Планшетная подготовка к культивированию индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека (ИПСК)

Для начала поместите на лед пробирки, содержащие 25 миллилитров подготовленной холодной среды усовершенствованного DMEM/F-12. Добавьте размороженные матрицы в каждую трубку. Смешайте суспензию, следя за тем, чтобы не образовались комки.

Теперь пипеткой наберите по 250 микролитров разведенных матриц в каждую лунку 24-луночного планшета. Наклоните пластину, чтобы равномерно распределить раствор покрытия. После инкубации с помощью серологической пипетки аккуратно удалите излишки раствора, не царапая поверхности с покрытием.

Немедленно внесите пипеткой 250 микролитров теплой полной среды стволовых клеток в каждую лунку. Чтобы покрыть планшеты для культуры тканей гидрогелем Matrix 4 без ксенола, сначала нагрейте гидрогель до комнатной температуры. Добавьте два объема гидрогеля в пробирку, содержащую один объем 3x питательной среды для стволовых клеток.

Пипеткой втягивайте раствор вверх и вниз, чтобы тщательно перемешать его. Перенесите 250 микролитров гидрогеля в лунки 24-луночного планшета для культивирования тканей. Затем наклоните пластину, чтобы гидрогель распределился равномерно.

Через 10-15 минут покрытые покрытием планшеты готовы к культивированию индуцированных плюрипотентных стволовых клеток.