Чтобы начать подготовку образцов для анализа белка по Брэдфорду, разбавьте образцы белка до получения концентраций белка в пределах стандартного диапазона кривой от 0,025 до 1,0 мг на миллилитр. Создайте несколько разведений для каждого образца в этом диапазоне. Для нулевой точки белка добавьте в назначенные лунки 10 микролитров буфера или среды, используемой для приготовления стандартных растворов.
Затем добавьте по 10 микролитров каждого стандартного раствора белка в набор из трех лунок, служащих тройками в 96-луночной микропланшете. В отдельный набор лунок на ту же 96-луночную микропланшет добавьте по 10 микролитров каждого образца разведения в трех количествах. Далее во все лунки добавьте 250 микролитров протеинового реагента Bradford.
На экране отображается схема окончательной настройки микропланшета. Продолжайте записывать результаты в хорошо освещенном помещении в течение 5-15 минут после добавления реактива для анализа. Одной рукой удерживайте микропланшет на однородном белом фоне, следя за тем, чтобы он был параллелен рабочему столу.
Используя другую руку, держите смартфон параллельно скамейке и микропластине. Приступайте к съемке нескольких снимков всей микропластины. Для устройств iOS включите параметр сетки в настройках камеры, чтобы включить индикатор уровня камеры.
Для устройств Android активируйте линии сетки в настройках камеры, чтобы добиться того же. Несмотря на то, что специальное осветительное оборудование не требуется, будьте осторожны при правильной съемке изображений. Избегайте затенения пластины или фона и предотвращайте чрезмерное отражение.
Кроме того, следите за тем, чтобы не наклонять тарелку. Осмотрите изображение на наличие фона, однородности, теней и отражений. Также проверьте угол наклона лунок:Центр каждой лунки должен быть виден непосредственно При желании считайте микропланшет в считывателе микропланшетов, чтобы сравнить цветовые данные изображения с показаниями поглощения микропланшета.
