Подготовка сперматозоидов человека к респирометрии высокого разрешения

Для начала соберите образцы и инкубируйте их в течение 30-60 минут при комнатной температуре до полного сжижения. Затем перемешайте образец и загрузите семь микролитров в предварительно разогретую камеру для подсчета сперматозоидов при температуре 37 градусов Цельсия. Поместите камеру на предварительно нагретый предметный столик микроскопа прямого света.

Затем откройте компьютеризированное программное обеспечение для анализа спермы и нажмите на mot, чтобы войти в модуль подвижности и концентрации. Выберите конфигурацию, которая соответствует состоянию сперматозоидов человека. Случайным образом проанализируйте 10 различных полей в каждой камере, нажав на кнопку «Анализировать».

Затем нажмите «Результаты», чтобы получить концентрацию и подвижность образца. Чтобы подготовить клетки к респирометрии с высоким разрешением, сначала центрифугируйте образцы при температуре от 400 до 500 G в течение 10 минут при комнатной температуре. Затем удалите семенную плазму и ресуспендируйте сперматозоиды в двух миллилитрах соответствующей среды.

Повторите оценку спермы с помощью компьютерного программного обеспечения для анализа спермы для исследования концентрации сперматозоидов.