합계 주파수 생성 진동 스펙트럼은 얼굴 간 선택성을 가진 인터페이스를 조사하기 위해 장착됩니다. 그러나 프레스넬 계수 방법은 다른 인터페이스가 있을 때 간섭 효과를 해결하는 데 도움이 될 수 있습니다. SFG의 주요 장점은 얼굴 간 선택성 및 서브모노레이어 감도입니다.
이 비침습적 광학 기술은 고체 액체, 고체 고체, 액체 액체, 고체 가스 및 액체 가스 인터페이스와 같은 다양한 인터페이스를 투자하는 데 적합합니다. 초보자는 광학 및 SFG 전문가의 도움으로 SFG 시스템을 운영하는 연습을 많이 받을 것을 권장합니다. 바로 가기가 없습니다.
SFG는 일반적으로 강력한 기술로 인정받지 못하므로 더 많은 청중의 관심을 끌고 더 많은 연구자들이 이 기술을 적용하도록 장려하고자 합니다. 시작하려면, 무수성 에탄올에서 폴리-2-하이드록시틸 메타크레이트 또는 PHEMA의 중량 용액으로 약 5밀리터를 준비한다. 사용 3일 전에 솔루션을 실험실에 보관하십시오.
다음으로, 4개의 IR 급 칼슘 불소 오른쪽 각진 프리즘을 분석 등급의 무수성 톨루엔에 적어도 12시간 동안 담급니다. 그런 다음 프리즘을 에탄올 30밀리터에 담그고 약 10분 동안 면으로 표면을 닦아냅니다. 프리즘을 2분 동안 초순수물로 헹구고 질소 가스로 건조시다.
다음으로, 프리즘을 산소 플라즈마 클리너에 놓고 챔버를 대피시다. 프리즘을 산소 플라즈마로 4분 동안 치료하고 사용될 때까지 챔버에 보관하십시오. 필름 제제는 플라즈마 처리의 1 시간 이내에 발생해야합니다.
이 연구에서는 장벽 인터페이스를 선택적으로 감지하기 위해 프레스날 계수 모델의 계산된 결과에 따라 적절한 필름 두께를 선택하는 것이 매우 중요합니다. PHEMA 필름을 준비할 준비가 되면 스핀 코터의 프리즘 홀더에 깨끗한 프리즘을 수정하고 에탄올에 PHEMA 용액 을 프리즘에 1방울을 적용하십시오. 1, 500 RPM에서 스핀 코터를 1분 동안 실행하여 PHEMA 필름을 준비합니다.
같은 방법으로 PHEMA와 추가 플라즈마 처리 프리즘을 코팅. 진공 오븐에서 필름을 최소 10시간 동안 섭씨 80도로 설정합니다. 실험을 수행하기 위해 프리즘의 PHEMA 코팅 된 면을 탈온 화 된 물에 배치합니다.
10-20분 정도 기다린 다음 일부 주파수 생성 분광법과 함께 물과 프리즘 인터페이스에서 얼굴 PHEMA 구조를 평가합니다. FGS 시스템을 작동하는 동안 광선이 직접 눈에 들어오지 못하게 합니다. 실크 섬유질 용액을 준비하기 시작하려면 0.02 의 3 리터의 3 리터를 끓이도록 탄산 나트륨을 가열합니다.
이 용액에 7.5 그램의 봄비크스 모리 실크 고치를 30 분 동안 저어줍니다. 섬유질을 깨끗한 용기에 옮기고 2~3리터의 탈이온화된 물로 8-10분 간 저어서 원치 않는 세리신 분자를 씻어낸다. 적어도 15 시간 동안 60섭씨에서 진공 오븐에서 섬유질 물질을 건조시십시오.
다음으로, 9.3 의 어수성 리튬 브로마이드의 4 밀리터에 건조, 탈검 실크 섬유의 1 그램을 용해. 2시간 동안 60°C로 액액을 저어줍니다. 그런 다음 실크 섬유용액을 3, 500 달튼 투석 백에 넣습니다.
3일 동안 1리터의 탈온화된 물에 용액을 투석하여 하루에 세 번 물을 교체합니다. 투석이 완료되면 실크 섬유증 용액을 섭씨 4도에 보관하십시오. 다음으로, 이전에 설명된 방법을 사용하여 칼슘 불소 프리즘을 청소하고 체중 폴리스티렌 용액에 의해 3.5 %에서 얇은 폴리스티렌 필름으로 코팅하십시오.
폴리스티렌 코팅 프리즘을 실크 섬유증 용액과 접촉하고 SFG 분광법과 폴리스티렌 실크 섬유진 인터페이스를 검사합니다. 올리고뉴클레오티드 이중을 준비하기 시작하려면, 초순수의 0.5 밀리터에 적절한 단일 가닥 올리고뉴클레오티드의 10 나노몰을 용해한다. 무료 올리고뉴클레오티드도 마찬가지입니다.
밀리리터 이중 올리고뉴클레오티드 용액당 10나노몰을 획득하기 위해 솔루션을 결합합니다. 그런 다음 DPPC 2밀리그램, 단호DPPC 2밀리그램, 클로로포름 1밀리리터를 결합하여 지질 용액을 얻습니다. 다음으로, 깨끗하고 플라즈마는 이전에 설명한 바와 같이 칼슘 불소 프리즘을 치료합니다.
랭뮤어-블로젯 트로프의 샘플 홀드에 이 프리즘을 부착합니다. 산화된 물로 쓰러를 채우고 프리즘의 한 얼굴을 분당 1밀리미터로 트로프에 넣습니다. 지질 용액의 여러 마이크로리터를 수면에 주입하고 표면 압력이 미터당 약 12 밀리터리에서 안정화될 때까지 기다립니다.
그런 다음 분당 5밀리미터에서 지질 단층 압축을 시작합니다. 표면 압력이 미터당 34 밀리뉴턴에 도달하면 분당 1 밀리미터에서 프리즘을 들어 올립니다. 다음으로 1-100 의 어금니 비율로 이중 올리고뉴클레오티드 용액과 지질 용액의 혼합물500 마이크로리터를 준비한다.
그런 다음 Langmuir-Blodgett 트로프를 탈온화 물로 채워진 원통형 폴리테트라플루오레틸렌 용기로 대체합니다. 표면 압력이 미터당 34 밀리 뉴턴에 도달 할 때까지 물에 올리고 뉴클레오티드 지질 혼합물을 주입하십시오. 지질 올리고뉴클레오티드 혼합물과 접촉하여 프리즘의 지질 단층 코팅 면을 넣어 최종 시료를 형성한다.
FSG 분광법으로 치랄 및 부수 진동 신호를 평가합니다. 이 첫 번째 예에서, PHEMA 하이드로겔과 칼슘 불소 프리즘 사이의 인터페이스는 SFG 스펙트럼에서 선명한 피크를 보였다. 이것은 칼슘 불소와 하이드로겔 사이의 매끄러운 인터페이스에 기인했다.
하이드로겔과 주변 물 사이의 인터페이스는 물 분자가 하이드로겔의 대부분으로 확산 될 수 있기 때문에 더 광범위하고 덜 강렬한 특징을 가지고 있었습니다. 여기서 실크 섬유진 농도가 임계 중첩 농도 이상으로 높았을 때 메탄올을 유도제로 첨가하지 않는 한 용액 폴리스티렌 인터페이스에서 키랄 이차 구조를 검출하였다. 임계 중첩 농도 아래, 키랄 SFG 신호는 솔루션 폴리스티렌 인터페이스에서 보조없이 형성 된 주문 보조 구조를 나타내는 메탄올을 추가하지 않고도 검출되었다.
이중 올리고뉴클레오티드 고정지질 이중층 샘플에서 칼슘 이온 농도를 변화시키는 것은 주로 경미한 홈에서 치랄 척추의 나중에 수분에 대응하는 키랄 수분 신호에 큰 영향을 미치지 않았다. 대조적으로, 칼슘 농도는 주로 복층 체인과 이중층을 둘러싼 물 층과 일치하는 부뇌 물 신호에 영향을 미쳤다. 이 모든 것을 통해 물 층의 키랄 척추칼슘 이온에서 올리고 뉴클레오티드를 보호 할 수 있음을 시사했다.
프레스넬 계수를 계산하고 적절한 필름 두께를 선택하면 간섭 문제를 해결할 수 있습니다. 다중 반사 및 굴절이 인터페이스에서 올바른 전기전지 분포로 간주되는 경우 조정할 수 있습니다. 스텝 코팅 및 화학 증기 증착과 같은 원하는 두께로 박막을 준비하는 데 사용할 수있는 대체 방법이 있습니다.
접착, 휘팅, 마찰 및 기타 특성과 관련된 표면 및 얼굴 내 구조를 감지하면 연구원이 기본 메커니즘을 이해하고 새로운 기능성 물질을 개발하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 메서드는 다양한 인터페이스를 조사해야 하는 다른 시스템에도 적용할 수 있습니다. 그러나 광선이 전파되기를 바라는 매체는 투명해야 합니다.