По крайней мере, через три-четыре дня после операции в оконной камере закрепите мышь, находящуюся под наркозом, в стадии визуализации с помощью газовой анестезии. С помощью светлопольной микроскопии получить изображение с широким полем зрения, обеспечив видимость отступлений реперного маркера на передней рамке DSFC. В тот же день используйте метод прижизненной микроскопии для получения микрососудистого изображения.
Поместив мышь на ложе для МРТ, вставьте иглу-бабочку 27-го калибра с микротрубкой, прикрепленной к хвостовой вене. Закрепите оконную камеру в напечатанном на 3D-принтере иммобилизационном устройстве С помощью иглы 18-го калибра введите ветеринарную глазную смазку в семь трубок на реперном маркере МРТ. Прикрепите реперный маркер к DSFC.
Вставьте кровать в доклинический МРТ-сканер мощностью семь Тесла. Для сбора данных установите поле зрения 32 x 32 мм с матрицей 64 x 64 для 0,5 x 0,5 мм в обычном разрешении с постоянными РЧ-импульсами. Получение корональных и аксиальных Т2 взвешенных изображений для визуализации плоскости оконной камеры.
Назначайте и итеративно переориентируйте сагиттальный Т2-взвешенный набор для выравнивания визуализирующих срезов с DSFC и реперными маркерами, гарантируя, что пятый срез содержит тканевый сигнал в DSFC, а четвертый — нет. Выполните микрососудистую визуализацию с помощью выбранного метода динамической МРТ с контрастным усилением. В рабочем пространстве MATLAB загрузите данные микрососудистой, светлопольной микроскопии и микрососудистой МРТ, затем нажмите кнопку «Выполнить».
Перейдите к файлу, содержащему взвешенные по T2 срезы МРТ, и выберите до четырех срезов, на которых отображаются реперные маркеры. Поставьте точку на каждом из семи реперных знаков на изображении МРТ и сопоставьте их с соответствующей точкой на микроскопическом изображении. Выберите не менее трех микрососудистых ориентиров на микрососудистом изображении svOCT и соответствующих точках на микроскопическом изображении.
Оконтурируйте опухоль на совместном микроскопическом изображении, затем появится набор микрососудистых данных svOKT, совместное микроскопическое изображение и совместно зарегистрированные карты параметров МРТ. Сохраните карту для последующего анализа. Совместная регистрация микрососудистой визуализации, широкопольной микроскопии и МРТ как у здоровых, так и у мышей с опухолями позволяет проводить корреляционный анализ микрососудистых и макрососудистых показателей.
Макрососудистые метрики с динамическим контрастированием показали сильную корреляцию между микрососудистыми метриками, полученными от svOCT, на что указывают значения R-квадрат на обоих графиках. Корреляция была измерена как у здоровых, так и у мышей с опухолями, чтобы оценить способность динамической МРТ с контрастным усилением измерять сосудистые характеристики в значительной степени различных микрососудистых архитектурах.
