Выделение типов клеток ЦНС с помощью магнитных шариков у наивных мышей и мышей EAE

Для начала разделите очищенную, неразбавленную суспензию клеток ЦНС мыши на две фракции для дальнейшего выделения микроглии и олигодендроцитов. Затем добавьте в соответствующую клеточную суспензию меченые магнитом микрогранулы, специфичные для поверхностного антигена для различных типов клеток ЦНС. Поместите столбик в магнитное поле, выровняйте столбик, а затем добавьте на столбик полученную клеточную суспензию.

Ячейки с магнитной меткой будут сохранены в столбце, а ячейки без метки будут проходить через него. После удаления колонки из магнитного поля вымывайте из колонки магнитно меченые ячейки в пробирку в виде положительно выбранной клеточной фракции. Разделите отрицательный поток, проходящий от олигодендроцитов, на две фракции для дальнейшего выделения нейронов и астроцитов.

Анализ проточной цитометрии с использованием маркеров, специфичных для типа клеток, в сочетании с дискриминацией живых или мертвых клеток позволил получить микроглию, олигодендроциты, астроциты и нейроны. Фенотипическая характеристика различных клеточных популяций показала, что для всех основных типов резидентных клеток ЦНС были получены суспензии одиночных клеток с чистотой и жизнеспособностью около 90%.