Профилирование созревания дендритных клеток, полученных из моноцитов человека (Mo-DC)

Начните сбор нового образца клеток, представляющих интерес для окрашивания антителами, промывая клетки при комнатной температуре в течение пяти минут при 300 G с нормальным перерывом. Распределите клетки по микропробиркам. Чтобы выполнить окрашивание с использованием нужных антител, инкубируйте флуоресцентные конъюгированные антитела в темноте в течение 15 минут при комнатной температуре.

Промойте клетки одним миллилитром PBS перед центрифугированием в течение пяти минут при 300 G при комнатной температуре. Добавьте до 100 микролитров PBS во все микропробирки. Затем ресуспендируйте клетки в 300 микролитрах 2% параформальдегида и храните пробирки в темноте при температуре четыре градуса Цельсия до проточной цитометрии.

Наблюдалось значительное увеличение экспрессии антигенпрезентирующих молекул MHC-I и MHC-II, а также экспрессии костимулирующих молекул CD80 и CD86 в результате лечения сиалидазой.