Полуавтоматическое выделение стромально-васкулярной фракции из белой жировой ткани мыши с помощью тканевого диссоциатора

Нас интересуют коричневый и бежевый подтипы адипоцитов, которые рассеивают энергию в виде тепла, в то время как белые адипоциты обычно накапливают энергию, поскольку наша цель - разработать новое лечение ожирения и диабета, основанное на стимулировании расхода энергии, а не на подавлении потребления энергии. Мы идентифицировали транскрипционный фактор, NFI, как критический регулятор дифференцировки коричневых адипоцитов с помощью полногеномного открытого хроматинового анализа. NFI и главный транскрипционный регулятор адипогенеза, PPAR-гамма, локализуются как специфические для бурого жира энхансеры.

В процессе выделения стромально-васкулярной фракции из жировой ткани мыши ручное измельчение и коллагеназное переваривание жировой ткани может привести к экспериментальной изменчивости и контаминации. В нашем методе используется тканевый диссоциатор для расщепления коллагеназы, который облегчает выделение SVF, снижает экспериментальную изменчивость и контаминацию, а также улучшает воспроизводимость. Эксперименты с использованием индивидуально-дифференцированных адипоцитов незаменимы для исследований в нашей области.

Наш протокол обеспечит простое и воспроизводимое выделение SVF для последующей дифференцировки адипоцитов и ускорит исследования в нашем сообществе. В настоящее время мы исследуем роль NFI в метаболизме всего тела, таком как масса тела и глюкоза, используя модели мышей с усилением и потерей функций. В ближайшем будущем мы также изучим другие фармакологические активации NFI для каждого последующего пути.