Начните с распыления на правильно усыпленную мышь 75%-ного спирта для дезинфекции кожи. Затем поместите мышь в положение лежа на спине. Подтяните кожу брюшной области животного, и с помощью хирургических ножниц сделайте в ней небольшой разрез.
Затем с помощью ножниц тупо отделите кожу и мышцы живота от таза до шеи, по вентральной средней линии. Обнажите сердце и легкие, разрезав диафрагму и ребра по обеим сторонам средней линии. Далее аккуратно удалите печень, селезенку, кишечник и почки, не допуская повреждения стенок кишечника.
После этого удалите легкие и пищевод. Теперь аккуратно поднимите сердце с помощью щипцов, которые держат в одной руке, и отделите аорту от позвоночника хирургическими ножницами, которые держат в другой руке. Затем поместите сердце и аорту в 60-миллиметровую чашку Петри, содержащую ПБС с добавлением антибиотиков.
Извлеките микрохирургические щипцы и микрохирургические ножницы из спирта и промойте их в 25 миллилитрах PBS, чтобы удалить излишки спирта. Работая под стереомикроскопом, удалите тимус и другие ткани из сердца и аорты. Затем удаляют сердце, оставляя аорту с периваскулярными жировыми тканями или ПВАТ.
Перенесите аорту вместе с ПВАТ в чистую 60-миллиметровую чашку Петри, содержащую ПБС с добавлением антибиотиков. С помощью одной пары микрохирургических щипцов удерживайте аорту, а другой парой оттягивайте прикрепленные жировые ткани, чтобы отделить ПВАТ от аорты. Удалите как можно больше сосудистой ткани, причинив минимальный вред ПВАТ.
Наконец, переложите собранные ПВАТ в двухмиллилитровую микроцентрифужную пробирку, содержащую антибиотик с высоким содержанием глюкозы, DMEM, помещенную на лед.
