Общей целью этого метода является визуализация функции левой передней нисходящей коронарной артерии у крыс с помощью эхокардиографии для расчета резерва коронарного потока. Этот метод предлагает важный инструмент оценки для диагностики микрососудистой дисфункции в больных сердцах и для оценки для потенциального лечения на протяжении всего исследования. Хотя реперфузионная терапия, как было показано, спасает под угрозой миокарда и улучшает функцию левого желудочка, функциональные аномалии мелких коронарных сосудов могут возникнуть после реканализации коронарной артерии.
Этот метод может дать представление о коронарной микроциркуляции крыс, а также в других моделях, включая инфаркт миокарда, и перегрузку объема давления левого желудочка. Перед предишемией реперфузии хирургии ультразвуковой визуализации, подтвердить отсутствие реакции на боль в крайнем случае в анестезии Фишер 344 крысы. Бритье волос от груди.
Нанесите мазь на глаза животного и поместите животное в положение на спине на встроенной платформе для разогрева от 37 до 38 градусов по Цельсию. Подключите линейный зонд от 13 до 24 мегагерц к ультразвуковому аппарату. Установите предустановку приложения для настройки сердечной визуализации и используйте железнодорожную систему для позиционирования зонда для получения парастернального короткого вида оси.
Используйте микроманипулятор оси XY для перемещения зонда в ростральном направлении, чтобы найти легочную артерию. Перемести зонд, сделав левый желудочек более доступным. После того, как изображение B-режима было захвачено и Cine Stored, нажмите цвет Doppler и визуализировать коронарной артерии в короткой оси.
Красный цвет, как наблюдается в режиме реального времени, указывает на направление потока. После визуализации нижней передней нисходящей коронарной артерии в цветовом режиме Доплера, измените режим на импульсную волну и ищите наличие желтой линии индикатора на коронарной артерии. Поместите желтую линию импульсной волны в середине коронарной артерии, заботясь о том, чтобы угол был параллельным направлению потока, и используйте Cine Store для захвата скорости отдыхающего левого переднего нисходящего коронарного потока и пиковой диастолы волновых форм.
После получения отдыха левой передней нисходящей скорости потока, поместите небольшую полоску марли вокруг основания хвоста и использовать гемостаты, чтобы захватить и скрутить турникет, чтобы применить давление, в результате чего вены увеличить. Аккуратно поместите 25-калибровочный инфузионный иглу бабочки, прикрепленную к 10-миллилитровому шприцу, нагруженный добутамином, в расширенную хвостовую вену и стабилизуйте иглу клеем и куском хирургической ленты. Когда линия инфузии была обеспечена, удалите гемостаты и турникет, чтобы восстановить поток и поместите шприц в инфузионный насос, установленный для введения 20 микрограммов в килограмм в минуту.
Во время инфузии тщательно следите за пиком левой передней нисходящей артерии и частота сердечных сокращений, периодически записывая пики импульсной волны левой передней артерии в режиме Доплера в условиях стресса, вызванного добутамином. После того, как передняя нисходящая коронарная артерия пики и пульс плато во время вызова, остановить вливание, удалить инфузии хвостовой вены набор, и удалить животное с платформы. Затем используйте инструмент пиковой скорости, чтобы получить пиковые диастолические скорости из изображений и вычислить индекс резерва коронарного потока, как соотношение левой передней нисходящей артерии стресс пик диастолической скорости потока отдыха в левой передней части нисходящей артерии пик диастолической скорости потока.
Используя волоконно-оптический источник света, интинировать крысу 18-калибровочный IV катетер и подключиться к катетеру к аппарату искусственной вентиляции легких. Далее используйте 8-0 монофиламентный шов для завязания левой передней нисходящей артерии через 15-миллиметровое отверстие в пятом межреберном пространстве с простым узлом в течение 30 минут. В конце периода ишемии, визуально подтвердить ишемии через обесцвечивание поверхности сердца и освободить лигатуры.
Reperfusion может быть проверена покраснением ранее обесцвеченной области сердечной мышцы. Через 72 часа после операции измерьте коронарный поток и резерв коронарного потока, как это было продемонстрировано, и сравните измерения с измерениями, полученными до травмы. В этом репрезентативном эксперименте, до операции по перепроверке ишемии, отдыхающая левая передняя нисходящая скорость коронарной артерии была измерена как приблизительно 423 миллиметра в секунду, чтобы более чем удвоить скорость после инфузии добутамина.
Через 72 часа после реперфузии ишемии, отдыхающая левая скорость нисходящей коронарной артерии была значительно выше по сравнению с отдыхающей левой передней нисходящей скоростью коронарной артерии перед операцией. Стресс-реакция на тест на добутамин после травмы была значительно снижена по сравнению с ответом до операции ответов. Резерв коронарного потока рассчитывается как отношение пиковой скорости потока во время стресса к скорости потока покоя и был приблизительно 2,1 у молодых крыс до операции, но значительно сократился через 72 часа после травмы.
Кроме того, не произошло существенных изменений в систолической функции левого желудочка через 72 часа после травмы. После его разработки этот метод позволит исследователям исследовать и использовать ультразвуковую визуализацию коронарных артерий в моделях мелких животных, которые точно имитируют состояние заболеваний человека. После просмотра этого видео, вы должны иметь очень хорошее понимание того, как измерить коронарный кровоток и оценить коронарной микроциркуляции в небольшой модели сердечной болезни животных.
