Использование визуализации STED живых клеток для визуализации ультраструктуры внутренней мембраны митохондрий в моделях нейрональных клеток

Наша исследовательская программа сосредоточена на структурных и функциональных аспектах митохондрий, особенно в том, что касается дисфункции, связанной со старением. С этой целью мы используем широкий спектр биофизических, биохимических и структурных методов для изучения основных механизмов митохондриального старения и разработки терапевтических вмешательств для сохранения и восстановления здоровья митохондрий. Функция и структура митохондрий неразрывно связаны.

Стандартные методы световой микроскопии подходят для измерения крупномасштабных митохондриальных особенностей, таких как базовая морфология и сетевые структуры. Анализ ультраструктуры или особенностей митохондрий, требующих более высокого разрешения, чем та, которое обеспечивает традиционная оптическая микроскопия, обычно выполняется с помощью электронной микроскопии или томографии на фиксированных образцах. Микроскопия сверхвысокого разрешения — это метод визуализации, основанный на флуоресценции, который измеряет особенности за пределами дифракционного предела.

Для митохондрий это включает в себя измерения распределения белков в наноразмерах и архитектуры кристаллов. Описанный здесь протокол визуализации позволяет исследователям измерить детальную структуру внутренней мембраны в живых клетках. Визуализация живых клеток позволяет нам наблюдать и количественно анализировать сложные особенности крист в физиологически значимых условиях без необходимости фиксации образца.

Это даст исследователям новое представление о динамических изменениях, которые происходят в ультраструктурных элементах и их временных реакциях на стрессоры и фармакологические соединения.