Подготовка иммунополосок для латерального потока, операция анализа и его количественная оценка

Для начала подготовьте испытательную линию и раствор для нанесения покрытия на контрольную линию. Разведите антитела захвата С-реактивного белка и антикроличий иммуноглобулин G козьего с фосфатным буфером. Далее правильно расположите поливинилхлоридную плиту и снимите защитную бумагу, расположенную в 25 миллиметрах от края плиты.

Выровняйте и приклейте нитроцеллюлозную мембрану по нижнему краю оставшейся защитной бумаги к поливинилхлоридной плите. Распределите растворы для нанесения покрытий на тестовую линию и контрольную линию на нитроцеллюлозную мембрану, расположив ее на расстоянии 20 мм друг от друга, образуя испытательную линию. Для сушки поместите нитроцеллюлозную мембрану в условия с влажностью менее 30% и температурным режимом от 18 до 26 градусов по Цельсию.

Чтобы приготовить конъюгатную прокладку, погрузите ее в раствор для обработки конъюгатной прокладки, затем поместите замоченную конъюгатную прокладку в сушильную печь для ночной сушки. Разбавьте приготовленный раствор конъюгата антител наногранул QD с раствором консерванта и распределите его на конъюгационную подушечку. Для подготовки прокладки образца.

Погрузите прокладку для образца в раствор для обработки прокладки для образца. Затем поместите замоченный образец в сушильную печь, установленную при температуре 45 градусов Цельсия, и сушите в течение 24 часов. Последовательно поместите абсорбирующую бумагу, сопряженную прокладку и прокладку для образцов на поливинилхлоридную доску с нитроцеллюлозной мембраной.

Пипеткой нанесите 10 микролитров образца плазмы или раствора калибратора в один миллилитр буфера PBS, содержащего 0,1% твин 20. Затем переложите 100 микролитров подготовленного разведенного образца на пробную площадку тест-полоски. После 15-минутного прогона наблюдайте за флуоресцентными сигналами тестовой линии и контрольной линии под воздействием ультрафиолетового света для получения качественных результатов.

Вставьте стрип-карту в флуоресцентный считыватель для анализа бокового потока, чтобы получить интенсивность флуоресценции для количественного анализа.