Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области хронобиологии и физиологии стресса, такие как то, что сигналы влияют на время появления насекомых. Основным преимуществом этой техники является то, что она автоматизирована и может быть использована для измерения появления большого количества насекомых. Для каждого построенного канала требуются следующие части.
Один коллектор многообразия, один конец крышки, шесть платформы поддерживает, четыре трубки стойки базовые пластины, и четыре трубки стойки лица пластин. С тремя опорами платформы и 33 на 30 сантиметров кусок гофрированного пластика, использовать горячий клей для сборки двух труб стойки платформ на канал строится. Установите электронику в коллектор многообразия, сначала припая 120 ohm резистор к аноду как инфракрасный излучатель и инфракрасный детектор и пять сантиметров длиной 22-калиберной электрической проволоки для обоих катодов.
Аккуратно вставьте детектор в одну розетку коллектора многообразия, а излучатель во вторую розетку. Оба компонента должны плотно прилегать. Кормите провода детектора через канал кабелей и протяните оба провода через отверстие доступа.
Solder все четыре провода к разъему RJ45 Ethernet, используя задний ряд булавок. Оба анода должны быть припой к левой булавке, катод излучателя к правой булавке, и катод детектора к любой из центральных штырей. Безопасный разъем RJ45 над коллектором многообразия отверстие доступа с горячим клеем, обеспечивая не голые провода касаются внутри многообразия.
Далее, начать строительство центрального процессора для системы путем припоя женские головки на через отверстия помечены для Arduino нано, темп, часы и модуль SD. Кроме того, припой женский заголовок на неоцелевой два на пять через отверстие в верхнем левом углу доски PCB для LCD-экрана. Привязать и припой шесть RJ45 гнезда вдоль нижнего края доски PCB.
Solder шесть 470 кг ohm выдвижной вниз резисторов в через отверстие сайтов, расположенных чуть выше RJ45 гнезда. Установите на доску PCB модуль Arduino nano, датчик температуры и влажности DHT, часы и модуль SD. Наконец, подключите десятиконнекторный ленточный провод к разъему LCD-экрана платы PCB.
После того, как система обнаружения была собрана, загрузите и поместите две стойки непосредственно перед запуском эксперимента. Во-первых, убедитесь, что все отверстия в стойке содержат 0,5 миллилитров микро-центрифуги трубки с крышкой удалены, и что трубы плотно подходят. Заполните каждую трубку с одним насекомым выводок ячейки, убедившись, что плоский край стороны сталкивается к открытию.
Затем добавьте одну воздушную мягкую гранулу, и, наконец, один металлический BB. Затем используйте четверть дюйма нейлоновые винты, чтобы прикрепить трубку стойку faceplate, с закругленным краем к нижней части стойки. Размещает стойки трубки на стойке платформы. Начните с отверстий, обращенных вверх, а затем аккуратно поверните на место, чтобы металлические BBs не были освобождены.
Стойки должны быть размещены на краю платформы, так что металлический BB может свободно падать в коллектор, не подпрыгивая от другой части структуры. Вставьте SD-карту в адаптер, а затем запустите центральный процессор, подключив разъем micro-USB в Arduino, а другой конец в любой соответствующий адаптер USB. Lcd экран будет отображать номера от одного до шести, когда готов.
Бросьте один металлический BB в шарик коллектора каждого канала, и смотреть на соответствующий счет, чтобы появиться на экране, и за правильное время для отображения в нижней части экрана. После того, как все насекомые появились, выключить аппарат, отключив Arduino. Стойки могут быть разобраны и очищены для повторного использования.
Во время эксперимента по появлению данные хранятся на карте SD в запятом файле. Используйте SD-карту для передачи данных на компьютер, а RStudio для автоматического создания пузырьков данных. Данные о событиях и температуре сохраняются в одном файле для целостности данных.
Перед анализом импорт запятого файла в программу электронной таблицы. Колонны I и J являются датой и временем появления пчел. Сделайте их столбцами A и B, разрезая и вставить столбцы A через E во вторую электронную таблицу, и сохраните в качестве отдельного файла данных о температуре для дальнейшего анализа.
Эта цифра отображает появление пчел под четырехградумным термо-периодом Цельсия после воздействия холодного стресса во время развития. Эта цифра показывает тот же набор данных, что и только что видел, но с одним из шести каналов забиты BBs, создавая большой пузырь на графике, как отсутствие сигнала неоднократно подсчитывается. Данные с этого канала могут быть обоснованно удалены из анализа.
При попытке этой процедуры, важно помнить, чтобы проверить все части припой, чтобы убедиться, что соединения работают. После своего развития, этот метод проложил путь для исследователей в области хронобиологии и физиологии стресса, чтобы исследовать, какие сигналы эффект сроки появления в одиночных пчел.
