Dextran-FITC Injection and Matrix Gel Plug Collection от мыши для анализа Matrix Gel Plug

Чтобы ввести мышке Декстран, FITC через семь дней после инъекции матричного геля, РЕСУСПЕНДИРУЙТЕ 0,5 миллиграмма Декстрана, FITC в 500 микролитрах двойной дистиллированной воды. Тщательно перемешайте его, чтобы получить один микрограмм на микролитр раствора Dextran, FITC. Наполните шприц 29 калибра 50 микролитрами раствора Dextran FITC.

Закрепите мышь на инструменте для инъекций в хвостовую вену, продезинфицируйте хвост ватным тампоном, смоченным на 75% спиртом, прежде чем осторожно ввести 50 микролитров раствора Dextan FITC в шприце в хвостовую вену. Прижмите ватным тампоном к месту инъекции на одну минуту, чтобы остановить кровотечение. Верните мышь в клетку и дайте ей расслабиться в течение 30 минут, прежде чем собрать матричную гелевую пробку.

Чтобы собрать гелевую пробку, разрежьте кожу усыпленной мыши по отмеченной границе пробки, используя хирургические ножницы. И снимите кожу над матричной гелевой пробкой. Соберите пробку и промойте ее в стакане с фосфатным солевым раствором, чтобы смыть лишнюю кровь.

Далее накройте дно кассеты для встраивания ткани примерно 0,5 миллилитрами геля для встраивания ткани. Затем быстро поместите матричную гелевую пробку на гель для встраивания ткани в запланированной ориентации. Вставьте пробку с помощью дополнительного геля для заделки тканей.

Затвердевайте кассеты при температуре минус 80 градусов Цельсия в течение 12 часов. После снятия застывшего пробкового блока разрежьте участки толщиной 12 микрон с помощью замораживающего микротома. Затем установите срезы на предметные стекла микроскопа.