ПЦР-верификация трансгенного паразита с желаемой модификацией локуса cdpk1 для выяснения механизмов резистентности киназы Plasmodium falciparum

Для начала обработайте трансформированных паразитов Plasmodium falciparum нужными препаратами. После двух-трех дней роста паразита центрифугируйте 500 микролитров культуры в микроцентрифужной пробирке при температуре 2400 G в течение пяти минут. Чтобы лизировать эритроциты, инкубируйте один миллилитр ресуспендированных паразитов с 10 микролитрами 10% сапонина при четырех градусах Цельсия в течение пяти минут.

После центрифугирования клеток выбросьте надосадочную жидкость для получения гранул паразита. Промойте гранулу от паразита одним миллилитром PBS и повторно суспендируйте гранулу в 50 микролитрах воды, не содержащей ДНКазы и РНКазы. Нагрейте ресуспендированную гранулу при температуре 95 градусов Цельсия в течение пяти минут и центрифугируйте при 16, 200 G в течение 10 минут при четырех градусах Цельсия.

Перенесите надосадочную жидкость, содержащую ДНК паразита, в свежую пробирку.