Вибрационные спектры генерации sum установлены для исследования интерфейсов с межфациальной избирательностью. Однако метод коэффициента Френеля может помочь решить эффект интерференции при использовании другого интерфейса. Основным преимуществом SFG является межконфессиональная избирательность и чувствительность субмонолайера.
Этот неинвазивный оптический метод подходит для инвестирования различных интерфейсов, таких как твердо-жидкие, твердо твердые, жидко-жидкие, твердого газа и жидкого газа интерфейсов. Мы предлагаем новичкам получить много практики эксплуатации системы SFG с помощью экспертов в области оптики и SFG. Есть не ярлыки.
SFG не был в целом признан в качестве мощного метода, поэтому мы хотели бы привлечь больше интереса аудитории и поощрять больше исследователей применять этот метод. Для начала приготовьте около пяти миллилитров либо двух, либо 4% по весовому раствору поли-2-гидроксиетилметилового метакрилата или ПЕМА в ангидроузовом этаноле. Храните раствор в лаборатории за три дня до его использования.
Далее, замочить четыре ИК-класса фтора кальция право угловой призмы в аналитическом классе ангидрозола, по крайней мере 12 часов. Затем погрузите призмы в 30 миллилитров этанола и протрите поверхности обезжиривания хлопка в течение 10 минут. Промыть призму ультра чистой водой в течение двух минут и высушить их азотным газом.
Затем поместите призмы в очиститель плазмы кислорода и эвакуируйте камеру. Лечить призмы с кислородной плазмы в течение четырех минут и держать их в камере, пока они не используются. Подготовка пленки должна происходить в течение одного часа после плазменной обработки.
В этом исследовании для выборочного обнаружения барьерного интерфейса очень важно выбрать соответствующую толщину пленки в соответствии с расчетным результатом модели коэффициента Фресналя. Когда вы будете готовы подготовить пленки PHEMA, зафиксните чистую призму в держателе призмы на спиновом пальто и нанесите одну каплю раствора PHEMA в этаноле на призму. Запустите спин пальто на 1500 об /мин в течение одной минуты, чтобы подготовить фильм PHEMA.
Пальто дополнительных плазменных обработанных призм с PHEMA таким же образом. Аннеал пленки в вакуумной печи установлен до 80 градусов по Цельсию, по крайней мере 10 часов. Для проведения эксперимента поместите PHEMA покрытием лица призмы в деионизированной воде.
Подождите от 10 до 20 минут, а затем оцените межфашистскую структуру PHEMA в воде и интерфейсы призмы с некоторой спектроскопией генерации частоты. При работе системы FGS не позволяйте световой луч непосредственно прийти в глаза. Для начала подготовки раствора шелкового фиброина нагревают три литра 0,02 молярного карбоната натрия до кипения.
Отварить 7,5 граммов шелковых коконов Bombyx мори в этом растворе, помешивая в течение 30 минут. Перенесите волокнистое вещество в чистый контейнер и перемешайте его в два-три литра деионизированной воды в течение восьми-десяти минут три раза, чтобы смыть нежелательные молекулы серицина. Высушите волокнистое вещество в вакуумной духовке при температуре 60 градусов по Цельсию в течение не менее 15 часов.
Затем растворите один грамм сухого, degummed шелкового фиброина в четырех миллилтерах из 9,3 молярного акевого бромистого лития. Перемешать раствор при 60 градусах по Цельсию в течение двух часов. Затем поместите раствор шелкового фиброина в мешок диализа Далтона 3500.
Диализуть раствор против одного литра деионизированной воды в течение трех дней, меняя воду три раза в день. После завершения диализа храните раствор фиброина шелка при четырех градусах Цельсия. Далее, используйте ранее описанные методы для очистки призмы фтора кальция и покрыть его тонкой полистироловой пленкой из 3,5% по весу полистирола раствора.
Поместите призму с покрытием полистирола в контакт с раствором фиброина шелка и изучите интерфейс фиброина из полистирола с помощью спектроскопии SFG. Чтобы начать подготовку олигонуклеотидного дуплекса, растворите 10 наномолов соответствующего одностругового олигонуклеотида в 0,5 миллилтера ультрапурной воды. Сделай то же самое для бесплатного олигонуклеотида.
Объедините растворы, чтобы получить 10 наномол на миллилитр дуплексный раствор олигонуклеотида. Затем объединить два миллиграмма DPPC, два миллиграмма дейтетерированного DPPC, и один миллилитр хлороформа для получения липидного раствора. Далее, чистые и плазмы лечения фтора кальция призму, как описано ранее.
Прикрепите эту призму к образцу удержания корыта Лангмуир-Блоджетт. Заполните корыто с деионизированной водой и опустите одну сторону призмы в корыто на один миллиметр в минуту. Ввесни несколько микролитров липидного раствора на поверхность воды и подождите, пока поверхностное давление стабилизируется на уровне около 12 миллиневтонов на метр.
Затем начните сжимать липидный монослой со стороны пяти миллиметров в минуту. Когда поверхностное давление достигает 34 миллиневтонов на метр, поднимите призму из корыта на один миллиметр в минуту. Далее приготовьте 500 микролитров смеси раствора дуплексного олигонуклеотида и липидного раствора в соотношении 1 к 100 молар.
Затем замените корыто Лангмуир-Блоджетт цилиндрическим полиэтиленовым контейнером, наполненным деионизированной водой. Введите липидную смесь олигонуклеотида в воду до тех пор, пока поверхностное давление не достигнет 34 миллиневтонов на метр. Положите липидный монослой покрытием лицо призмы в контакте с липидной смесью олигонуклеотида, чтобы сформировать окончательный образец.
Оцените хиральные и ачиральные вибрационные сигналы воды с помощью спектроскопии FSG. В этом первом примере интерфейс между гидрогелями PHEMA и призмой фтора кальция показал явные резкие пики в спектре SFG. Это было связано с плавным интерфейсом между фтором кальция и гидрогелем.
Интерфейс между гидрогелем и окружающей водой имел более широкие, менее интенсивные функции, поскольку молекулы воды могли рассеиваться в основную часть гидрогеля. Здесь, когда концентрация фиброина шелка была выше критической перекрывающейся концентрации, были обнаружены хиральные вторичные структуры на интерфейсе раствора полистирола, если метанол не был добавлен в качестве индуцирующего агента. Ниже критической перекрывающейся концентрации, хиральные сигналы SFG были обнаружены даже без добавления метанола, указывая, что заказанные вторичные структуры образуются без посторонней помощи на интерфейсе раствора полистирола.
В дуплексе олигонуклеотид якорный образец липидного билейера, изменяющий концентрацию ионов кальция, не имел существенного влияния на хиральный водяной сигнал, который в первую очередь соответствует гидратации позже хирального позвоночника в незначительной канавке. В отличие от этого, концентрация кальция сильно влияет на ачирал водные сигналы, которые в первую очередь соответствуют водному слою, окружающему дуплексную цепь и билейер. При всем этом можно было сказать, что хиральный позвоночник водяного слоя может защитить олигонуклеотид от ионов кальция.
Расчет коэффициента Френеля и выбор соответствующей толщины пленки может решить проблемы с помехами. Если мультирефлексия и преломление считаются правильным распределением электрического поля на интерфейсах, можно отрегулировать. Существуют альтернативные методы, которые могут быть использованы для подготовки тонких пленок с желаемой толщины, такие как шаг покрытия и химического осаждения пара.
Обнаружение поверхностных и межфракционных структур, связанных с адгезией, смывом, трением и другими свойствами, может помочь исследователям понять основные механизмы и разработать новые функциональные материалы. Этот метод также может быть применен к другим системам, где необходимо изузнать различные интерфейсы. Тем не менее, среда, которую вы хотите световые лучи распространяются должны быть прозрачными.
