Для начала поместите предметное стекло, содержащее матрицу, осажденные семенные срезы, в масс-спектрометр. Загрузите образец изображения и с помощью корректирующих отметок пером установите точки обучения в программном обеспечении, на которое вы ссылаетесь. Затем установите коэффициент уменьшения данных 99%, сохраните файл FID для последующей калибровки данных и сохраните метод.
Определите границу анализируемой области с помощью инструмента Добавить область измерения полигона из программного обеспечения масс-спектрометра. Установите ширину растра равной 100 микрометрам. Отредактируйте параметры области измерения с указанием сохраненного метода и сохраните прогон изображения.
Затем начните получение изображений. Используйте матричный кластер и известные загрязнители для создания массового списка в программном обеспечении на вкладке calibrant. Затем во вкладке калибровки откройте созданный список масс.
Щелкните правой кнопкой мыши, чтобы открыть диалоговое окно, и выберите параметр «Установить массы блокировки». Выберите режим гауссова окна с расширением на 0,5 Гаусса и расширением на 3,5 строки. Не проверяйте онлайн-калибровку.
Установите режим на одинарный, пороговое значение 1000 и допуск по массе на пять ppm. Откалибруйте данные вместе с процессом и сохраните инструмент набора 2D-последовательных наборов данных. После калибровки откройте файл dot MIS в совместимом программном обеспечении и измените нормализацию с отсутствия нормы на RMS или TIC.
Перейдите на вкладку редактирования и выберите автоматическую массовую фильтрацию. Заполните начальную массу и конечную массу минимальным и максимальным количеством Далтонов на вашем пороге интереса и нажмите на иконку OK. Выберите выделенный пик интереса в отфильтрованном списке, сгенерированный с числом, соответствующим массовому значению интереса в Дальтоне.
Измените процентное соотношение, чтобы лучше видеть интересующую область. Нажмите на шкалу интенсивности и значки цветовой карты. Щелкните по области изображения и перетащите курсор мыши, чтобы расположить интересующую область.
Измените процент прозрачности, чтобы получить изображение объединенного сигнала на фоне сечения сканирования. Если аналиты, которые необходимо картографировать, известны, постройте график каждого значения M на Z для каждого аналита и сохраните сгенерированные изображения и график спектрального усреднения. Представлен масс-спектр тканей семян Euterpe precatoria и Euterpe edulis, полученных методом MALDI IMS в положительном режиме.
Этот анализ семян E.precatoria с помощью MALDI IMS показал пики, представляющие собой аддукты олигомеров гексозов без добавления соли в матрицу. Были идентифицированы гексозы димеры, тримеры, тетрамеры, пентамеры, гексамеры и до 14 единичных олигомеров. Такие же результаты были получены и для тканей семян E.edulis.
Ящичковые диаграммы для обоих образцов указывают на пиковую интенсивность каждого гексозного олигомера, обнаруженного в семенном эндосперме, демонстрируя их распределение, и несколько более высокое содержание высокой степени полимеризации олигомеров.
