Создание карты пластин и нанесение покрытия 2D-контроля на пластиковые лунки для 3D-биопечати клеток, полученных из iPSC человека

Для начала откройте программу карты планшетов и выберите клетки культуры в опции 3D. Затем выберите модель визуализации для 96 луночных планшетов. В окне выбора матрицы выберите HydroGel PX-2.53.

Введите типы клеток как глутаматергические нейроны и астроциты, а плотность клеток составляет 20 миллионов клеток на миллилитр. Разработайте желаемую карту пластин, выделив лунки на пластине. Включите в конструкцию хотя бы один ряд 2D контроля на пластике.

Затем убедитесь, что модель пластины, указанная в верхней части окна, изменена на предполагаемую модель пластины для использования. С помощью кнопок «Загрузить» загрузите протокол и распечатайте файл для карты табличек. Затем сохраните их на компьютере, подключенном к биопринтеру.

Приготовьте 0,1%-ный раствор полиэтиленимина в боратном буфере и отфильтруйте его через фильтр толщиной 0,22 мкм. Добавьте 100 микролитров 0,1%-ного раствора полиэтиленимина в каждую 2D-контрольную лунку 96-луночного планшета и инкубируйте при температуре 37 градусов Цельсия в течение двух часов. Затем пять раз промойте лунки PBS.

Как только лунки высохнут, добавьте в лунки разведенный раствор ламинина и выдерживайте при температуре 37 градусов Цельсия в течение четырех часов.