Визуализировай протокол обеспечивает основу отсчета для более широких исследований по защите и грибок растущих муравьев. Основным преимуществом такого подхода является то, что он поможет исследователям распознать ключевые оборонительные поведения, чтобы обеспечить общее понимание для будущей работы. Ссылка на исследования в грибок растущих муравьев, вероятно, будет особенно полезным для молодых исследователей, которые не знакомы с этим поведением.
Некоторые из этих поведений встречаются нечасто, поэтому опытные исследователи, возможно, никогда не наблюдали их. Это руководство будет способствовать сравнению между исследованиями и видов муравьев, иллюстрируя ключевые оборонительные поведения наряду с последовательными определениями. Кроме того, понимание поведения в контролируемых условиях поможет исследованиям в естественных местах обитания, где условия трудно контролировать.
Для начала изолируйте штаммы Эсковопса из лабораторных колоний Acromyrmex echinatior, помещая фрагменты грибного сада, с удаленными муравьи, на чашку Петри с влажной ватой в течение нескольких дней, пока Эсковопси прорастает и не разорится. Передача спор картофеля декстрозы агар пластин, и инкубировать при примерно 23 градусов по Цельсию в течение двух недель. Используя стерильную иглу, удалите зрелые споры из пластин.
Затем прививают споры на новых пластинах в стерильных условиях и инкубируют их при примерно 23 градусах по Цельсию в течение двух недель. Когда гифа выросла, чтобы покрыть всю пластину и в зрелые коричневые споры, привить споры на новые пластины в стерильных условиях. Используя три оригинальные колонии A.Echinatior, получить в общей сложности 36 подколоний с 12 подколоний от каждой родительской колонии.
За четыре часа до введения муравья, добавить чайную ложку размера кусок гриба сад оригинальной колонии, некоторые листья ежевики, и кусок пропитанной водой ваты в коробку. Для подколоний, которые должны быть инфицированы, заполнить цикл прививки со спорами Эсковопси. Затем, привить споры, осторожно нажав небольшую часть гриба сад от 10 до 20 раз.
Для подколоний управления имитируйте применение спор Эсковопси, нажав на грибной сад стерильной циклом прививки от 10 до 20 раз. Для 72-часовых пост-инфекционных наблюдений оставьте половину подколоний нетронутыми в течение 72 часов после введения Эсковопса. Для нулевого часа после заражения наблюдений, сразу же добавить два выводка, четыре несовершеннолетних работников, и четыре крупных работников из родительской колонии в каждой коробке 30 минут до записи.
Затем добавьте ту же смесь рабочих к 72-часовым наблюдениям после заражения за 30 минут до записи. Выполните видеозапись в течение четырех часов для каждой суб-колонии. После записи всех 36 подколоний, просмотрите кадры и оценка поведения интерес для каждого человека в каждой суб-колонии.
Следующие клипы дают описание ключевых различных поведений, которые можно наблюдать во время наблюдений. При просмотре видео, обратите внимание, если муравей останавливает движение ног, чтобы инициировать самостоятельного ухода. Проверьте, чтобы антенны прошли через очистители антенны на передних ногах.
Затем муравей должен очистить ноги и очистители антенны своими частями рта. Кроме того, обратите внимание, если муравей останавливает любые движения ног в фиксированной точке в грибном саду. Наблюдайте, если антенны неподвижны и параллельны, указал на грибок и почти касаясь друг друга близко к кончику челюсти.
Затем, глосса должна появиться лизать грибок. Один или несколько муравьев могут также ухаживать друг за другом. Во время такого поведения муравьи останавливают все движения и стоят в тесном контакте, поддерживая физический контакт.
Затем муравей должен указать свои антенны на принимающего муравья и слегка коснуться приемника. Обратите внимание, что верхние и нижние части рта ухода лиц открыты с глосса возникающих лизать приемник муравья. Наблюдайте, когда муравей останавливает движение, чтобы инициировать уход за метаплеурной железой.
Муравей должен наклониться в одну сторону и достичь одной из своих передних ног назад, чтобы протереть отверстие железы, в то время как лизать другую переднюю ногу с глосса. Затем муравей повторит поведение противоположными ногами. Когда муравей останавливает движения ног в фиксированной точке на грибном саду, обратите внимание, что антенны неподвижны и параллельны, указывая на фиксированную точку грибного сада.
Затем муравей схватит видимые споры Эсковопса и вынесут их из гнезда. Муравей может также остановить движения ног в фиксированной точке на грибок, точка его антенны свободно к куску гриба и нажмите грибок кусок с его антеннами. После этого муравей отсоединит кусочек гриба от остальной части грибковой культуры.
Другое потенциальное поведение может наблюдаться, когда муравей останавливает движения ног в фиксированной точке на грибной сад. Муравей будет согнуть его газера и голову друг к другу, чтобы применить каплю фекальной жидкости к его части рта. По одному муравей будет тянуть передние ноги через челюсти, а антенну через антенные очистители.
Основной целью данного исследования было создание каталога коротких клипов, иллюстрирующих поведение защиты от болезней у муравьев,вырубающих листья. Поведение, описанное в протоколе, было засхоно в экспериментальном сценарии инфекции. В контрольных колониях несовершеннолетние рабочие ухаживали за садовым урожаем больше, чем крупные рабочие.
В зараженных колониях наблюдается несущественая тенденция к увеличению ухода за грибами по сравнению с контрольных колониями. Незначительное увеличение фекального ухода было связано с инфекцией, однако никакой разницы между незначительными и крупными работниками обнаружено не было. Споры проели и грибок проели были как низкой частоты, без существенной разницы наблюдается между инфицированных колоний и контроля.
Тенденция к проедать грибок увеличивается со временем, так как инфекция наблюдается. Немногие из инфицированных колоний с инфекциями на ранних стадиях имели видимые споры, оставшиеся после четырехчасового периода наблюдения. Интересно, что в более поздних стадиях инфекции, муравьи не были способны полностью удалить споры в любой из колоний.
Таким образом, результаты этого эксперимента являются иллюстративным примером того, как компиляция клипов может быть использована для поведенческих исследований, для расчета средних частот для незначительных и основных поведения работников. Мы задокументировали поведение, которое способствует защите муравьев, выращивая грибы, и систематически идентифицировали, описывали и запечатлели такое поведение на пленке. Наши результаты усиливают исследования в этой области, предполагая, почему это трудно для патогена, чтобы заразить колонии, когда сталкиваются с обширным набором поведения и связанных с ними антимикробных соединений.
Мы предоставляем новый инструмент для будущей работы в этой области, и надеемся, что поведенческий каталог окажется ценным в обеспечении консенсуса и рационализации определений, наблюдения и интерпретации поведения.
