Этот метод направлен на модель переедания и последующего ожирения путем предоставления доступа к широкому спектру вкусных продуктов с высоким содержанием сахара и насыщенных жиров. Разнообразие и вкусность диеты гарантирует, что переедание надежно способствует, что приводит к существенным нарушениям обмена веществ в течение нескольких недель. Предоставление столовой диеты позволяет тщательно изучить метаболические и нервные изменения, связанные с ожирением.
Визуальная демонстрация этого метода важна, поскольку можно продемонстрировать материально-технические ограничения, а также то, как планирование и организация могут сделать кормление более эффективным. Во-вторых, поскольку модель предполагает более тесное взаимодействие с крысами, важно также продемонстрировать, как правильно распределять и собирать пищу, не подчеркивая их. Демонстрация процедуры будет Сара-Джейн Ли, аспирант, и Майк Кендиг, исследователь postdoc из моей лаборатории.
Чтобы начать эту процедуру, получить соответствующее количество столовой пищи, и оттаивать его за 24 часа до использования. Пища может быть размороврета с помощью микроволновой печи, но не должны быть представлены в то время как горячие. Изменение типа столовой диетические продукты, предлагаемые ежедневно гарантирует, что разнообразие максимизируется и клетки загрязнения сводится к минимуму.
Как крысы едят большую часть своего ежедневного потребления в начальной части темного цикла, график кафетерия питания пополнения близко к началу темного графика, так что пища свежая в это время. Пополняй кафетерийную диету каждый день. Чтобы накормить чау-групп, поверните бутылки с водой вокруг, чтобы носики вверх, и поместите клетку на рабочее пространство.
Снимите крышку и слегка потревожите постельные принадлежности в течение примерно 20 секунд, чтобы имитировать процесс сбора продуктов питания из постельных принадлежностей столовых диетических клеток. Затем поместите небольшую горсть гранул чау из пищевого бункера в постельные принадлежности, чтобы приравнять воздействие пищи на клетке постельных принадлежностей. Замените крышку клетки и верните клетку в стойку.
Когда клетка будет урегулирована, верните бутылки с водой в их первоначальную ориентацию. Чтобы накормить группы кафетерия, поместите диетические элементы кафетерия в помеченный контейнер для каждой клетки. Включите бутылки с водой вокруг так носики вверх, поместите клетку на рабочее пространство, и удалить крышку.
Удалите как можно больше старой диеты кафетерия из постельных принадлежностей, как это возможно, и место свежей диеты кафетерия в клетку. После этого закройте клетку и верните ее на стойку. Когда клетка будет урегулирована, замените бутылки с водой и бутылки с сахарозой.
Пополнить чау, воду и сахарозу бутылки по мере необходимости. При начале диеты кафетерия, измерить вес тела и 24-часовое потребление пищи по крайней мере два раза в неделю, чтобы контролировать эффективность диеты. Начните измерения потребления пищи ближе к наступлению темной фазы.
Цель представить тот же набор продуктов кафетерия на дни измерения потребления пищи, как приравнивание для вкуса и плотности энергии позволит точный мониторинг изменений с течением времени. Во-первых, подготовить диету кафетерия и поместить в помеченный контейнер для каждой клетки, убедившись, что весят и записывать каждый компонент. Пополнить воду, сахарозу и чау уровнях по мере необходимости.
Для управления клетки, включите бутылки с водой вокруг так носики вверх, поместите клетку на рабочем месте, и удалить крышку. Запись веса бутылки с водой и чау. Взвесить крыс, и передать их в клетку со свежими постельными принадлежностями, наряду с обогащением окружающей среды.
Затем замените крышку клетки, верните клетку в стойку и поверните бутылки с водой. Небольшие знаки о том, потребление пищи могут быть добавлены в клетку, чтобы уведомить обслуживающего персонала и исследователей не прикасаться к бутылкам и чау. Для кафе клетки, выполнять этот же процесс, но и рассеять предварительно взвешенный контейнер столовой пищи вокруг клетки со свежими постельными принадлежностями, прежде чем крысы передаются.
Оставьте крыс на 24-часовой период с минимальными нарушениями, и записывать любые непредвиденные нарушения. После этого, запись веса бутылки с водой и чау для чау-клетки, и тщательно искать постельные принадлежности для кусочков чау. Как только это будет завершено, удалить признаки приема пищи из клеток.
Затем приготовьте свежую диету кафетерия для клеток кафетерия. Выполните следующий процесс для каждой клетки кафетерия. Завехай вес воды, чау-чау и сахарозы.
Снимите крышку клетки и обогащение окружающей среды. Тщательно удалите фрагменты кафетерия из постельных принадлежностей и поместите в отдельные контейнеры, убедившись, что удалить самые крупные куски, а затем систематически просеять все клетки постельных принадлежностей от одного конца к другому, используя нежные радикальные движения. Распределить новую диету кафетерия вокруг клетки, вернуть обогащение окружающей среды, закрыть крышку клетки, и вернуть клетку в стойку.
Удалите знак потребления пищи, и записывать вес каждого кафе питание до ближайшей 10-й грамма. Крысы даются вкусные продукты для моделирования так называемой западной диеты. Диета кафетерия увеличивает потребление энергии в 2,5 раза по сравнению с контролем чау.
Кормление в кафе приводит к увеличению массы тела на 20% по сравнению с контролем через три-четыре недели. После шести недель диеты, средняя разница в увеличении веса между группами составляет 67%и ожирения примерно в два раза. Потребление макроэлементов в столовой согласуется между полами и возрастами, при этом примерно 8% энергии потребляется в качестве белка, 34% - жира и 58% - углеводов.
Наше техническое обслуживание чау обеспечивает 22%белок, 13% жира и 65% углеводов. Кафетерий кормили крыс переедать все три макроэлементов по отношению к контролю. Драматическая гиперфагия обусловлена преимущественно потреблением углеводов и жиров.
Самки крыс могут быть особенно уязвимы для обезогенных эффектов столовой диеты. В этой когорте пожилых крыс, кафетерий кормили женщин были 20% тяжелее и ели в 3,8 раза больше энергии только через две недели по отношению к контролю. После шести недель диеты, увеличение массы тела было больше, и жировая масса была удвоена в кафетерии кормили крыс.
Обеспечение недостаточной столовой пищи может ограничить потребление, поэтому убедитесь, что есть пища, оставленная в клетках кафетерия. Кроме того, различные наборы продуктов кафетерия могут изменить потребление макроэлементов. Проведение процедур приема пищи на постоянной основе обеспечит точное измерение.
Тщательное планирование диеты, чтобы обеспечить продукты являются приемлемыми и разнообразными является ключевым фактором. Эффективное администрирование диеты кафетерия может быть трудоемким и требует тщательного планирования и экспериментальной работы по установлению стабильной гиперфагии и, как следствие, увеличению веса. Мы можем контролировать метаболическую функцию с помощью тестов толерантности к глюкозе, а также когнитивные функции через тесты памяти распознавания, подвергая животных диете кафетерия.
Затем мы можем проанализировать многие периферические метаболические ткани и области мозга посмертно. Этот метод может быть использован у крыс и мышей и иногда распространяется на нечеловеческих приматов. Столовая диета может быть использована для изучения дисрегулируемого поведения кормления в присутствии гиперпалатности, а также влияние ожирения на все органные системы.
Этот метод диеты кафетерия добавил к нашему пониманию этиологии и последствий переедания и ожирения, а также потенциального образа жизни и фармакологических подходов для улучшения результатов в отношении здоровья.
