Toplam frekans üretimi titreşim spektrumları interfacial seçicilik ile arayüzleri araştırmak için donatılmıştır. Ancak Fresnel katsayısı yöntemi, başka bir arabirim olduğunda girişim efektinin giderilmesine yardımcı olabilir. SFG'nin en büyük avantajı interfasiyal seçicilik ve alt monolayer duyarlılığıdır.
Bu noninvaziv optik teknik katı-sıvı, katı-katı, sıvı-sıvı, katı gaz ve sıvı-gaz arayüzleri gibi çeşitli arayüzler yatırım için uygundur. Yeni başlayanların optik ve SFG uzmanlarının yardımıyla SFG sistemini çalıştıran bir çok pratik elde etmelerini öneriyoruz. Kısayollar yok.
SFG genellikle güçlü bir teknik olarak kabul edilmemiştir, bu yüzden daha fazla izleyici ilgi çekmek ve bu tekniği uygulamak için daha fazla araştırmacı teşvik etmek istiyorum. Başlamak için, hidrosusuz etanol poli-2-hidroksietil metakrilat veya PHEMA ağırlık çözeltisi ile iki veya% 4 ya yaklaşık beş mililters hazırlamak. Çözeltiyi kullanmadan üç gün önce laboratuarda saklayın.
Daha sonra, en az 12 saat boyunca analitik sınıf susuz toluen dört IR dereceli kalsiyum florür sağ açılı prizma ıslatın. Daha sonra prizmaları 30 mililters etanol etanol batırın ve yaklaşık 10 dakika boyunca degreasing pamuk ile yüzeyleri silin. Prizmayı ultra saf suyla iki dakika durulayın ve azot gazıyla kurulayın.
Sonra, prizmaları oksijen plazma temizleyicisi yerleştirin ve odayı boşaltın. Prizmaları oksijen plazması ile dört dakika tedavi edin ve kullanılana kadar odada tutun. Film hazırlığı plazma tedavisinden sonraki bir saat içinde yapılmalıdır.
Bu çalışmada bariyer arayüzünü seçici olarak saptamak için Fresnal katsayı modelinin hesaplanan sonucuna göre uygun film kalınlığının seçimi büyük önem taşımaktadır. PHEMA filmlerini hazırlamaya hazır olduğunuzda, bir spin kaplama üzerinde bir prizma tutucutemiz bir prizma düzeltmek ve prizma etanol PHEMA çözeltisinin bir damla uygulayın. Spin coater'ı PHEMA filmini hazırlamak için bir dakika lığına 1, 500 RPM'de çalıştırın.
Coat ek plazma aynı şekilde PHEMA ile prizmalar tedavi. Anneal bir vakum fırında filmler en az 10 saat boyunca 80 santigrat derece ayarlayın. Deney icra etmek için deiyonize su prizma PHEMA kaplı yüz yerleştirin.
10 ila 20 dakika bekleyin ve daha sonra bazı frekans üretimi spektroskopi ile su ve prizma arayüzleri interfacial PHEMA yapısını değerlendirmek. FGS sistemi çalışırken ışık ışınının doğrudan gözlerinize girmesine izin vermeyin. İpek fibroin çözeltisi hazırlamaya başlamak için kaynamaya 0.02 molar sulu sodyum karbonat üç litre ısı.
30 dakika karıştırarak bu çözeltide 7,5 gram Bombyx mori ipek kozakaynatın. Lifli maddeyi temiz bir kap ta aktarın ve istenmeyen sericin moleküllerini yıkamak için sekiz ila 10 dakika boyunca 2-3 litre deiyonize su karıştırın. Lifli maddeyi 60 derecede bir vakum fırınında en az 15 saat kurulayın.
Daha sonra, kuru bir gram çözün, 9.3 molar sulu lityum bromür dört mililters ipek fibroin degummed. Çözeltiyi 60 derecede iki saat karıştırın. Sonra 3, 500 Dalton diyaliz torbasına ipek fibroin çözeltisi yerleştirin.
Üç gün boyunca bir litre deiyonize suya karşı çözeltiyi diyalize, suyu günde üç kez değiştirin. Diyaliz tamamlandıktan sonra, dört santigrat derece ipek fibroin çözeltisi saklayın. Daha sonra, kalsiyum florür prizmasını temizlemek ve ağırlık polistiren çözeltisi ile %3,5'lik ince bir polistiren filmle kaplamak için daha önce açıklanan yöntemleri kullanın.
Polistiren kaplı prizmayı ipek fibroin çözeltisi ile temas halinde yerleştirin ve SFG spektroskopisi ile polistiren ipek fibroin arabirimini inceleyin. Oligonükleotid dupleks hazırlamaya başlamak için, uygun tek iplikçikli oligonükleotitin 10 nanomol'unu 0,5 mililters ultrasaf suda çözün. Ücretsiz oligonükleotid için aynı şeyi yapın.
Mililitre dupleks oligonükleotid çözeltisi başına 10 nanomoles elde etmek için çözümleri birleştirin. Sonra dppc iki miligram birleştirmek, deuterated DPPC iki miligram, ve kloroform bir mililitre lipid çözeltisi elde etmek için. Daha sonra, temiz ve plazma daha önce açıklandığı gibi bir kalsiyum florür prizma tedavi.
Bu prizmayı Langmuir-Blodgett çukurunun örnek tutununa bağla. Çukuru deiyonize suyla doldurun ve prizmanın bir yüzünü dakikada bir milimetrelik çukura indirin. Su yüzeyine lipid çözeltisinin birkaç mikrolitre enjekte edin ve yüzey basıncının metre başına yaklaşık 12 milinewton seviyesinde sabitlemesini bekleyin.
Sonra dakikada beş milimetre lipid monolayer sıkıştırma başlar. Yüzey basıncı metre başına 34 milinewton ulaştığında dakikada bir milimetre de oluk prizma kaldırın. Sonraki bir ila 100 molar oranı dubleks oligonükleotid çözeltisi ve lipid çözeltisi karışımı 500 mikrolitre hazırlamak.
Daha sonra Langmuir-Blodgett yalak bir silindirik politetrafloretilen konteyner deiyonize su ile dolu değiştirin. Yüzey basıncı metre başına 34 milinewtonulaşana kadar su üzerine oligonükleotid lipid karışımı enjekte. Son örneği oluşturmak için lipid oligonükleotid karışımı ile temas prizma lipid monokatmanlı kaplı yüz koyun.
FSG spektroskopisi ile chiral ve achiral su titreşim sinyallerini değerlendirin. Bu ilk örnekte, PHEMA hidrojelleri ve kalsiyum florür prizma arasındaki arayüz SFG spektrumunda net keskin zirveler gösterdi. Bu kalsiyum florür ve hidrojel arasındaki pürüzsüz arayüzü atfedilen oldu.
Su molekülleri hidrojel in toplu içine yayılabilir, çünkü hidrojel ve çevreleyen su arasındaki arayüz daha geniş, daha az yoğun özelliklere sahipti. Burada ipek fibroin konsantrasyonu kritik çakışan konsantrasyonun üzerinde yken, metanol indükleyen bir ajan olarak eklenmedikçe çözelti polistiren arabiriminde chiral sekonder yapılar tespit edildi. Kritik çakışan konsantrasyonun altında, çözelti polistiren arabiriminde desteksiz oluşan ikincil yapıların olduğunu belirten metanol eklenmeden bile chiral SFG sinyalleri tespit edildi.
Dupleks oligonükleotid demirli lipid çift katmanlı örnek kalsiyum iyon konsantrasyonu değişen öncelikle minör oluk chiral omurga daha sonra hidrasyon karşılık chiral su sinyali üzerinde önemli bir etkisi yoktu. Buna karşılık, kalsiyum konsantrasyonu güçlü öncelikle dupleks zinciri ve çift katmanlı çevreleyen su tabakası karşılık achiral su sinyalleri etkiledi. Tüm bunlar üzerinde su tabakasının chiral omurga kalsiyum iyonları oligonükleotid koruyabilir önerdi.
Fresnel katsayısının hesaplanması ve uygun bir film kalınlığının seçilmesi girişim sorunlarını çözebilir. Çoklu yansıma ve kırılma olarak kabul edilirse, arayüzlerde doğru elektrik alan dağılımı ayarlanabilir. Adım kaplama ve kimyasal buhar birikimi gibi istenilen kalınlıkta ince filmler hazırlamak için kullanılabilecek alternatif yöntemler vardır.
Yapışma, mezgit, sürtünme ve diğer özelliklerle ilgili yüzey ve yüzlerarası yapıların saptanması, araştırmacıların altta yatan mekanizmaları anlamalarına ve yeni fonksiyonel malzemeler geliştirmelerine yardımcı olabilir. Bu yöntem, çeşitli arabirimlerin araştırılması gereken diğer sistemlere de uygulanabilir. Ancak, ışık demetleri yaymak istediğiniz orta şeffaf olmalıdır.
