Подготовка квадратов CVD-графена размером с сетку MMA с покрытием CVD для крепления к сеткам CryoEM

Начните с разрезания квадратов графена с метилметакрилатом или покрытием MMA на кусочки размером с сетку. Для этого используйте два набора щипцов обратного действия для поддержки графенового квадрата CVD, при этом следя за тем, чтобы сторона MMA была обращена вверх, прикрепляя его к щипцам. Чтобы разрезать графен на маленькие квадраты, используйте два набора щипцов обратного действия, чтобы удерживать графен правой стороной вверх, закрепляя его на месте, а также удерживать край маленького квадрата после того, как отрезал его от остальной части большого квадрата.

Наклоните стакан, содержащий сульфат аммония или APS, чтобы поместить в него квадраты под небольшим углом, не опускаясь. Затем выберите квадрат и сделайте так, чтобы он соприкасался с поверхностью раствора APS, прежде чем выпустить его. Накрыв стакан алюминиевой фольгой, инкубируйте его в течение ночи при температуре 25 градусов Цельсия.

Затем, чтобы удалить графеновые пленки MMA из раствора APS, сначала погрузите в раствор вертикально стеклянную крышку, а затем переместите ее в сторону так, чтобы она касалась плавающего квадрата. Затем осторожно снимите защитное стекло, убедившись, что пленка полностью прилипла к боковой стороне защитного стекла при снятии. Погрузите крышку вертикально в молекулярную воду в стакан объемом 50 миллилитров, чтобы выбить прикрепленную пленку в воду.

Аналогичным образом перенесите все пленки в стакан. Оставьте пленки в стакане на 20 минут, прежде чем они будут готовы к приклеиванию к криосеткам.