Распространенной проблемой при подготовке образцов для криоэлектронной микроскопии является локализация частиц на границе раздела воздух-вода, в результате чего частицы принимают предпочтительную ориентацию и денатурируются. Вместо этого лучше, чтобы частицы лежали на поверхности сетки, которую поддерживает тонкая пленка, как это способствует графен. Еще одной проблемой является требование относительно высоких концентраций образцов, которые также могут быть решены с помощью графена.
Сетки с графеновым покрытием обеспечивают множество преимуществ для определения структуры криоЭМ, но исторически сложилось так, что их было трудно изготовить собственными силами, а также непомерно дорого приобрести в коммерческих целях. Этот протокол позволяет надежно осаждать монослойный графен, тем самым снижая барьер для пользователей, использующих эти сетки в своих исследованиях. Графен уникален из-за свойств своего материала.
Он представляет собой монослой углерода и поэтому проявляет минимальный фоновый шум. Другие носители криоЭМ-сетки, такие как тонкий слой хлопьев аморфного углерода или оксида графена, не могут быть применены в виде одного монослоя и вносят больший фоновый сигнал. Теперь, когда мы создали надежный протокол для применения графена в криоЭМ-сетках, мы хотели бы продолжить функционализацию сеток с графеновым покрытием с аффинными ручками для захвата непосредственно из клеточных лизатов.
Это могло бы устранить еще одно узкое место в подготовке криоЭМ-образцов.