Создание системы акустической сборки и сбора клеточных культур для получения однородных клеточных сфероидов

Для начала простерилизуйте камеру акустического устройства 75%-ным спиртом в течение пяти минут. Затем очистите устройство стерильным PBS и облучайте его ультрафиолетовым светом в течение одного часа. Установите стерильное акустическое устройство на предметный столик микроскопа для наблюдения за внутренними помещениями камеры сверху.

Расположите цифровой микроскоп на той стороне устройства, которая свободна от преобразователей PZT, что позволит вести боковой обзор внутренних помещений камеры. Независимо соедините провода от трех преобразователей PZT последовательно к трем усилителям мощности и трем выходным каналам функциональных генераторов. Запрограммируйте настройки функциональных генераторов для каждого датчика PCT, указав такие параметры, как синусоидальные формы сигнала, частота и амплитуда.

Культивирование клеток 3CA в DMEM с добавлением 10% FBS и 1% пенициллина стрептомицина в колбе для культуры клеток T25. Когда клетки станут на 80% сливающимися, дважды промойте культуру PBS. После удаления PBS добавьте в колбу два миллилитра 0,05% трипсина-ЭДТА и инкубируйте при температуре 37 градусов Цельсия для отслойки клеток.

Добавьте в колбу два миллилитра полной среды для культивирования клеток, чтобы остановить трипсинизацию. Переложите клеточную суспензию в 15-миллилитровую пробирку и центрифугируйте при 200 G в течение пяти минут.