Децеллюляризация селезенки крысы для создания матрицы селезенки для инженерии печени

Для начала заморозьте и разморозьте замороженную селезенку крысы три раза, чтобы лизировать клетки селезенки. На чистом стенде установите перистальтический насос, двухлитровый резервуар, силиконовую трубку с внутренним диаметром 2,4 миллиметра и пузырьковую ловушку. Заполните систему перфузии деионизированной водой.

Держите его включенным в течение 10 минут. Осторожно переложите собранную селезенку в контейнер, наполненный деионизированной водой. Затем подсоедините силиконовую трубку к венозному катетеру, который был введен в селезеночную артерию.

Перфузия с деионизированной водой, 0,1% SDS, 1% Triton X-100 и PBS растворами. Наполните 50-миллилитровую центрифужную пробирку PBS, содержащей 10% пенициллина стрептомицина. Перенесите децеллюляризованный матрикс селезенки в PBS.

Храните его при температуре минус 20 градусов Цельсия до дальнейших экспериментов. Полная децеллюляризация селезенки была достигнута примерно за 11 часов. Цвет постепенно перешел от темно-красного к смоделированному светло-красному и, в конечном итоге, к белому полупрозрачному виду, при этом общая морфология осталась нетронутой.