Для начала сделайте снимки меченых клубочков под конфокальным или световым флуоресцентным микроскопом. Импортируйте файлы изображений в программное обеспечение для анализа изображений. Нажмите кнопку поверхности, чтобы создать новую поверхность.
Следуйте инструкциям в левой нижней части экрана. Нажмите кнопку «Далее». Поставьте галочку напротив опции сглаживания и введите число, чтобы управлять детализацией поверхности.
Выберите вычитание фона в пороге, и заполните поле приблизительным средним диаметром клубочков. Нажмите кнопку «Далее», при необходимости отрегулируйте и нажмите кнопку «Далее». Выберите нужный диапазон и нажмите кнопку «Далее», чтобы создать поверхность.
Затем нажмите кнопку «Фильтр», а затем кнопку «Добавить», чтобы добавить сферичность для фильтрации несферических объектов. Нажмите кнопку дублирования, чтобы скопировать это новое покрытие. Нажмите кнопку статистики, а затем кнопку «Общие».
Программа представит количество клубочков в виде общего количества поверхностей. Чтобы рассчитать объем клубочков, нажмите кнопку выбора, чтобы выбрать целевые объекты и представить объем каждого объекта. Экспорт статистики в электронную таблицу для дальнейшего анализа.
Чтобы рассчитать объем среза или целой почки, сначала импортируйте изображения в программное обеспечение для анализа изображений. После нажатия кнопки поверхности и ввода числа в параметре сглаживания выберите абсолютную интенсивность и пороговое значение. Нажмите кнопку «Далее».
Отрегулируйте поверхность, пока она не покроет всю ткань, и нажмите кнопку «Далее», чтобы создать поверхность. Нажмите кнопку выбора, чтобы выбрать поверхность всей ткани и представить объем ткани. Наконец, экспортируйте статистику в электронную таблицу.
Используя программное обеспечение для обработки изображений, количество и объем клубочков подсчитывали в почечном срезе в целой почке или в полоске. Используя эти значения, можно рассчитать объемное соотношение и частоту клубочков.
