Изолированная система работы сердца для крупных животных моделях

Резюме

Most studies involving the Langendorff apparatus use small animal models due to the increased complexity of systems for larger mammals. We describe a Langendorff system for large animal models that allows for use across a range of species, including humans, and relatively easy data acquisition.

Аннотация

С момента своего появления в конце ^19-го века, изолированных сердца перфузии аппарат Langendorff, и последующее развитие модели рабочей сердца, были бесценными инструментами для изучения сердечно-сосудистой системы и болезни ^1-15. Хотя подготовка Langendorff сердце может быть использован для любого сердца млекопитающих, большинство исследований с участием этого аппарата используют небольшие животные модели (например, мыши, крысы, и кролик) в связи с увеличением сложности систем для крупных млекопитающих ^1,3,11. Одна из основных трудностей является обеспечение постоянной коронарной перфузионного давления по всему диапазону различных размеров сердца - ключевой компонент любого эксперимента с использованием этого устройства ^1,11. Путем замены классический гидростатического столба постнагрузки с центробежным насосом, Лангендорфу сердце аппарат работает описано ниже позволяет для легкой регулировки и жесткий регулирования давления перфузии, то есть то же самое установка может быть использована для различных породыс или размеры сердца. Кроме того, эта конфигурация может также легко переключаться между постоянном давлении или постоянном потоке во время реперфузии, в зависимости от предпочтений пользователя. Открытый характер этой установки, несмотря на создание регулирование температуры сложнее, чем других конструкций, позволяет легко коллекции сточных и желудочковой данных давления объема.

Введение

Большая часть нашего понимания основного сердечной биологии и физиологии пришел из экспериментов, которые использовали изолированную, ретроградную-перфузии сердце Лангендорфа и изолированные системы, работающие с сердцем. Эти экспериментальные системы все еще ​​широко используются сегодня, чтобы продлить наше сердечно-сосудистой знания важных тем, в том числе ишемии-реперфузии ^2, предварительной подготовки ^4, сотовый основе терапии для поврежденного миокарда ^5,7, сердечные эффекты препаратов ^6,9 и сохранения сердечной аллотрансплантата методы ^8,15-18.

Хотя оба изолированные системы сердца может быть использован для любого вида млекопитающих, они в основном используются на мелких млекопитающих, таких как морской свинки, крысы, кролика или ^3,12,13. Более крупные модели на животных, таких как свиньи и человека, обеспечивают более клинически релевантные данные, но менее часто используются из-за высокой стоимости, большей биологической изменчивости, больших объемов перфузии крови решений и Biggэ единиц оборудования ^1,12-15. Кроме того, сбор данных является более трудным, особенно для отдельных рабочих сердцах ^1,3,12-15. В результате этих сложностей, клинически соответствующие изолированные модели сердца используются редко, строго препятствует прогрессу сердечно-сосудистых исследований поступательного.

В попытке разрешить эти сложности, изолированный подготовка работы сердца был изменен, чтобы создать систему, которая может быть легко адаптирована к сердцам различных видов, включая человека, при любом постоянном давлении или постоянных условиях поток Лангендорфа. Камера соблюдения постнагрузки был заменен с центробежным насосом для упрощения процесса регулирования давления перфузии в режиме Лангендорфа и постнагрузки в рабочем режиме. Вместо закрытых, рубашкой резервуар для сдерживания сердце, эта система использует открытую камеру, чтобы сделать сбор данных проще, позволяя использовать transapical подхода к проводимости катетеризации. Moreovэ-э, это открытая конструкция позволяет получить доступ для оценки эхокардиографической сердца, дальнейшего расширения физиологические параметры, которые можно измерить во время этих экспериментов. Эти улучшения, мы надеемся поощрять других, чтобы использовать эту систему для больших исследований животных поступательного.

протокол

1. Построение Аппарат Лангендорфа (см. рисунок 1)

1. Использование 3/8 "трубки, подключить сердца резервуар с резервуаром крови.
   1. Убедитесь, что на этих трубопроводах проходит через роликового насоса. ПРИМЕЧАНИЕ: Это может потребовать использования двух 3/8 "до 1/4" для шлангов, чтобы создать произведение 1/4 "трубок пройти сквозь роликового насоса.
   2. Подключите резервуар крови к нагревателем / оксигенатора с 3/8 "трубки.
   3. Используйте 3/8 "трубки для подключения нагревателя / оксигенатора к Y-разъема.
   4. Подключите один кронштейн Y-разъем для центробежного насоса, затем подключите центробежный насос со вторым Y-разъем (все с 3/8 "трубки).
   5. Прикрепите кусочек 3/8 "трубкой обеспечении гемостаза клапан в кверху руку, которая будет служить в качестве как пузырь ловушку и средств вставив датчик давления.
   6. Прикрепите кусочек 3/8 "трубки к вниз руку. Эта часть будет приложить к ЗО крестики канюли (т.е. постнагрузки линии).
   7. Подключите другую руку от Y-разъем к притоку предварительной нагрузки камере с помощью 3/8 "трубки. Убедитесь в этом трубка проходит через второй роликового насоса.
   8. Подключите избыток 3/8 "трубки к оттоку этой камеры. Эта часть будет приложить к левого предсердия (т.е. предварительной нагрузки линии).
2. Подключите баллон с кислородом и обогревательные приборы в нагреватель / оксигенатора.
3. Зажмите линию, идущую от Y-разъем к камере предварительной нагрузки, как эта линия не будет использоваться, пока сердце не будет переведен в рабочий режим.

2. Давление-объем Катетер Подготовка

1. В водяной бане при 37 °, теплый бутылку физиологического раствора.
2. Замочите П.В. проводимость катетера и датчик давления в теплом физиологическом растворе в течение не менее 30 мин.
3. Включите систем сбора данных, что позволяет как разминаться, по крайней мере 30 мин.

TLE "> 3. Подготовка Аппарат Лангендорфа

1. Включите кислородного бака, нагревательных приборов, роликового насоса, соединяющей два резервуара, и центробежного насоса. Нагревательное устройство должно быть установлено до температуры тела животного (~ 36 ° C).
2. Вымойте кровь в соответствии с инструкциями изготовителя. Более медленные скорости мыть рекомендуются для более полного удаления отходов из крови (например, избыток электролитов, лизированных клеточного материала).
3. Как только кровь промывают, проверить уровень гематокрита перед гемодилюции.
4. Восстановить промытых эритроцитов физиологическим раствором для желаемой концентрации гематокрита (рекомендуется: 20-25%) и добавить в устройство Лангендорфа.
5. Отрегулируйте скорость двух насосов начать кровоток через систему (за исключением предварительной нагрузки камеры).
6. Проверьте рН и электролитов смеси крови и настраивайте до физиологических для видов, используемых. ПРИМЕЧАНИЕ: Для предотвращения вредного вПоток кальция при реперфузии, уровни кальция на аппарате Лангендорфа первоначально следует поддерживать на низком уровне (0,3-0,5 ммоль / л).
   1. Если есть снижение гематокрита с одновременным повышением калия, проверьте лактатдегидрогеназы и плазменный бесплатно гемоглобин, чтобы исключить гемолиз.
   2. В случае гемолиз происходит, убедитесь, что все соединения затянуты и нет области очевидного Sheering.
7. Прикрепите катетер Millar в средней слот давления системы PowerLab.
8. Калибровка датчика давления в соответствии с инструкциями изготовителя.

4. Подготовка Сердце для крепления к Аппарата Лангендорфа

ПРИМЕЧАНИЕ: Надлежащим арестован сердце должны быть использованы для любых крупных экспериментов на животных, включая изолированную систему сердца. Отсутствие кардиоплегической сердца может повредить сердце, так что он не будет производить измеримые работу. Celsior, или с низким содержанием калия Универплотность Висконсина (UW) решение рекомендуется, так как не только эти решения похожи на те, которые используются клинически, но низкий калий раствора помогает предотвращает гиперкалиемии, а на цепи. Объем кардиоплегического решения будет зависеть от размера сердца, 1 л, достаточной для свиней сердцах.

1. Быстро удалить сердце из контейнера для хранения, залить любую решение для хранения данных в желудочках, промокните насухо и взвесить.
2. Для поддержания холодный миокарда температуру, пока сердце не готов к Лангендорфа, вернуть сердце контейнер для хранения и ориентировать его так, что аорта вверх.
3. Вставьте "канюли 3/8 в аорту и закрепите с застежкой-галстук.

5. Прикрепление Сердце к Лангендорфа

1. Уменьшите центробежный насос для медленного ручеек.
2. Трикл кровь в аорту, пока не будет заполнена кровью и полностью деаэрированной.
3. Тщательно прикрепите аорты Cannula к аорты труб на Лангендорфа. Запишите время крепления.
4. Вставьте датчик калиброванный давления через гемостаза клапана [DS1] на родной аорты.
5. Начните измерения давления и отрегулируйте центробежный скорость насоса до требуемого давления реперфузии не будет достигнута. ПРИМЕЧАНИЕ: Давление может измениться, поскольку коронарные изменений сопротивления. Таким образом, мониторинг давления в аорте тесно, особенно в начальной реперфузии.
6. Увеличение температуры на потепление единицу интрамиокардиальной температуры измеряется при 37 ° С ПРИМЕЧАНИЕ: Там будет задержка между корректировках, внесенных в блоке потепления и изменения в интрамиокардиальной температурах. Таким образом, изменения температуры следует постепенно.
7. Получить базовые (Т = 0) образец из венозной резервуар крови для измерения рН, электролиты и другие биохимические измерения.
8. Вставьте датчик температуры в перегородки и контролировать миокарда температуры. Уменьшить температуру прогрева устройстваесли инфаркт температура поднимается выше 39 ° С.
9. Взять образцы крови каждые 15 мин, регулируя физиологические параметры, как требуется для эксперимента.
   1. Добавить приблизительно 1 ммоль кальция в растворе крови каждые 5 минут, убедившись, что ионный кальций> 0,8 ммоль / л до начала рабочего режима.

6. Ввод Сердце в рабочем режиме

1. Вставьте соответствующего размера канюли в левое предсердие / легочной вены. Это может быть сделано либо с кисетным шва или почтовый галстук в случае необходимости.
2. Закройте все отверстия в левом предсердии, что может привести к их протеканию, такие как другие легочные вены происхождения с швом или скоб по мере необходимости.
3. Отрегулируйте высоту предварительной нагрузки камеры таким образом, чтобы высота колонны дает желаемого предварительное давление. Примечание: Если предположить, что плотность крови / кристаллоидным смеси равна плотности воды, 1 мм рт = 1,36 см расстояния от аортального клапана в верхней частиуровень в крови в предварительной нагрузки резервуара (например, 15 мм рт.ст. = 20,4 см).
4. Освободить трубку, идущую в предварительной нагрузки камеры и медленно начать предварительной нагрузки ролик насос, позволяя натяг камера и предварительный натяг трубки полностью заполнить кровью.
5. После того, как трубка натяг полностью де-эфир, медленно заполнить левое предсердие и канюли с кровью.
6. Не позволяя любой воздух для входа в систему, подключить предварительной нагрузки трубопроводы к левого предсердия канюли.

7. Получение желудочка давление-объем (PV) Recordings

1. Следуйте инструкциям производителя для давления и калибровки Rho кюветы для систем сбора данных.
2. Поставьте кисетным шва с использованием 3-0 полипропиленовый шов на левого желудочка (ЛЖ) вершины.
3. Использование 16 г иглы, сделать ножевое разрез внутри кисетным.
4. Вставьте PV проводимости катетер в апикальной разрез. ПРИМЕЧАНИЕ: Идеально размещение катетер DEPзаканчивается имея все электроды зондирования в LV и два электрода возбуждения вне LV. Убедитесь, что правильно подобранного животных и катетер были выбраны (см. Обсуждение).
5. Нажмите кнопку "Пуск" в верхнем правом углу, чтобы начать запись данных и определить, сколько сегментов объем активны.
   1. Если все сегменты не активны, отрегулируйте положение катетера, пока все сегменты не являются активными. ПРИМЕЧАНИЕ: Незначительные крутящий катетера может быть необходимо для оптимизации цикла морфологию
   2. Если не удалось получить сигналы во всех сегментах, настроить расположение электродов возбуждения и электродов зондирования соответствии с инструкциями производителя.
6. Как только желаемый конфигурация получается, следуйте инструкциям производителя по объему и альфа калибровки.
7. Использование правильно калиброванного катетер, получения по меньшей мере 30 сек данных базовых давление-объем. ПРИМЕЧАНИЕ: Эти петли давление-объем обеспечит объем зависивмятина измерения сердечной функции (например, сердечного выброса, ударного объема).
   1. Если достаточные петли получаются, по-прежнему на следующей стадии без остановки записи данных, с тем чтобы получить данные давление-объем окклюзии.
8. Закупоривать предварительной нагрузки трубку медленно с помощью зажима труб. ПРИМЕЧАНИЕ: Петли давления объем должен начать становиться все меньше и смещение вниз и влево. Это называется "спуститься".
   1. Получить 10-15 сек от ходьбы вниз, затем отпустите зажим трубки для обеспечения предварительной нагрузки повторно ввести левое предсердие. ПРИМЕЧАНИЕ: Эти петли давление-объем обеспечит объем независимые измерения сердечной функции (например, предварительной загрузки recruitable хода работы, конечного систолического давление-объем отношения).
   2. Остановить запись данных, нажав на кнопку "Стоп" в верхнем правом углу экрана.
   3. Подождите не менее 5 мин перед повторениемокклюзия.
9. Повторите шаги 7,7 и 7,8 для получения повторных измерений.

Результаты

Фиг.1 представляет собой схематическое изображение схемы, в том числе предложенной установки катетера. Важными элементами этого устройства включают следующие: использование центробежного насоса, чтобы контролировать постнагрузку; размещение катетера давления (темно синяя линия) в корне аорты контроля давления перфузии; и размещение давления объем (PV) катетера (светло-голубой линии) transapically. Хотя соединения на рисунке, как представляется, прямые соединения, "Y" разъемы рекомендуются, особенно для предварительной загрузки линии.

Рисунок 2 показывает данные, полученные от датчика давления, который помещен в корня аорты свиньи из сердца во время реперфузии в цепи, которая последовательно между 40-42 мм рт.ст. в течение 20 мин данные. Изменения в коронарной сопротивления может вызвать колебания давления перфузии (рис. 3). Эти изменения могут быть незначительными и постепенное, исправляя их сами с течением времени (рис. 3а). Тем не менее, в некоторых случаях эти изменения могут быть резкими и требует регулировки потока через центробежного насоса для поддержания требуемого давления реперфузии (фиг.3В). Из-за изменения могут произойти, мониторинг корня аорты давления во время реперфузии требуется.

Благодаря использованию transapical ножевое разрез, данные давление-объем может быть легко получена на изолированной системы сердца. В этом эксперименте использовали свиной сердце, которые были сохранены в холодной (4 ° C) сохранение раствора в течение 2 часов. После первого введения PV катетера, петли были низкого качества (рис. 4а), с несколькими областях кроссовера и без заметных компонентов сердечного цикла. Тем не менее, с минимальным манипуляций с катетером внутри желудочка, морфология цикл значительно улучшились (рис. 4, б), что позволяет измерения должны быть получены.

ve_content "> Несмотря оптимизации положение катетера, петли, приобретенные на экс естественных цепи (рис. 5, верхний ряд) может иметь различную морфологию, чем естественных условиях петель в (рис. 5, нижний ряд). Эти изменения в петли морфологии, скорее всего, из-за с различной ориентацией сердца на цепи по сравнению с в лежачем животного, а также отсутствием анатомических приспособлений, найденных в пределах живого животного (например, перикарда). Кроме того, использование стимуляции проводов, чтобы помочь регулировать частоту сердечных сокращений ( Рекомендуем посетить вложения: межжелудочковой перегородки) вводит внешний электрический ток, что приводит к шипы видели в нижней правой части бывших естественных условиях петель Однако, пока эти петли еще особенность компоненты сердечного цикла, они все еще ​​могут дать интерпретируемые данные.. В таблице 1 приведены несколько функциональных параметров, полученные из этих петель давление-объем с помощью PV катетер. холодно статического хранения вероятно вызвало некоторое внутреннее повреждение сердца, который помогает объяснить некоторые изменения в значения, полученные на трассе по сравнению с в естественных условиях измерений. Некоторые вариации в зависимых переменных нагрузок также из-за возможных различий в предварительной нагрузки между цепью и живым животным.

Рисунок 1. Схема установки.

Рисунок 2. Репрезентативных измерений корня аорты давления во время реперфузии.

g3highres.jpg "ширина =" 500 "/>
Рисунок 3. Примеры изменений в корень аорты давления, которые могут возникнуть во время реперфузии. Эти изменения могут быть постепенным и самокоррекции (А) или резким и требует внесения изменений в настройки на центробежного насоса (B).

Рисунок 4. Петли давление-объем, полученные при первоначальном введении катетера transapically (А) и после незначительной манипуляции катетера (B). Обратите внимание на улучшение контура морфологии, в результате чего устраняется цикл кроссовер и элементов сердечного цикла узнаваемы . Шипы в нижней правой части обоих наборов петель обусловлены использованием иноходца, который вводит внешнюю электрический сигнал.

"Рисунок 5" FO: контент-ширины = "5 дюймов" Первоначально "/ files/ftp_upload/51671/51671fig5highres.jpg" ширина = "500" />
Рисунок 5. Измерения Представительства давления объем принято на экс естественных цепи (верхний ряд), с естественных условиях измерений в (нижний ряд) для сравнения. Опять же, Pacer шипы можно увидеть в правом нижнем углу обоих наборов бывших естественных условиях петель.

Таблица 1 Функциональные параметры, полученные для свиного сердца в естественных условиях (левая колонка) и на сердце аппарата работая после 2 часов холодного хранения (правая колонка) СО:.. Сердечный выброс; E: артериальная эластичность; EDPVR: конечного диастолического давления громкости отношения; КДО: конец диастолический объем; ESPVR: End систолическое давление-объем отношения; PRSW: Предварительный натяг-recruitable работа инсульт; ПВС:давление-объем площадь; С.В.: ударный объем; СВ: ход работы.

Обсуждение

Langendorff изолированных сердца перфузии аппарат и модель работы сердца привели к некоторым из самых фундаментальных открытий в физиологии сердца, патологии и фармакологии. Универсальность этой модели позволяет использовать его с различными видами при различных нормальных и патологических состояний, ^1-18. Тем не менее, изолированы модель сердца обычно не используется для крупных млекопитающих, особенно человеческие сердца, отчасти из-за возросшей сложности как конструкции устройства и сбора данных. Таким образом, протокол, представленные здесь демонстрирует попытку улучшить эти сложности, что приводит к относительно воспроизводимых посредством изучения изолированных свиные сердца.

Важнейшим компонентом нашей установки является замена артериальная соблюдения / постнагрузки камере с центробежным насосом. Этот обмен позволяет усилить контроль над коронарной перфузионного давления и постнагрузки в Лангендорфа и режимов работы сердца, respectiVely, позволяет этот набор, чтобы быть легко адаптирована к сердцам различных размеров и видов. Например, в этой конструкции, свиные сердца реперфузии при 40-45 мм рт.ст., в то время как человека реперфузии сердца на 60-65 мм рт. Это изменение давления достигается просто путем корректировки параметров центробежного насоса; Ни один из компонентов системы не должна быть физически регулировать. Кроме того, помещая датчик давления в корне аорты контролировать коренных давления позволяет легкий переход между постоянным потоком и постоянным давлением в режиме Лангендорфа. Хотя это изменение снимает классическую камеру соблюдения, центробежный насос, позволяя двунаправленный поток происходит на основании градиента давления, может служить в качестве камеры соответствия. С систолы и выброшенного ударного объема, ретроградный кровоток в насосе служит для уменьшения давления постнагрузки, тиражирование аорты эластичность.

Открытая конструкция этого аппарата также важно. После сердце висит в открытом аREA, вместо полузамкнутом камере или воронку, позволяет легче аппаратуры для измерений давления объема. Открытая конструкция позволяет использование transapical разрез для LV катетера, избегая подхода трансвальвулярный. Подход трансвальвулярный более технически сложно, и обычно требует рентгеноскопии для правильного размещения. Кроме того, этот подход может также индуцировать клапанной недостаточности. При использовании transapical подход, мы безопасно и легко разместить катетер в левом желудочке, устраняя дополнительные расходы и неудобства рентгеноскопии. Открытая конструкция также обеспечивает легкий доступ для эхокардиографии и стоков коллекции, дальнейшего расширения функциональных и биохимических параметров, которые могут быть оценены в то время как в этой системе.

Открытая конструкция, а облегчения сбора данных, делает регулирование инфаркт температура сложнее. Поддержание физиологической температуры является одним из известных проблем с Лангендорфаили работают системы сердца ^1,3,11,13. Система Лангендорфу обычно содержит тепловую камеру, которая помогает поддерживать надлежащую температуру, но эта камера также делает вставка желудочка давление-объем катетера более трудным. Чтобы решить эту уступает терморегуляцию открытой конструкции, оксигенатора / теплообменник был помещен после водохранилища. Минимальное пространство между теплообменником и аорты канюлю снижает потери тепла, а также датчик температуры инфаркт обеспечивает нормотермию. Использование рубашкой трубопровода или внешних источников тепла также могут быть использованы, чтобы помочь с контролем температуры.

Другим уникальным элементом этого протокола промывки аутологичной крови свиньи изучаемого и воссоздания его нормального физиологического раствора. Хотя, использование либо в целых perfusates крови или эритроцитов дополненными кристаллоидными буферов не редкость, это делает настоящее вопросами. Бывший обычно требует донорской животное, которое добавляет SUBSTАНТИАЛ издержки эксперимента, в то время как последний может иметь проблемы иммуногенности, так как обычно происходит от бычьего ^1,11-13 крови. По мытья собственную кровь оригинального свиньи, протокол требует только одного животного и вопросы иммуногенность абляции. Кроме того, процесс промывки удаляет большую часть электролитов, то есть они могут быть легко манипулировать в экспериментальных параметров. Наконец, используя блок сохранения крови удаляет большинство белков в крови, которое является как преимуществом и недостатком этого способа. Преимуществом является то, что любой коагуляция и иммунологические / инфекционные белки удаляются, уменьшая вероятность образования сгустков или загрязнения. Недостатком является то, что эта смесь имеет низкую онкотического давления, которое может вести к отеку миокарда и, возможно, потери функции сердца с течением времени. Эта проблема может быть решена, однако, за счет добавления альбумин или другой коллоида.

Обеспечение того, чтобы правильно подобранногоIMAL и катетер были выбраны также важно, как с помощью соответствующего работающем сердце аппарат. В идеале, катетер будет размещена со всеми электродами зондирования внутри желудочка пространстве, с двумя электродами возбуждения (т.е. наиболее проксимальные электроды) за пределами желудочка пространстве. Если полость желудочков животного слишком мал, или расстояние между электродами слишком велико, то все сегменты не будут соответствовать в пространстве ЛЖ. В то время как расположение электродов возбуждения может быть скорректирована, небольшой полости ЛЖ может также вызвать катетер согнуть или кривой, что делает сбор данных трудно. Таким образом, для функционального анализа больших сердец животных, размер животных не менее 60 кг рекомендуется. С животного такого размера, расстояние между электродами 7 мм, как правило, обеспечивает полную вставки катетера.

В заключение, эта рукопись описывает изолированную систему работающем сердце, что упрощает регулирование давления перфузии, колонка данныхлекция, и общий дизайн, делая контроль температуры лишь немного сложнее. Эти изменения в изолированной работающем сердце мы надеемся, позволит за более широкого использования с большими сердцами млекопитающих, включая человека, углубления нашего понимания сердечной патологии и позволяет более клинически соответствующие варианты лечения, которые будут обнаружены.

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
PowerLab 16/35 with LabChart Pro	ADInstruments	PL3516/P
MPVS Ultra Pressure-Volume Unit	ADInstruments	880-0168
Ventri-Cath Catheter (5F, 12E, 7mm, DField, Straight, 122cm)	Millar	VENTRI-CATH-507s
Pressure Catheter (3.5F, Single, Straight, 100cm, Ny, Non Repairable)	Millar	SPR-524
PV Extension Cable (10ft)	ADInstruments	CEC-10PV
Catheter Interface Cable (10ft)	ADInstruments	PEC-10D
Rho Calibration Cuvette	ADInstruments	910-1060
MPVS Ultra BNC Cable Pack	ADInstruments	880-0172
Autotransfusion system	Sorin	7320000
Bowl Set with Low Volume (135 ml) Centrifuge Bowl	Sorin	7135100
Oxygenator/Heat Exchanger	Terumo	3CXSX18RX
Perivascular flow probe	Transonic Systems	PAU Series	Size of flow probe will depend on animal size; for 60 kg pig, recommend 20 or 24 mm probe
Perivascular flowmeter module	Transonic Systems	TS420
Myocardial temerpature sensor	Smiths Medical	MTS-40015
16 G 1" Regular needle	BD Inc.	305197
4-0 polypropylene suture (double-arm)	Ethicon	8526H	For purse-string stitches
2-0 polypropylene suture (single-arm)	Ethicon	8833H
Cable ties	ULINE	S-1021
Cable tie gun	ULINE	H-241
Clear, Flexible PVC Tubing	VWR International	89068	Inner diameter depends on cannulas, pumps and other equipment used; most commonly use 1/4", 3/8" tubing
Straight Tubing Connectors	VWR International	46600
Y-Shaped Tubing Connectors	Thermo Scientific	6152
Jacketed Bubble Trap	Radnoti	14040	For preload chamber
Centrifugal pump	Maquet	70105	The centrifugal pump and roller pumps were obtained used from perfusion department after clinical use.
Roller pumps	Maquet	HL-20
Hemostasis Valve	Merit Medical	MAP150
Blood gas analyzer	Instrumentation Laboratory	570001000