Frozen Liver Tissue Sectioning and BODIPY Staining of Lipid Droplets

Включите криостат и вырежьте срезы замороженной ткани печени толщиной 12 микрон, собранные у крысы. Поместите срезы на помеченные предметные стекла микроскопа при комнатной температуре. Для окрашивания BODIPY трижды промойте участки ткани с помощью PBS в течение пяти минут каждый.

После последней стирки обведите участки на предметном стекле гидрофобным слоем с помощью барьерной ручки. Приготовьте окрашивающий раствор, содержащий BODIPY 493/503 и DAPI. Затем пипеткой нанесите 75 микролитров раствора на каждое предметное стекло.

Инкубируйте предметные стекла при комнатной температуре в течение 40 минут в темноте. После инкубации трижды промойте предметные стекла PBS по пять минут каждый. Затем, используя флуоресцентную монтажную среду, аккуратно установите защитную крышку на каждое предметное стекло.

Дайте слайдам высохнуть в течение 30 минут, прежде чем запечатывать края лаком для ногтей.