработчик. Обработчики не укусить или поцарапать, и животные обрабатываются гуманно и грамотно. Соединения вводят через правильный маршрут с минимальным повреждением тканей и, как небольшой дискомфорт для животных насколько это возможно.
Если следователи являются новыми для обработки животных, работая с небольшой чучела животных может быть полезным. Есть также животных тренажеры для некоторых методов, таких как Koken крысы. Для многих исследователей, существует мало шансов, чтобы получить знакомство с иглы и шприцы перед началом работы с животными. Представитель часть игл и шприцев показаны на рисунке 1А и 1В. Перед инъекционных животных в первый раз, онможет быть полезно на практике инъекционного перед началом работы с животными. Очень тонкие иглы, такие как 28 и 30 г, легко ущерб. Если снятие веществ из многофункционального флаконы, использовать большую иглу для этой цели, а затем заменить его на меньшие иглы для инъекций. Burred иглы показано на рисунке 1С. Основные меры предосторожности должны быть приняты при работе с иглами, например, не резюмируя использованные иглы от руки. Рис. 1D показывает иглу recapper в использовании. Это может быть ценной для исследователей, которые необходимо удалить иглы, например, экспресс кровь из шприца без гемолиза видно, когда кровь проталкивается через иглу.
Рисунки 2 и 3 иллюстрируют ориентиры для внутрибрюшной инъекции и типичная структура хвоста, иллюстрирующие цели для инъекций. Рисунке 4 приведены примеры надлежащего размера из зонд иглы. Желудочный зонд иглы должна достичь от устьяНимал направо ниже последнего ребра.
Рисунок 1.) Иглы и B) частей шприца, маркированы. C) Burr на иглу в результате неоднократного размещения иглы в многофункциональный флаконе. D) иглы recapper в использовании.
Рисунок 2. Квадранта брюшной живота. Только вводить в двух нижних секторах, преимущественно правом нижнем квадранте.
Рисунок 3. Схема хвост в поперечном сечении, иллюстрирующий отношение артерий и вен в костной и tendenous структур.
Рисунок 4. Зонд иглы размера у крыс. A) зонд иглу слишком LONг. B) соответствующего размера зонд иглы. C) зонд иглы измерения слишком коротка, D) пальпации за последние ребра, чтобы определить соответствующий зонд размером иглы.
Мышь | Крыса | |||
Маршрут | Рекомендуемый объем | Рекомендуемая датчика и длины иглы | Рекомендуемый объем | Рекомендуемая датчика и длины иглы |
Интраназальная 1 | 5-25 мкл | N / A | 5-25 мкл | N / A |
Внутримышечно 1,2 | 0,00005 мл / г | <23 г, 0,5 до 0,75 В | 0,1 мл / кг | <21 г, 0,5 до 0,75 В |
Внутрибрюшинное 1,2 | 0,02 мл / г | <21 г, 0,75 к 1 в | 10 мл / кг | <21 г, 0,75 к 1 в |
Подкожный 1,2 | 0,01 мл / г | <22 г, 0,5 к 1 в | 5 мл / кг | <22 г, 0,5 к 1 в |
Подкожные 1 | 0,05-0,1 мл | <26 г, 0,5 В | 0,05-0,1 мл | <26 г, 0,5 В |
Внутривенно 1,2 | 0,005 мл / г -0,025 мл / г * | <25 г, 0,75 к 1 в | 5 ml/kg-20 мл / кг * | <23 г, 0,75 к 1 в |
Желудочный зонд 1,2 | 0,01 мл / г | 20-22 г кормления иглы | 5-10 мл / кг | 16-20 г кормления иглы |
* Первое число объеме дается как болюсно в течение примерно 1 минуты. Второй том объеме, который может быть представлен в виде медленной инфузии в течение 5-10 минут.
Таблица 1. Рекомендуемые дозы и иглы размеров для различных путей введения соединения в мышей и крыс.
Этот протокол следует рассматривать как введение в обращение животного и вещества администрации предназначены для дополнения практического обучения, предлагаемые в объекте исследователя. Средства сдерживания, которая будет использоваться и маршруты вещества администрации следует рассматривать в опытно-конструкторских и при исследовании протокола или протокола комитета по этике написано.
Обучение в животном процедур, связанных с жизненно важна для успеха исследования. Для выполнения большинства экспериментов, животные должны быть обработаны научных сотрудников, и тем лучше животное обработки, меньше подвержены стрессу животного 3. Приучение животных нежный контакт с человеком может уменьшить стресс и делает животных более сговорчивым субъектов исследования 4,5. Обработка стресса было показано, влияют на некоторые виды исследований 6 и возможно это может повлиять на других. Сдержанность грызунов должна быть выполнена с осторожным, но твердым обработки (предварительноеРукоятка может привести к травмам грызунов и обработчик) и должно быть для самой короткой продолжительности практично. Сдержанность методы, как правило, выбирается в зависимости от размера животного или доступ искал. Например, обработка взрослых крыс за шкирку, хотя и возможно, часто встречался с сильным сопротивлением со стороны крыс, особенно если обработчик неопытен. Проведение мыши или крысы вручную может сделать доступ к хвосту вены трудно и удерживающего устройства часто выбирают держать животное как можно более неподвижно.
Когда исследователи обрабатывать животных, они часто стремятся вводить соединение или биологический для дальнейшего изучения. Путем введения вещества могут влиять на всасывание, биодоступность и пригодность для конкретного эксперимента. Знакомство с различными маршрутами должны предоставить исследователям возможность управлять своими вещества в как можно лучше для своих исследований. Например, маршрут, который способствует быстрому поглощению вещества, Таких, как внутривенного или внутрибрюшинного, не должны быть использованы, если исследователь хочет управлять вещества в более медленном действующий образом. Последние отзывы о некоторых из этих методов и соображения по объему, оборудования и растворенного вещества могут быть найдены в двух работах Тернера и др.. 1,7
Всякий раз, когда веществ должны быть введены в лабораторных грызунов, внимание должно быть уделено надлежащее размеров оборудования и объема вещества (приведены в Таблице 1). Неправильно размеров оборудования или большого объема может привести к дискомфорту, травмы или смерти животного. Как правило, вещества вводят парентерально являются стерильными, за исключением тех целей исследования было сделать это невозможно (например, бактериального исследования). Соединений и биологических препаратов должна быть в растворенное вещество или транспортное средство, которое будет иметь наименьшее воздействие на животных. Физиологических рН (7.3 -7.4), как правило, хорошо принята, особенно подкожных, внутримышечных и intraperitoneal маршрутов. Non-физиологических рН веществ в ведении этих маршрутов может привести к боли или некроза и повреждения тканей. Более широкий диапазон рН переносится с внутрижелудочного и внутривенно 7. В мелких грызунов, еще одним важным фактором является возможность охлаждения при больших объемах комнатной температуры жидкости даны. Если жидкость в настоящее время вводят внутривенно или внутрибрюшинно, особенно в поддержку больного животного, они должны быть нагреты до температуры тела (37 ° C).
Пути введения обсуждаются в этом протоколе являются те, широко используются во многих научно-исследовательских программ, просты в освоении, и, как правило, не требуют анестезии. Почти бесконечное разнообразие путей введения возможны, однако, в том числе внутричерепного, интратекального, эпидуральная, интратрахеального, внутрикостного и внутрисуставные, чтобы назвать только некоторые из них. Обучение в этих специализированных путей введения должно быть получено от людей WHO имеют большой опыт работы с маршрута и хорошие результаты.
У грызунов, интраназально, как правило, используются для изучения вещества, введенные в легкие через более "естественным"; метод, чем интратрахеального закапывания. Мыши и крысы являются облигатными нос дышащих, так что заставить их вдыхать очень небольшое количество жидкости не сложно, даже в сознательном животных. Поскольку слизистая носа хорошо снабжается кровью сосудов, интраназального введения некоторых веществ могут быть похожи на внутривенного введения. Этот маршрут не рекомендуется у животных с ринитом, однако, так как это может поставить под угрозу поглощения. Попытки управлять большими объемами по интраназально может привести к одышке или утопление животных.
Внутримышечные инъекции обеспечивают быстрое всасывание веществ. Внутримышечные инъекции может быть сложным для крыс и мышей из-за их небольшого размера и, соответственно, мелкие мышцы. Они выполняются в задних ногс. В связи с потенциальным за повреждение седалищного нерва, четырехглавой мышцы бедра представляет собой мышечную ткань выбор.
Хотя и подкожные и внутрикожные маршруты включают кожу, существуют различия между биодоступность вещества помещают в кожу против подкожного слоя. Подкожное введение часто считается "осаждение" маршрута, с более медленными поглощения, чем другие маршруты, такие как внутривенного или внутрибрюшинного. Подкожные администрации используется для очень малых объемах вещества, как правило, иммуностимулирующие вещества, такие как адъювант-антиген смесей. В обоих случаях вводят вещества, должны быть физиологическим рН и не раздражает. Подкожные или подкожных инъекций не должна быть выполнена в загривок, так как это является широко используемым сайт для сдерживания грызунов.
Внутривенного и внутрибрюшинного введения часто считаются эквивалентными у грызунов. Внутривенно дозирования обеспечивают более гAPID поглощение соединений, однако, в то время как внутрибрюшинного введения следует считать эквивалентом перорального введения 8. Следует проявлять осторожность с соединениями вводят внутрибрюшинно так как они могут вызвать боль при неправильном буфер. Общий маршрут внутривенное введение болюса у грызунов с помощью хвоста вены. Если хронический внутривенного введения вещества, желательно, имплантация венозных или артериальных канюль должны быть рассмотрены. Вещества вводили внутривенно должны быть доставлены в асептических условиях и должны быть показаны безопасной ввести внутривенно. Например, вещества, которые могут вызывать гемолиз, тромбоз, васкулит или не подходят для внутривенного введения.
Внутрижелудочного или желудочный зонд маршрута часто используется для имитации общий маршрут дозирования у людей. Она также позволяет для точного дозирования веществ по сравнению с перорального введения через пищу или воду. Биодоступность соединенийвводят через зонд будет меняться в зависимости от ФРС / голодном состоянии животного, а также растворенного вещества или транспортное средство соединения или биологические. Желудочный зонд или кормления иглы должна быть соответствующего размера для животных используются, и должны быть очищены от животных, если одноразовые иглы через желудочный зонд не практично. Травмы в результате принудительного кормления не являются редкостью и включают в себя осаждение вещества в легких или разрыва желудка или пищевода. Обучение должно проходить под контролем опытных партий и осуществляется на эвтаназию животных, а затем анестезии животных (которые будут подвергнуты эвтаназии) до зонд на бодрствующих животных попытка. Первый зонд покушения на бодрствующих животных должны включать средних размеров животных и небольшие объемы вещества, такие как физиологический раствор, что не причинят вреда, если процедура идет наперекосяк. Животные должны быть тесно оцениваются на признаки бедствия, такие, как затрудненное дыхание, посинение, кровотечение или чрезмерное слюноотделение, после того, как зонд и эвтаназии в случае необходимости. Если euthanasia требуется, животное должно быть вскрытие, чтобы определить, почему зонд процедура не удалась.
Авторами являются сотрудники Charles River.
Исследования, представленные здесь была поддержана Charles River.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Название реагента | Компания | Номер в каталоге | Комментарии |
Хвоя | Различный | Различный | Иглы продаются как датчика и длины. Проверьте оба перед заказом. |
Шприцы | Различный | Различный | Всегда выбирайте подходящий размер для объема для введения. |
DecapiCones | Braintree Научные | DC-200, DCL-120, MDC-200 | Доступные для мышей и крыс размеров. |
Грызун фиксатор | Harvard Apparatus, Braintree научных, Plas-Labs, другие | Доступные в прозрачного плексигласа, регулируемым пластика, и рассчитана на мышах и крысах. | |
50 мл коническую трубку | Различный | И NBСП; | |
Кормление иглы | VWR, Поппер и дети | Различный | Установите иглу и длиной до животных, как описано выше. Оба одноразовые и многоразовые иглы кормления доступны. |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены