Каждые 10 минут у кого-то в Австралии сердечный приступ. Это может оставить их с поврежденной сердечной мышцы, и что может привести к сердечной недостаточности. Мы обнаружили, что мы можем преобразовать стволовые клетки, из крови или кожи, в бьющимся клеткам сердца.
Затем, если мы поместим эти перепрограммированные клетки, через наш 3D биопринтер, используя биоинк, мы считаем, что мы можем сделать сердечные пятна с клетками, соответствующими собственным клеткам людей. Глубоко анестезированные мыши, используя кетамин ксилазин, интубирован с помощью 20 калибровочный катетер. После инортации трекера мышь аккуратно помещается на грелку, а затем подключается к аппарату искусственной вентиляции легких, который автоматически устанавливает целевой объем в зависимости от веса мыши.
Под легкой анестезией с использованием фтора 2%iso, мышь просто чиста с йодом и этанолом. Левая боковой торакотомия выполняется, чтобы разоблачить сердце. Втягиватель помещается между третьим и четвертым ребром.
Перикард тщательно разрезают. LAD определены под микроскопом. Для шага перевязки LAD, важно, чтобы избежать шва резки через LAD.
Таким образом, укрепляющий кусок 3.06 шелковый шов помещается на сердце, как показано, работает в том же направлении и только на вершине LAD. Используя шелковый шов 7.06, LAD изолирован и постоянно перевязан. Это позволяет бланшировать сердце, которое получает сердечный приступ.
Это приведет к реконструкции и левый желудочек потерпит неудачу с течением времени. 3D биопечать сердца патч генерируется в лаборатории с помощью 3D биопринтера. Это позволяет слой за слоем, осаждение сердечных клеток, используя сочетание клеток и гидрогелей.
Вы можете увидеть один плавающий в этом видео, а теперь на этом изображении. Вот изображение патч внешний вид, когда изображены эпифлуоресценции световой микроскопии в колодец из шести пластины хорошо. Патч был окрашен пятном Hoechst для ядер клеток, и это синее пятно также подчеркивая аутофторесцентные гидрогели.
Это нетронутый альгенат желатин патч подходит для трансплантации, похож на тот, который показан в видео. С помощью нашего метода, большинство патчей начали распадаться между 14 и 28 дней, в культуре, как показано здесь на этом изображении другого патча, который распался. Мы обнаружили, что оптимальное время для пересадки патчей было между днем семь и день 14 после биопечати.
Это было, когда патчи, содержащие сердечные клетки начали бить, показывая степень созревания тканей, но до патчи начали распадаться. Патч привозят в хирургическую комнату, и медленно и осторожно помещают поверх сердца в части мыши. Тщательно также перемещается в область вывода.
Опровержение медленно удаляется. Наконец, третье и четвертое ребра закрываются вместе с помощью 6,0 проленового шва. Вместе с мышцей ребра закрываются, после чего закрывается кожа.
После закрытия грудной клетки, мышь вводится с антиседан и фуросемид. Медленно, мышь будет восстановить независимую дыхательную активность, и будет реагировать на щипать ногой. Мышь внимательно контролируется, и как только она просыпается от анестезии, она помещается в свою собственную клетку.
Это изображение показывает, с принятой области, где биопечать патч будет сидеть на верхней части сердца мыши. В заключение, мы показали, что 3D биопечатные альгенатные желатиновые патчи могут быть пересажены нашим методом, на эпикардий, в мышиной модели инфаркта миокарда. В фазе биопечати, алгенат желатина гидрогели имеют отличную печать из-за их реологических свойств, что позволяет экструзии без повреждения клеток, но и с биомеханической прочности, чтобы сохранить свою структуру после 3D биопечати, и во время трансплантации.
Наш метод, вероятно, будет широко осуществим, а также подходит для тестирования нескольких групп 3D биопечатных патчей. Например, с разным клеточным содержимым.
